摘要 | 第1-4页 |
Abstract | 第4-9页 |
引言 | 第9-27页 |
第一章 猪瘟研究进展 | 第9-16页 |
·概述 | 第9页 |
·猪瘟的地理分布与危害 | 第9-10页 |
·当前猪瘟流行新动态 | 第10页 |
·猪瘟诊断的研究进展 | 第10-13页 |
·动物实验 | 第11页 |
·病毒分离 | 第11页 |
·免疫学诊断研究进展 | 第11-13页 |
·分子生物学诊断技术 | 第13页 |
·猪瘟防制的研究进展 | 第13-14页 |
·猪瘟疫苗的研究进展 | 第14-16页 |
·传统疫苗 | 第14页 |
·新型疫苗 | 第14-15页 |
·新型疫苗的前景及存在的问题 | 第15-16页 |
第二章 猪瘟病毒及其研究进展 | 第16-27页 |
·猪瘟病毒的生物学特性及其研究进展 | 第16-19页 |
·病毒粒子结构 | 第16页 |
·CSFV的理化特性 | 第16-17页 |
·CSFV的培养特性 | 第17-18页 |
·CSFV的抗原性、毒力和分型 | 第18页 |
·猪瘟病毒的进化和遗传分型 | 第18-19页 |
·病毒的致病机制研究进展 | 第19-21页 |
·CSFV感染对外周血细胞亚群的影响 | 第20页 |
·CSFV诱导的白细胞减少的机制 | 第20页 |
·CSFV感染的靶细胞 | 第20页 |
·单核细胞在CSFV感染中的作用 | 第20-21页 |
·病毒的分子生物学研究进展 | 第21-27页 |
·CSFV基因组结构 | 第21-22页 |
·CSFV的编码蛋白及其功能 | 第22-25页 |
·EO基因研究进展 | 第25页 |
·抗原表位研究进展 | 第25-27页 |
实验内容 | 第27-56页 |
第三章 猪瘟地方分离株BJCY1/96的全长ORF测序 | 第27-38页 |
·材料与方法 | 第27-31页 |
·猪瘟病料 | 第27-28页 |
·引物的设计与合成 | 第28-29页 |
·主要试剂 | 第29页 |
·主要仪器 | 第29页 |
·RNA提取 | 第29-30页 |
·RT-PCR | 第30页 |
·琼脂糖凝胶电泳 | 第30-31页 |
·纯化回收DNA片段 | 第31页 |
·核酸序列分析和同源性比较 | 第31页 |
·结果 | 第31-37页 |
·RT-PCR | 第31-32页 |
·目的基因的核苷酸序列及推导的氨基酸序列的同源性比较 | 第32页 |
·将本实验得到的CSFV BJCY/96株ORF和HCLV株进行比较 | 第32-37页 |
·讨论 | 第37页 |
·小结 | 第37-38页 |
第四章 猪瘟病毒EO基因在大肠杆菌中的分段表达 | 第38-56页 |
·材料和方法 | 第38-46页 |
·毒株 | 第38页 |
·菌株和质粒 | 第38页 |
·酶和试剂 | 第38页 |
·仪器与设备 | 第38页 |
·引物的设计与合成 | 第38-39页 |
·病毒RNA的提取 | 第39页 |
·EO基因目的片段的获取 | 第39页 |
·重组T载体的构建 | 第39-42页 |
·重组表达载体的构建 | 第42-43页 |
·重组质粒的诱导表达 | 第43页 |
·表达产物的检测 | 第43-46页 |
·结果 | 第46-52页 |
·RT-PCR | 第46-47页 |
·重组pGEM-T Easy Vector的鉴定 | 第47-48页 |
·重组表达载体的鉴定 | 第48-49页 |
·EO基因在大肠杆菌中分段诱导表达 | 第49页 |
·表达产物的检测 | 第49-52页 |
·讨论 | 第52-55页 |
·EO基因分段的克隆与表达 | 第52页 |
·谷胱苷肽-S-转移酶(GST)融合表达载体的特点 | 第52-53页 |
·包涵体的形成及其特点 | 第53页 |
·Western-blotting分析 | 第53-54页 |
·SM株和HCLV株的抗原表位优势图 | 第54-55页 |
·小结 | 第55-56页 |
全文总结 | 第56-57页 |
参考文献 | 第57-69页 |
附录 | 第69-81页 |
致谢 | 第81页 |