中文摘要 | 第1-10页 |
英文摘要 | 第10-15页 |
缩略词表 | 第15-17页 |
第一章 前言 | 第17-24页 |
1.肝癌研究现状及其基因治疗 | 第17-18页 |
2.溶瘤腺病毒的发展概况 | 第18-20页 |
3.P53 基因的研究现状 | 第20-21页 |
4.细胞穿膜肽的研究进展及其在肿瘤治疗研究中的作用 | 第21-24页 |
第二章 溶瘤腺病毒SG7605-11R-P53 在治疗肝癌的体外试验研究 | 第24-43页 |
1 实验器材 | 第24-29页 |
·实验所需材料 | 第24-25页 |
·实验所需仪器 | 第25页 |
·实验所需主要试剂 | 第25-26页 |
·主要试剂配置方法 | 第26-29页 |
2 实验方法 | 第29-32页 |
·细胞培养 | 第29页 |
·利用Western Blot 检测蛋白表达情况 | 第29-31页 |
·病毒增殖实验 | 第31页 |
·细胞杀伤实验 | 第31-32页 |
3 实验结果 | 第32-40页 |
·Western Blot 检测蛋白表达结果 | 第32-33页 |
·增殖实验 | 第33-37页 |
·杀伤实验 | 第37-40页 |
4 讨论 | 第40-43页 |
第三章 SG7605-11R- EGFP 的载体构建及体外感染实验研究 | 第43-65页 |
1 实验器材 | 第43-45页 |
·实验材料 | 第43页 |
·所需的主要仪器 | 第43-44页 |
·试剂 | 第44-45页 |
·主要试剂的配制 | 第45页 |
·所需引物 | 第45页 |
2 方法 | 第45-57页 |
·PENTER17-11R-EGFP 的构建 | 第45-49页 |
·PPE3-11R-EGFP 载体的构建 | 第49-52页 |
·质粒的大量制备 | 第52-53页 |
·病毒重组 | 第53-54页 |
·病毒SG7605-11R-EGFP 和SG7605-EGFP 的扩增 | 第54页 |
·氯化铯密度梯度离心法纯化病毒SG7605-11R-EGFP 和SG7605-EGFP | 第54-55页 |
·50%组织培养感染剂量法测定病毒 SG7605-11R-EGFP 和 SG7605-EGFP 的 滴度 | 第55页 |
·BCA(Bicinchoninic acid,二辛可宁酸)法测多肽的浓度 | 第55-56页 |
·感染实验 | 第56页 |
·多肽的内化实验 | 第56页 |
·比较SG7605-11R-P53 SG7605-P53+11R 和SG7605-P53 的感染效率 | 第56-57页 |
3 结果 | 第57-63页 |
·以AT236+AT237 的PCR 产物为模板,以GT358 + AT237 为引物获得11R+EGFP的条带 | 第57页 |
·PENTER17-11R-EGFP 的鉴定图谱 | 第57-58页 |
·PPE3-11R-EGFP 的鉴定图谱 | 第58页 |
·10 组不同酶的对PPE3-11R-EGFP 的鉴定图谱 | 第58页 |
·病毒滴度测定 | 第58-59页 |
·BCA(Bicinchoninic acid,二辛可宁酸)法测多肽浓度 | 第59页 |
·多肽的内化实验 | 第59-60页 |
·不同MOI 值条件下比较SG7605-11R-P53 和SG7605-P53 的感染效率 | 第60-61页 |
·比较SG7605-11R- EGFP、 SG7605- EGFP +11R 和SG7605- EGFP 的感染效率 | 第61-62页 |
·比较不同时间点SG7605-11R-P53 在肝癌细胞与正常的细胞的感染效果 | 第62-63页 |
4 讨论 | 第63-65页 |
第四章 溶瘤腺病毒SG7605-11R-P53 在治疗肝癌的体内试验研究 | 第65-70页 |
材料和方法 | 第65-70页 |
1 材料 | 第65页 |
·仪器设备 | 第65页 |
·实验动物 | 第65页 |
2 方法 | 第65-66页 |
·裸鼠肝癌移植瘤模型的建立 | 第65-66页 |
·分组及治疗方法 | 第66页 |
·统计处理 | 第66页 |
3 实验结果 | 第66-68页 |
·裸鼠肝癌Huh7 移植瘤模型的建立 | 第66-67页 |
·瘤内注射PBS、SG7605-11R-P53、SG7605-P53 治疗Huh7 移植瘤疗效观察 | 第67-68页 |
4、讨论 | 第68-70页 |
全文小结 | 第70-72页 |
体外实验 | 第70-71页 |
体内试验 | 第71-72页 |
参考文献 | 第72-80页 |
致谢 | 第80页 |