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合成新型荧光探针用于活细胞内双(多)巯基蛋白的检测及成像分析

摘要第1-9页
Abstract第9-12页
第一章 绪论第12-50页
 1 还原性物质的生理病理意义及检测技术第12-17页
   ·还原性物质的生理病理意义第12-13页
   ·硫醇类物质的检测技术第13-17页
 2 蛋白质的生理病理意义及检测技术第17-38页
   ·蛋白质概述第17-20页
     ·蛋白质的生理功能第17-19页
     ·蛋白质的病理意义第19页
     ·巯基蛋白的病理意义第19-20页
   ·蛋白质的检测方法第20页
   ·蛋白质的荧光标记策略第20-34页
     ·蛋白质标签法第21-23页
     ·酶融合标签法第23-26页
     ·酶底物融合标签法第26-29页
     ·短肽标签法第29-33页
     ·小分子直接标记法第33-34页
   ·巯基蛋白荧光检测方法第34-38页
     ·单巯基蛋白的检测方法第34-35页
     ·双巯基蛋白的检测方法第35-38页
 3 论文选题目的及意义第38-40页
 参考文献第40-50页
第二章 基于马来酰亚胺构建的一种新型荧光探针用于巯基类物质的检测第50-73页
 1 前言第50-52页
 2 实验部分第52-57页
   ·试剂与仪器第52-53页
   ·荧光探针的合成第53-55页
     ·探针 O-Dm-Ac 的合成第53-54页
     ·探针 M-Dm-Ac 的合成第54-55页
   ·实验方法第55-57页
     ·荧光探针 O-Dm-Ac 与 M-Dm-Ac 的配制第55页
     ·待测物质的配制第55-56页
     ·各种活性分子的配制第56页
     ·谷胱甘肽 GSH 的测定第56页
     ·探针 O-Dm-Ac 与一系列双巯基小肽序列响应情况比较第56页
     ·动力学第56-57页
     ·干扰物质的测定第57页
 3 结果与讨论第57-68页
   ·反应机理第57-58页
   ·探针与 GSH 体系第58-61页
     ·探针对 GSH 的荧光响应第58-59页
     ·探针 O-Dm-Ac 与 GSH 响应的线性关系第59-60页
     ·探针与 GSH 动力学实验第60-61页
   ·探针 O-Dm-Ac 与双巯基小肽序列体系第61-66页
     ·探针 O-Dm-Ac 与一系列双巯基小肽序列的响应第61-63页
     ·探针 O-Dm-Ac 与小肽序列 W-7 实验参数的优化第63-65页
     ·探针 O-Dm-Ac 与 W-7 肽响应的线性关系第65-66页
     ·探针 O-Dm-Ac 与 W-7 肽动力学实验第66页
   ·探针 O-Dm-Ac 选择性的评价第66-68页
 4 结论第68-69页
 参考文献第69-73页
第三章 基于马来酰亚胺构建的一种新型荧光探针用于双(多)巯基蛋白的检测第73-91页
 1 引言第73-75页
 2 实验部分第75-80页
   ·试剂与仪器第75页
   ·实验方法第75-79页
     ·荧光探针 O-Dm-Ac 与 M-Dm-Ac 的配制第75页
     ·待测物质的配制第75-76页
     ·巯基蛋白 BSA 及 rBSA 的测定第76-77页
     ·探针 O-Dm-Ac 与 rBSA 响应的线性关系第77页
     ·探针 O-Dm-Ac 与 BSA 及 rBSA 动力学实验第77页
     ·探针与 BSA 及 rBSA 的凝胶电泳实验第77-79页
   ·细胞培养第79-80页
     ·HepG2 肝癌细胞的培养第79页
     ·MTT 实验第79页
     ·激光共聚焦成像第79-80页
 3 结果与讨论第80-87页
   ·反应机理第80页
   ·探针 O-Dm-Ac 和 M-Dm-Ac 与巯基蛋白 BSA 及 rBSA 的响应第80-84页
     ·探针 O-Dm-Ac 与 BSA 和 rBSA 响应情况的比较第80-82页
     ·探针 M-Dm-Ac 与 BSA 和 rBSA 响应情况的比较第82页
     ·探针 O-Dm-Ac 与 rBSA 响应的线性关系第82-83页
     ·探针 O-Dm-Ac 与 BSA 及 rBSA 动力学实验第83-84页
   ·探针 O-Dm-Ac 与 M-Dm-Ac 和 BSA/rBSA 的凝胶电泳实验第84-85页
   ·探针 O-Dm-Ac 细胞毒性评价第85-86页
   ·细胞内双(多)巯基蛋白的激光共聚焦成像第86-87页
 4 总结第87-88页
 参考文献第88-91页
附 合成产物谱图第91-93页
攻读硕士学位期间参与的课题和发表的论文第93-94页
致谢第94页

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