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八肋游仆虫组蛋白H3和H4基因的克隆与功能分析

中文摘要第1-11页
ABSTRACT第11-14页
第一章 文献综述第14-21页
   ·组蛋白概述第14页
   ·组蛋白的分类及进化第14-15页
   ·组蛋白变体第15-19页
     ·H1变体第15页
     ·H2变体第15-17页
     ·H3变体第17-18页
     ·H4变体第18-19页
   ·纤毛虫中组蛋白H3和H4的特点及本课题的意义第19-21页
     ·纤毛虫中组蛋白H3和H4的特点第19-20页
     ·游仆虫的研究优势及本课题的研究意义第20-21页
第二章 组蛋白H3P和H3V的克隆及分析第21-36页
   ·材料第21-23页
     ·细胞株第21页
     ·试剂及工具酶第21-22页
     ·试剂配制第22页
     ·仪器设备第22-23页
   ·方法第23-28页
     ·培养八肋游仆虫细胞第23页
     ·八肋游仆虫核DNA的提取第23页
     ·八肋游仆虫RNA的提取步骤及cDNA的合成过程第23-24页
     ·PCR 扩增和测序第24-26页
     ·序列分析及同源性比对第26页
     ·Real time PCR引物设计第26-27页
     ·基因表达分析第27-28页
   ·结果第28-34页
     ·H3P和H3V基因序列的克隆第28-29页
     ·H3P和H3V基因序列的分析第29页
     ·H3P和H3V基因拟编码的蛋白序列分析第29页
     ·H3蛋白的聚类分析第29-32页
     ·实时定量PCR引物的实用性第32-33页
     ·H3P和H3V在八肋游仆虫中的表达差异第33-34页
   ·讨论第34-36页
第三章 组蛋白H3P和H3V的定位分析第36-42页
   ·材料第36-37页
     ·细胞株及质粒第36页
     ·试剂及工具酶第36页
     ·仪器设备第36页
     ·引物设计第36-37页
   ·方法第37-40页
     ·八肋游仆虫H3P和H3V基因开放读框的克隆第37页
     ·pBTub-Tel-EoH3P和pBTub-Tel-EoH3V融合蛋白载体的构建第37-39页
     ·pBTub-Tel-EoH3P和pBTub-Tel-EoH3V重组质粒的转染第39-40页
   ·结果第40-41页
     ·pBTub-Tel-EoH3P和pBTub-Tel-EoH3V的鉴定第40页
     ·EGFP-EoH3P和EGFP-EoH3V的定位第40-41页
   ·讨论第41-42页
第四章 组蛋白H4A和H4B的克隆及分析第42-50页
   ·材料第42页
   ·方法第42-43页
     ·PCR扩增和测序第42-43页
     ·序列分析及同源性比对第43页
     ·Real time PCR引物设计第43页
     ·基因表达分析第43页
   ·结果第43-48页
     ·H4A和H4B基因序列的克隆第43-44页
     ·H4A和H4B基因拟编码的蛋白序列分析第44-45页
     ·H4蛋白的聚类分析第45-47页
     ·实时定量PCR引物的实用性第47页
     ·H4A和H4B在八肋游仆虫中的表达差异第47-48页
   ·讨论第48-50页
第五章 组蛋白H4A和H4B的表达及纯化第50-57页
   ·材料第50-52页
     ·细胞株及质粒第50页
     ·试剂及工具酶第50页
     ·试剂配制第50-51页
     ·仪器设备第51页
     ·引物设计第51-52页
   ·方法第52-53页
     ·八肋游仆虫H4A和H4B基因开放读框的克隆第52页
     ·融合表达载体pET-28a-H4A和pET-28a-H4B的构建第52页
     ·融合蛋白His6-H4A和His6-H4B的表达第52页
     ·融合蛋白His6-H4A和His6-H4B的纯化第52-53页
   ·结果第53-55页
     ·pET-28a-H4A和pET-28a-H4B的构建第53-54页
     ·融合蛋白His6-H4A和His6-H4B的表达第54页
     ·融合蛋白His6-H4B的纯化第54-55页
   ·讨论第55-57页
参考文献第57-63页
总结与展望第63-65页
 总结第63-64页
 展望第64-65页
攻读学位期间取得的研究成果第65-66页
致谢第66-67页
个人简况及联系方式第67-69页

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