| 摘要 | 第1-6页 |
| Abstract | 第6-10页 |
| 引言 | 第10-15页 |
| 1 小麦抗叶锈病基因的研究进展 | 第10-11页 |
| 2 cDNA-AFLP技术的研究进展 | 第11页 |
| 3 EST技术及其应用 | 第11-12页 |
| 4 cDNA文库构建技术 | 第12-13页 |
| 5 cDNA文库与基因克隆 | 第13-14页 |
| 6 本文研究内容 | 第14-15页 |
| 第一章 小麦抗叶锈近等基因系 TcLr19 CDNA-AFLP 分析 | 第15-38页 |
| 1 试验材料与方法 | 第15-27页 |
| ·主要仪器及供试试剂 | 第15-16页 |
| ·供试材料 | 第16页 |
| ·试验方法 | 第16-27页 |
| 2 结果与分析 | 第27-34页 |
| ·小麦叶锈菌株的筛选 | 第27页 |
| ·小麦总 RNA 的提取 | 第27-28页 |
| ·mRNA 的纯化 | 第28页 |
| ·双链 cDNA 的合成 | 第28-29页 |
| ·预扩增结果 | 第29页 |
| ·选择性扩增结果 | 第29-30页 |
| ·TcLr19 的 cDNA-AFLP 分析 | 第30-31页 |
| ·cDNA 差异片段的回收及克隆 | 第31-32页 |
| ·差异片段的序列测定及分析 | 第32-33页 |
| ·19-77 的序列分析和拼接结果 | 第33-34页 |
| 3 讨论 | 第34-38页 |
| ·关于 cDNA-AFLP 技术 | 第34-35页 |
| ·利用 cDNA-AFLP 技术分析小麦─叶锈菌亲和性互作/非亲和性互作体系的基因表达 | 第35-36页 |
| ·关于电子克隆技术 | 第36页 |
| ·分离的差异片段代表的生物学意义 | 第36-38页 |
| 第二章 叶锈菌诱导小麦叶片 CDNA 文库构建 | 第38-53页 |
| 1 材料与方法 | 第38-45页 |
| ·试验材料 | 第38-40页 |
| ·试验方法 | 第40-45页 |
| 2 结果与分析 | 第45-50页 |
| ·接种小麦叶锈菌 04-15-8①的 TcLr19 和感病对照 Thatcher 的抗病性鉴定 | 第45-46页 |
| ·文库构建样品的总 RNA 和 mRNA 浓度与质量检测结果 | 第46-47页 |
| ·cDNA 文库的构建 | 第47-48页 |
| ·cDNA 文库的质量 | 第48-50页 |
| 3 讨论 | 第50-53页 |
| ·RNA 的质量对文库构建的影响 | 第50页 |
| ·构建的 cDNA 文库的质量评价 | 第50-51页 |
| ·cDNA 文库载体的选择 | 第51-52页 |
| ·cDNA 文库用途 | 第52-53页 |
| 第三章 小麦抗叶锈近等基因系 TcLr19CDNA 文库的筛选和 EST 序列功能分析 | 第53-86页 |
| 1 材料与方法 | 第53-60页 |
| ·试验材料 | 第53-55页 |
| ·试验方法 | 第55-60页 |
| 2 结果与分析 | 第60-81页 |
| ·小麦基因组 DNA 的提取和检测 | 第60页 |
| ·与小麦抗叶锈近等基因系 TcLr19 连锁的目前已知的 STS 或 SCAR 标记的验证 | 第60-65页 |
| ·利用引物 STSLr19-GbF 通过 PCR 方法筛选 cDNA 文库 | 第65页 |
| ·Blastn 的分析结果 | 第65-72页 |
| ·Blastx 的分析结果 | 第72-79页 |
| ·反向 Northern blot 结果 | 第79-81页 |
| 3 讨论 | 第81-86页 |
| ·对与 Lr19 连锁的 SSR、SCAR 和 STS 标记的验证 | 第81-82页 |
| ·Blastn 与 Blastx 比对结果的差异 | 第82页 |
| ·文库中获得的 EST 片段的功能分析 | 第82-86页 |
| 第四章 全文结论 | 第86-87页 |
| 参考文献 | 第87-99页 |
| 附录 A | 第99-101页 |
| 附录 B | 第101-103页 |
| 在读期间发表的学术论文 | 第103-104页 |
| 作者简历 | 第104-105页 |
| 致谢 | 第105-106页 |
| 附:植物病理学报 | 第106-116页 |