重组慢病毒介导的NMD途径因子UPF1和SMG1可诱导干扰细胞株的构建
| 中文摘要 | 第1-10页 |
| ABSTRACT | 第10-13页 |
| 第一章 文献综述 | 第13-23页 |
| ·NMD途径的引发机制 | 第14-16页 |
| ·NMD途径在不同进化水平的生物中的引发机制 | 第14-16页 |
| ·NMD途径在哺乳动物细胞中的引发机制 | 第16页 |
| ·NMD途径重要因子 | 第16-19页 |
| ·UPF1的结构及其功能 | 第16-17页 |
| ·SMG1的结构功能及其与UPF1的相互作用 | 第17-18页 |
| ·NMD途径的其它作用因子 | 第18-19页 |
| ·NMD途径的靶标 | 第19-20页 |
| ·NMD途径与人类疾病 | 第20-21页 |
| ·NMD途径在肿瘤细胞中的作用 | 第20-21页 |
| ·NMD途径调控许多的遗传性疾病 | 第21页 |
| ·本课题的研究意义 | 第21-23页 |
| 第二章 可诱导表达RNAi载体的构建 | 第23-35页 |
| ·材料 | 第23-24页 |
| ·菌株 | 第23页 |
| ·主要的酶及生化试剂 | 第23页 |
| ·主要试剂的配制 | 第23-24页 |
| ·主要实验仪器 | 第24页 |
| ·实验方法 | 第24-32页 |
| ·干扰序列的设计和合成 | 第24-25页 |
| ·中间载体的构建 | 第25-28页 |
| ·干扰载体pTIG-U6tetOsh的构建 | 第28-32页 |
| ·结果 | 第32-34页 |
| ·中间载体的构建 | 第32-33页 |
| ·慢病毒载体的构建 | 第33-34页 |
| ·讨论 | 第34-35页 |
| 第三章 构建含目的干扰RNA的慢病毒 | 第35-39页 |
| ·材料 | 第35-36页 |
| ·细胞株 | 第35页 |
| ·主要的生化试剂 | 第35页 |
| ·主要试剂的配制 | 第35页 |
| ·主要实验仪器 | 第35-36页 |
| ·方法 | 第36-37页 |
| ·细胞培养 | 第36页 |
| ·重组慢病毒的构建 | 第36-37页 |
| ·结果 | 第37-38页 |
| ·重组慢病毒制备 | 第37页 |
| ·细胞的感染和筛查 | 第37-38页 |
| ·讨论 | 第38-39页 |
| 总结与展望 | 第39-41页 |
| 参考文献 | 第41-50页 |
| 附录Ⅰ | 第50-51页 |
| 附录Ⅱ | 第51-72页 |
| 攻读学位期间取得的研究成果 | 第72-73页 |
| 致谢 | 第73-74页 |
| 个人简介及联系方式 | 第74-76页 |