中文摘要 | 第1-11页 |
ABSTRACT | 第11-14页 |
第一章 文献综述 | 第14-21页 |
·组蛋白概述 | 第14页 |
·组蛋白的分类及进化 | 第14-15页 |
·组蛋白变体 | 第15-19页 |
·H1变体 | 第15页 |
·H2变体 | 第15-17页 |
·H3变体 | 第17-18页 |
·H4变体 | 第18-19页 |
·纤毛虫中组蛋白H3和H4的特点及本课题的意义 | 第19-21页 |
·纤毛虫中组蛋白H3和H4的特点 | 第19-20页 |
·游仆虫的研究优势及本课题的研究意义 | 第20-21页 |
第二章 组蛋白H3P和H3V的克隆及分析 | 第21-36页 |
·材料 | 第21-23页 |
·细胞株 | 第21页 |
·试剂及工具酶 | 第21-22页 |
·试剂配制 | 第22页 |
·仪器设备 | 第22-23页 |
·方法 | 第23-28页 |
·培养八肋游仆虫细胞 | 第23页 |
·八肋游仆虫核DNA的提取 | 第23页 |
·八肋游仆虫RNA的提取步骤及cDNA的合成过程 | 第23-24页 |
·PCR 扩增和测序 | 第24-26页 |
·序列分析及同源性比对 | 第26页 |
·Real time PCR引物设计 | 第26-27页 |
·基因表达分析 | 第27-28页 |
·结果 | 第28-34页 |
·H3P和H3V基因序列的克隆 | 第28-29页 |
·H3P和H3V基因序列的分析 | 第29页 |
·H3P和H3V基因拟编码的蛋白序列分析 | 第29页 |
·H3蛋白的聚类分析 | 第29-32页 |
·实时定量PCR引物的实用性 | 第32-33页 |
·H3P和H3V在八肋游仆虫中的表达差异 | 第33-34页 |
·讨论 | 第34-36页 |
第三章 组蛋白H3P和H3V的定位分析 | 第36-42页 |
·材料 | 第36-37页 |
·细胞株及质粒 | 第36页 |
·试剂及工具酶 | 第36页 |
·仪器设备 | 第36页 |
·引物设计 | 第36-37页 |
·方法 | 第37-40页 |
·八肋游仆虫H3P和H3V基因开放读框的克隆 | 第37页 |
·pBTub-Tel-EoH3P和pBTub-Tel-EoH3V融合蛋白载体的构建 | 第37-39页 |
·pBTub-Tel-EoH3P和pBTub-Tel-EoH3V重组质粒的转染 | 第39-40页 |
·结果 | 第40-41页 |
·pBTub-Tel-EoH3P和pBTub-Tel-EoH3V的鉴定 | 第40页 |
·EGFP-EoH3P和EGFP-EoH3V的定位 | 第40-41页 |
·讨论 | 第41-42页 |
第四章 组蛋白H4A和H4B的克隆及分析 | 第42-50页 |
·材料 | 第42页 |
·方法 | 第42-43页 |
·PCR扩增和测序 | 第42-43页 |
·序列分析及同源性比对 | 第43页 |
·Real time PCR引物设计 | 第43页 |
·基因表达分析 | 第43页 |
·结果 | 第43-48页 |
·H4A和H4B基因序列的克隆 | 第43-44页 |
·H4A和H4B基因拟编码的蛋白序列分析 | 第44-45页 |
·H4蛋白的聚类分析 | 第45-47页 |
·实时定量PCR引物的实用性 | 第47页 |
·H4A和H4B在八肋游仆虫中的表达差异 | 第47-48页 |
·讨论 | 第48-50页 |
第五章 组蛋白H4A和H4B的表达及纯化 | 第50-57页 |
·材料 | 第50-52页 |
·细胞株及质粒 | 第50页 |
·试剂及工具酶 | 第50页 |
·试剂配制 | 第50-51页 |
·仪器设备 | 第51页 |
·引物设计 | 第51-52页 |
·方法 | 第52-53页 |
·八肋游仆虫H4A和H4B基因开放读框的克隆 | 第52页 |
·融合表达载体pET-28a-H4A和pET-28a-H4B的构建 | 第52页 |
·融合蛋白His6-H4A和His6-H4B的表达 | 第52页 |
·融合蛋白His6-H4A和His6-H4B的纯化 | 第52-53页 |
·结果 | 第53-55页 |
·pET-28a-H4A和pET-28a-H4B的构建 | 第53-54页 |
·融合蛋白His6-H4A和His6-H4B的表达 | 第54页 |
·融合蛋白His6-H4B的纯化 | 第54-55页 |
·讨论 | 第55-57页 |
参考文献 | 第57-63页 |
总结与展望 | 第63-65页 |
总结 | 第63-64页 |
展望 | 第64-65页 |
攻读学位期间取得的研究成果 | 第65-66页 |
致谢 | 第66-67页 |
个人简况及联系方式 | 第67-69页 |