| 提要 | 第1-10页 |
| 第一章 文献回顾 | 第10-23页 |
| 一、MUC1 生物学特点 | 第10-14页 |
| 1. Mucin 家族 | 第10-11页 |
| 2. MUC1 分布 | 第11-12页 |
| 3. MUC1 基因及MUC1 蛋白 | 第12-13页 |
| 4. MUC1 同种型 | 第13页 |
| 5. 鼠Muc1 基因结构及蛋白 | 第13-14页 |
| 二、MUC1 生物学功能 | 第14-18页 |
| 1. MUC1 在肿瘤发生发展中的作用 | 第14-15页 |
| 2. MUC1 在信号传导中的作用 | 第15-16页 |
| 3. MUC1 在机体免疫调节中的作用 | 第16-18页 |
| 三、以MUC1 为靶点的肿瘤疫苗研究进展 | 第18-23页 |
| 1. MUC1 与抗原提呈细胞的联合应用 | 第18-20页 |
| 2. 糖链疫苗 | 第20页 |
| 3. 多肽或蛋白疫苗 | 第20-21页 |
| 4. DNA 疫苗 | 第21-23页 |
| 第二章 材料与方法 | 第23-39页 |
| 一、实验材料 | 第23-25页 |
| 二、实验方法 | 第25-39页 |
| 1. Lewis肺癌细胞培养 | 第25页 |
| 2. 小鼠Lewis肺癌细胞总RNA提取 | 第25-26页 |
| 3. PCR | 第26-27页 |
| 4. PCR产物的回收 | 第27-28页 |
| 5. 克隆载体的构建及目的基因序列鉴定 | 第28-30页 |
| 6. pMAL-Muc1 表达载体的构建 | 第30-31页 |
| 7. 重组质粒pMAL-Muc1 转化大肠杆菌DH5α | 第31-32页 |
| 8. 重组克隆的筛选与鉴定 | 第32页 |
| 9. 重组鼠Muc1 融合蛋白的诱导表达 | 第32-33页 |
| 10. SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳（SDS-PAGE） | 第33-34页 |
| 11. Western blot | 第34-35页 |
| 12. Amylose Resin 亲和层析 | 第35页 |
| 13. 非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳纯化蛋白 | 第35-36页 |
| 14. 动物免疫 | 第36-37页 |
| 15. ELISA | 第37页 |
| 16. 淋巴细胞转化试验 | 第37-39页 |
| 第三章 实验结果 | 第39-51页 |
| 一、PCR法获得小鼠Muc1 基因片段 | 第39-40页 |
| 二、小鼠Muc1 TA克隆载体的成功构建 | 第40-42页 |
| 三、小鼠Muc1 表达载体的成功构建 | 第42-44页 |
| 四、重组Muc1 融合蛋白在大肠杆菌中的诱导表达 | 第44-46页 |
| 五、重组Muc1 融合蛋白的鉴定 | 第46-47页 |
| 六、重组Muc1 融合蛋白的成功纯化 | 第47-48页 |
| 七、非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳纯化蛋白 | 第48页 |
| 八、重组Muc1 融合蛋白诱导小鼠产生抗Muc1 特异性抗体 | 第48-49页 |
| 九、抗小鼠Muc1 抗体与人MUC1 发生交叉反应 | 第49-50页 |
| 十、重组小鼠Muc1 融合蛋白诱导小鼠T细胞转化 | 第50-51页 |
| 第四章 讨论 | 第51-58页 |
| 一、肿瘤免疫治疗靶点小鼠Muc1 的选择 | 第51-52页 |
| 二、融合蛋白的选择 | 第52-54页 |
| 三、小鼠Muc1 融合蛋白的纯化 | 第54-55页 |
| 四、佐剂的选择 | 第55-56页 |
| 五、重组融合蛋白免疫活性的初步分析 | 第56-58页 |
| 结论 | 第58-59页 |
| 参考文献 | 第59-68页 |
| 中文摘要 | 第68-71页 |
| Abstract | 第71-75页 |
| 致谢 | 第75页 |
