| 摘要 | 第1-8页 |
| Abstract | 第8-12页 |
| 缩略词 | 第12-13页 |
| 目录 | 第13-16页 |
| 第1章 前言 | 第16-44页 |
| ·尼古丁的性质及其危害 | 第16-17页 |
| ·尼古丁的理化性质 | 第16页 |
| ·尼古丁的危害 | 第16-17页 |
| ·微生物代谢尼古丁研究进展 | 第17-31页 |
| ·微生物代谢尼古丁途径研究进展 | 第17-24页 |
| ·微生物代谢尼古丁分子生物学研究进展 | 第24-27页 |
| ·微生物代谢尼古丁酶学研究进展 | 第27-30页 |
| ·恶臭假单胞菌S16代谢尼古丁研究进展 | 第30-31页 |
| ·本课题研究意义及研究内容 | 第31-33页 |
| ·立题背景与研究意义 | 第31-33页 |
| ·研究内容 | 第33页 |
| ·参考文献 | 第33-44页 |
| 第2章 恶臭假单胞菌S16基因组文库的构建及筛选 | 第44-78页 |
| ·材料与方法 | 第44-56页 |
| ·主要试剂及仪器 | 第44-46页 |
| ·菌株和质粒 | 第46-47页 |
| ·分析方法 | 第47-48页 |
| ·菌株S16生长曲线测定 | 第48-49页 |
| ·ZAP文库构建 | 第49-53页 |
| ·pUC文库构建 | 第53-56页 |
| ·Southern杂交和PCR分析基因来源 | 第56页 |
| ·结果与讨论 | 第56-75页 |
| ·ZAP文库和pUC文库的构建 | 第56-61页 |
| ·尼古丁降解转化子筛选、克隆、测序和分析 | 第61-75页 |
| ·本章小结 | 第75-76页 |
| ·参考文献 | 第76-78页 |
| 第3章 尼古丁氧化还原酶基因的克隆及表达 | 第78-108页 |
| ·材料与方法 | 第78-90页 |
| ·主要仪器和材料 | 第78-81页 |
| ·培养基的配制 | 第81页 |
| ·细菌培养 | 第81页 |
| ·感受态细胞E coli DH5α和E coli BL21的制备 | 第81-83页 |
| ·nicA基因的亚克隆 | 第83-84页 |
| ·N-methylmyosmine的制备及重氧水实验 | 第84-85页 |
| ·nicA基因的克隆 | 第85-88页 |
| ·nicA基因表达及重组蛋白的纯化 | 第88-90页 |
| ·重组NicA蛋白的性质研究及代谢途径推测 | 第90页 |
| ·结果与讨论 | 第90-105页 |
| ·尼古丁氧化还原酶基因的分离 | 第90-92页 |
| ·nicA基因重组质粒的构建 | 第92-95页 |
| ·重组蛋白的表达及电泳检测 | 第95-97页 |
| ·重组蛋白的纯化 | 第97-99页 |
| ·纯化NicA蛋白的肽段分析 | 第99-100页 |
| ·重组NicA蛋白的性质研究及代谢途径推测 | 第100-105页 |
| ·本章小结 | 第105页 |
| ·参考文献 | 第105-108页 |
| 第4章 6-羟基-3-琥珀酰吡啶羟化酶基因的克隆及表达 | 第108-128页 |
| ·材料与方法 | 第108-112页 |
| ·主要仪器和材料 | 第108-110页 |
| ·分子操作和序列分析 | 第110页 |
| ·代谢中间产物检测方法 | 第110-111页 |
| ·hsp基因的克隆、表达、纯化与MALDI-TOF肽段分析 | 第111-112页 |
| ·HSP羟化酶酶活检测 | 第112页 |
| ·结果与讨论 | 第112-124页 |
| ·HSP羟化酶基因的克隆、序列分析及表达 | 第112-118页 |
| ·HSP羟化酶的纯化与性质研究 | 第118-123页 |
| ·HSP羟化酶二级结构预测 | 第123-124页 |
| ·本章小结 | 第124页 |
| ·参考文献 | 第124-128页 |
| 第5章 Pseudomonas putida S16大质粒的检测 | 第128-148页 |
| ·材料与方法 | 第128-137页 |
| ·主要试剂及仪器 | 第128-130页 |
| ·菌株S16大质粒的提取 | 第130-135页 |
| ·倒转电场电泳 | 第135页 |
| ·Southern杂交 | 第135-137页 |
| ·结果与讨论 | 第137-146页 |
| ·本章小结 | 第146页 |
| ·参考文献 | 第146-148页 |
| 结束语 | 第148-150页 |
| 附录 | 第150-154页 |
| 致谢 | 第154-156页 |
| 论文与专利申请 | 第156-158页 |
| 附件 | 第158-199页 |
