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棉花植株再生和农杆菌介导的Enhancer trap遗传转化

摘要第1-8页
Abstract第8-10页
缩略词表第10-11页
1 文献综述第11-23页
   ·棉花的组织培养第11-14页
     ·组织培养技术的发展第11页
     ·棉花的组织培养和植株再生第11-12页
     ·影响体细胞胚发生和植株再生的因素第12-14页
       ·基因型第12页
       ·外植体第12-13页
       ·激素第13页
       ·培养条件第13-14页
   ·植物遗传转化方法第14-19页
     ·基因枪法第14-15页
     ·花粉管通道法第15页
     ·根癌农杆菌介导法第15-17页
       ·农杆菌结构与功能研究第16页
       ·农杆菌转化的机理第16-17页
       ·农杆菌介导法的运用和发展第17页
     ·PEG法第17-18页
     ·显微注射法(micro-injection)第18页
     ·电激法第18页
     ·碳化硅纤维介导转化法第18页
     ·其它方法第18-19页
   ·植物突变体库创建与功能基因组研究第19-22页
     ·植物突变体库的创建第19-22页
       ·理化诱变第19-20页
       ·植物转座子标签第20-21页
       ·农杆菌介导的T-DNA插入突变第21页
       ·插入突变克隆基因的不足第21-22页
   ·Gene trap技术在植物功能基因组研究中的应用第22-23页
2 方法和材料第23-30页
   ·供试材料第23-25页
     ·植物材料第23页
     ·根癌农杆菌和转化载体第23页
     ·培养条件及其不同培养基配方第23-25页
   ·实验方法第25-29页
     ·转化方法第25页
       ·无菌苗的制备第25页
       ·根癌农杆菌感染和共培养第25页
       ·选择培养第25页
       ·抗性愈伤组织增殖继代和分化第25页
     ·再生苗的嫁接和移栽第25-26页
       ·无菌嫁接第25-26页
       ·大田移栽第26页
     ·转化材料的分子鉴定第26-29页
       ·质粒DNA的提取第26页
       ·棉花基因组DNA的提取第26-27页
       ·PCR反应第27-28页
       ·Southern杂交第28-29页
   ·转化体系中的参数调节第29-30页
     ·乙酰丁香酮对转化效率的影响第29页
     ·不同菌株转化效率的影响第29页
     ·农杆菌浓度对转化效率的影响第29页
     ·不同共培养温度对转化效率的影响第29页
     ·不同共培养时间对转化效率的影响第29页
     ·不同品种转化效率比较第29-30页
3 结果与分析第30-37页
   ·转化体系参数优化第30-34页
     ·乙酰丁香酮对转化效率的影响第30页
     ·不同的农杆菌菌株对转化的影响第30-31页
     ·不同浓度的农杆菌对愈伤组织侵染的影响第31-32页
     ·共培养温度对农杆菌侵染力的影响第32-33页
     ·共培养时间对抗性愈伤组织率的影响第33页
     ·不同品种转化效率比较第33-34页
   ·抗性愈伤继代过程中激素调节第34页
   ·农杆菌介导的棉花下胚轴遗传转化体系的建立第34-36页
   ·转基因棉花植株的分子检测第36-37页
     ·PCR检测第36页
     ·转基因再生植株的Southern杂交分析第36-37页
   ·GUS基因在转基因植株再生过程中的表达第37页
4 讨论第37-40页
   ·棉花遗传转化中的品种选择和改良第37-38页
   ·农杆菌介导的遗传传化中外植体的选择第38页
   ·农杆菌转化棉花下胚轴的参数优化第38-39页
   ·Enhancer trap和Promoter trap在棉花中的表达频率的比较第39-40页
参考文献第40-47页
致谢第47页

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