摘要 | 第1-8页 |
Abstract | 第8-10页 |
缩略词表 | 第10-11页 |
1 文献综述 | 第11-23页 |
·棉花的组织培养 | 第11-14页 |
·组织培养技术的发展 | 第11页 |
·棉花的组织培养和植株再生 | 第11-12页 |
·影响体细胞胚发生和植株再生的因素 | 第12-14页 |
·基因型 | 第12页 |
·外植体 | 第12-13页 |
·激素 | 第13页 |
·培养条件 | 第13-14页 |
·植物遗传转化方法 | 第14-19页 |
·基因枪法 | 第14-15页 |
·花粉管通道法 | 第15页 |
·根癌农杆菌介导法 | 第15-17页 |
·农杆菌结构与功能研究 | 第16页 |
·农杆菌转化的机理 | 第16-17页 |
·农杆菌介导法的运用和发展 | 第17页 |
·PEG法 | 第17-18页 |
·显微注射法(micro-injection) | 第18页 |
·电激法 | 第18页 |
·碳化硅纤维介导转化法 | 第18页 |
·其它方法 | 第18-19页 |
·植物突变体库创建与功能基因组研究 | 第19-22页 |
·植物突变体库的创建 | 第19-22页 |
·理化诱变 | 第19-20页 |
·植物转座子标签 | 第20-21页 |
·农杆菌介导的T-DNA插入突变 | 第21页 |
·插入突变克隆基因的不足 | 第21-22页 |
·Gene trap技术在植物功能基因组研究中的应用 | 第22-23页 |
2 方法和材料 | 第23-30页 |
·供试材料 | 第23-25页 |
·植物材料 | 第23页 |
·根癌农杆菌和转化载体 | 第23页 |
·培养条件及其不同培养基配方 | 第23-25页 |
·实验方法 | 第25-29页 |
·转化方法 | 第25页 |
·无菌苗的制备 | 第25页 |
·根癌农杆菌感染和共培养 | 第25页 |
·选择培养 | 第25页 |
·抗性愈伤组织增殖继代和分化 | 第25页 |
·再生苗的嫁接和移栽 | 第25-26页 |
·无菌嫁接 | 第25-26页 |
·大田移栽 | 第26页 |
·转化材料的分子鉴定 | 第26-29页 |
·质粒DNA的提取 | 第26页 |
·棉花基因组DNA的提取 | 第26-27页 |
·PCR反应 | 第27-28页 |
·Southern杂交 | 第28-29页 |
·转化体系中的参数调节 | 第29-30页 |
·乙酰丁香酮对转化效率的影响 | 第29页 |
·不同菌株转化效率的影响 | 第29页 |
·农杆菌浓度对转化效率的影响 | 第29页 |
·不同共培养温度对转化效率的影响 | 第29页 |
·不同共培养时间对转化效率的影响 | 第29页 |
·不同品种转化效率比较 | 第29-30页 |
3 结果与分析 | 第30-37页 |
·转化体系参数优化 | 第30-34页 |
·乙酰丁香酮对转化效率的影响 | 第30页 |
·不同的农杆菌菌株对转化的影响 | 第30-31页 |
·不同浓度的农杆菌对愈伤组织侵染的影响 | 第31-32页 |
·共培养温度对农杆菌侵染力的影响 | 第32-33页 |
·共培养时间对抗性愈伤组织率的影响 | 第33页 |
·不同品种转化效率比较 | 第33-34页 |
·抗性愈伤继代过程中激素调节 | 第34页 |
·农杆菌介导的棉花下胚轴遗传转化体系的建立 | 第34-36页 |
·转基因棉花植株的分子检测 | 第36-37页 |
·PCR检测 | 第36页 |
·转基因再生植株的Southern杂交分析 | 第36-37页 |
·GUS基因在转基因植株再生过程中的表达 | 第37页 |
4 讨论 | 第37-40页 |
·棉花遗传转化中的品种选择和改良 | 第37-38页 |
·农杆菌介导的遗传传化中外植体的选择 | 第38页 |
·农杆菌转化棉花下胚轴的参数优化 | 第38-39页 |
·Enhancer trap和Promoter trap在棉花中的表达频率的比较 | 第39-40页 |
参考文献 | 第40-47页 |
致谢 | 第47页 |