| 摘要 | 第1-5页 |
| Abstract | 第5-10页 |
| 1、前言 | 第10-26页 |
| ·农药残留检测的重要性及存在问题 | 第10-11页 |
| ·开展农药残留监测的重要性 | 第10-11页 |
| ·农产品农药残留监测工作存在的问题 | 第11页 |
| ·目前主要的农药残留检测方法和手段 | 第11-13页 |
| ·气相色谱法(GC) | 第12页 |
| ·高效液相色谱法(HPLC) | 第12页 |
| ·薄层色谱法(TLC) | 第12-13页 |
| ·超临界流体色谱(SFC) | 第13页 |
| ·毛细管电泳(CE) | 第13页 |
| ·生物监测技术(Biomonitortechnique) | 第13页 |
| ·酶抑制法检测原理和进展 | 第13-16页 |
| ·检测的原理及方法 | 第14页 |
| ·检测方法 | 第14-15页 |
| ·乙酰胆碱酯酶的分离纯化 | 第15-16页 |
| ·A CHE 的研究进展 | 第16-18页 |
| ·乙酰胆碱酯酶的构型 | 第16页 |
| ·乙酰胆碱酯酶的三维结构及生理功能 | 第16-17页 |
| ·AChE 的基因结构 | 第17-18页 |
| ·大肠杆菌、酵母表达系统研究概述 | 第18-21页 |
| ·大肠杆菌表达系统 | 第18页 |
| ·巴斯德毕酵母表达系统 | 第18-21页 |
| ·蛋白质三维结构模建概述 | 第21-26页 |
| ·同源模建(homologous modelling) | 第22-23页 |
| ·折叠识别(folds recognition) | 第23-24页 |
| ·从头预测(ab initio prediction) | 第24-26页 |
| 2、材料与方法 | 第26-52页 |
| ·材料 | 第26页 |
| ·质粒与菌种 | 第26页 |
| ·试剂 | 第26页 |
| ·方法 | 第26-52页 |
| ·基因克隆 | 第26-32页 |
| ·序列分析 | 第32-41页 |
| ·表达载体构建 | 第41-48页 |
| ·大肠杆菌工程菌株的构建 | 第48页 |
| ·外源蛋白质表达及检测 | 第48-50页 |
| ·蛋白质纯化及活性检测 | 第50-52页 |
| 3、结果与分析 | 第52-57页 |
| ·基因克隆 | 第52-54页 |
| ·序列分析 | 第54-55页 |
| ·基因表达 | 第55-57页 |
| 4、讨论 | 第57-69页 |
| ·ACE 基因的克隆 | 第57-59页 |
| ·RNA 的提取 | 第57-58页 |
| ·引物的设计 | 第58-59页 |
| ·反转录 | 第59页 |
| ·ACE 基因的表达 | 第59-64页 |
| ·表达系统的选择 | 第59-60页 |
| ·表达载体的选择 | 第60-62页 |
| ·表达宿主菌 | 第62-63页 |
| ·表达注意事项 | 第63-64页 |
| ·活性检测 | 第64页 |
| ·序列与功能分析 | 第64-69页 |
| 5、结论 | 第69-71页 |
| 参考文献 | 第71-76页 |
| 附录 | 第76-77页 |
| 常用培养基配方 | 第76页 |
| 常用试剂配方 | 第76页 |
| 主要仪器设备 | 第76-77页 |
| 致谢 | 第77页 |
