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水稻T-DNA插入突变库构建及短根突变体的筛选和分析

中文摘要第1-5页
英文摘要第5-9页
缩略词表第9-10页
第一章 研究背景第10-24页
   ·T-DNA插入突变体库的建立第10-14页
     ·插入突变法第10-12页
     ·T-DNA插入突变的整合机制第12-13页
     ·T-DNA插入突变的研究进展第13-14页
   ·植物根系发生发育的研究进展第14-17页
     ·植物根系的形态结构第14-16页
     ·水稻根系的发育方式第16-17页
     ·水稻根系的功能第17页
   ·植物激素对根的影响第17-19页
     ·生长素第18页
     ·乙烯第18-19页
     ·其它激素第19页
   ·植物短根突变体及其分子机理的研究现状第19-22页
     ·水稻短根突变体第19-20页
     ·其他植物短根突变体及其分子机理第20-22页
   ·水稻根系研究的目的和意义第22-23页
   ·本研究目的及技术路线第23-24页
第二章 材料与方法第24-33页
 1 材料第24页
   ·遗传转化材料第24页
   ·水稻苗期突变体的筛选材料第24页
 2 方法第24-33页
   ·水稻胚性愈伤的诱导第24页
   ·农杆菌的培养及活化第24-25页
   ·农杆菌转化水稻胚性愈伤组织第25页
   ·转基因植株的GUS检测第25-26页
     ·β-葡糖醛酸糖苷酶(gus)基因的瞬时表达分析第25-26页
     ·β-葡糖醛酸糖苷酶(gus)基因在转化植株中的表达分析第26页
   ·CTAB法提取水稻基因组DNA第26页
   ·转基因植株的PCR检测第26-27页
   ·荧光定量PCR检测转基因植株的拷贝数第27-28页
   ·水稻苗期突变体的筛选第28页
   ·IAA、NAA对水稻苗期的影响第28-29页
   ·PCR-WALKING的扩增方法第29-30页
     ·引物设计第29页
     ·酶切连接第29-30页
     ·PCR-walking扩增第30页
   ·PCR产物的纯化回收及测序第30-32页
     ·PCR产物的纯化回收第30-31页
     ·PCR产物的测序第31-32页
   ·侧翼序列的同源性比对第32-33页
     ·核酸序列的比对第32页
     ·蛋白序列的比对第32-33页
第三章 结果第33-44页
   ·转化体系的建立第33页
   ·GUS组织化学染色第33-34页
   ·PCR检测结果第34页
   ·拷贝数的检测第34-37页
     ·扩增曲线第35页
     ·标准曲线第35-36页
     ·拷贝数的估算第36页
     ·溶解曲线分析第36-37页
   ·水稻突变体表型第37-38页
   ·IAA、NAA对水稻苗期的影响第38-42页
     ·不同浓度NAA/IAA对水稻根伸长的影响第39-40页
     ·不同浓度NAA/IAA对水稻根数的影响第40-41页
     ·不同浓度NAA/IAA对水稻芽伸长的影响第41-42页
   ·侧翼序列分析第42-44页
     ·侧翼序列扩增结果第42-43页
     ·测序结果第43页
     ·核酸序列比对结果第43页
     ·蛋白序列比对结果第43-44页
第四章 讨论第44-47页
   ·遗传转化的影响因素第44页
   ·实时荧光定量PCR第44-45页
   ·苗期突变体的筛选第45-46页
     ·短根突变体的遗传分析第45页
     ·水稻多苗突变体的来源第45-46页
   ·植物激素对根、芽的影响第46页
   ·侧翼序列分析第46-47页
第五章 结论与展望第47-48页
   ·结论第47页
   ·展望第47页
   ·后续工作第47-48页
参考文献第48-53页
附录第53-58页
 附录Ⅰ第53-55页
 附录Ⅱ第55-58页
致谢第58页

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