摘要 | 第1-4页 |
Abstract | 第4-7页 |
1 前言 | 第7-25页 |
·天然色素概述 | 第7-8页 |
·花青素概述 | 第8-9页 |
·紫色马铃薯概述 | 第9-10页 |
·花色素生物合成的遗传和生物化学 | 第10-16页 |
·花青素转录调控基因的研究现状 | 第16-24页 |
·本研究的目的和意义 | 第24页 |
·本研究的技术路线 | 第24-25页 |
2 材料与方法 | 第25-42页 |
·材料与试剂 | 第25页 |
·材料 | 第25页 |
·菌种 | 第25页 |
·试剂 | 第25页 |
·仪器设备 | 第25页 |
·紫色马铃薯WD40、MYC、MYB 基因的克隆 | 第25-26页 |
·紫色马铃薯紫皮,紫肉RNA 的提取 | 第25-26页 |
·RNA 电泳检测 | 第26页 |
·引物的设计 | 第26-28页 |
·克隆马铃薯WD40 基因的引物设计 | 第26-27页 |
·克隆马铃薯MYC 基因保守片段的引物设计 | 第27页 |
·马铃薯MYB 基因保守片段引物设计 | 第27-28页 |
·PCR 反应体系的建立 | 第28-34页 |
·马铃薯WD40 基因片段PCR 扩增体系的建立 | 第28-32页 |
·马铃薯MYC2 基因片段PCR 扩增体系的建立 | 第32-33页 |
·马铃薯MYB 基因片段PCR 扩增体系的建立 | 第33-34页 |
·目的基因的克隆与测序 | 第34-38页 |
·目的片段的回收 | 第34-35页 |
·目的片段与T 载体的连接 | 第35页 |
·大肠杆菌感受态的制备 | 第35页 |
·大肠杆菌感受态的检测和转化方法 | 第35-36页 |
·小量提取质粒(《分子克隆实验指南》2002) | 第36-37页 |
·聚乙二醇沉淀法纯化质粒DNA | 第37-38页 |
·重组子的酶切鉴定 | 第38页 |
·重组子的保存及测序 | 第38页 |
·测序 | 第38页 |
·核酸序列分析 | 第38-39页 |
·基于Blastn 软件的核酸同源性分析 | 第38页 |
·cDNA 序列开放阅读框分析 | 第38-39页 |
·蛋白质功能预测 | 第39页 |
·基于Blastx 软件的蛋白质同源性分析 | 第39页 |
·蛋白质的结构功能域分析 | 第39页 |
·候选基因及片段的RT-PCR 表达分析 | 第39-42页 |
3 结果与分析 | 第42-67页 |
·紫色马铃薯WD40 基因的克隆 | 第42-53页 |
·WD40 基因保守区域的克隆 | 第42页 |
·测序结果及序列分析 | 第42-43页 |
·马铃薯stwd40 基因cDNA 片段3’端的克隆 | 第43-45页 |
·马铃薯stwd40 基因cDNA 片段5’端的克隆 | 第45-47页 |
·马铃薯stwd40 基因阅读框架分析 | 第47-50页 |
·蛋白质功能预测 | 第50-53页 |
·紫色马铃薯STMYC2 基因的克隆 | 第53-63页 |
·马铃薯stmyc2 基因保守区域的克隆 | 第53-55页 |
·测序结果及序列分析 | 第55-63页 |
·紫色马铃薯MYB基因的克隆 | 第63-67页 |
·马铃薯myb 基因保守区域的克隆 | 第63-64页 |
·测序结果及序列分析 | 第64-65页 |
·蛋白质功能预测 | 第65-67页 |
4. 紫色马铃薯花青素候选调控基因的表达 | 第67-76页 |
·紫色马铃薯不同组织RNA 的提取 | 第67-68页 |
·RT-PCR 分析候选调控基因的表达模式 | 第68-76页 |
·候选基因在黄色马铃薯中的对照实验 | 第73-76页 |
5 讨论 | 第76-78页 |
6 结论 | 第78-79页 |
7 参考文献 | 第79-83页 |
8 致谢 | 第83页 |