摘要 | 第1-5页 |
ABSTRACT | 第5-9页 |
第一章 文献综述 | 第9-24页 |
·果实成熟软化研究进展 | 第9-14页 |
·果实成熟软化过程中细胞壁及细胞主要成分的变化 | 第9页 |
·果实软化过程的相关酶 | 第9-13页 |
·多聚半乳糖醛酸酶 | 第10页 |
·果胶酯酶(PE)和果胶裂解酶 | 第10页 |
·木葡聚糖内糖基转移酶 | 第10-11页 |
·纤维素酶 | 第11页 |
·糖苷酶 | 第11页 |
·伸展蛋白 | 第11-12页 |
·植物脂氧合酶 | 第12页 |
·淀粉酶和蔗糖酶 | 第12-13页 |
·植物激素与果实成熟软化过程的关系 | 第13页 |
·乙烯 | 第13页 |
·其它几种激素 | 第13页 |
·结束语 | 第13-14页 |
·多聚半乳糖醛酸酶基因研究进展 | 第14-15页 |
·番茄耐贮育种研究 | 第15-18页 |
·迟熟突变材料及应用 | 第15-17页 |
·转基因技术的应用 | 第17-18页 |
·常用的几种植物基因克隆技术 | 第18-19页 |
·图位克隆技术 | 第18页 |
·转座子或T-DNA 标签法 | 第18页 |
·同源序列法 | 第18-19页 |
·表达序列标签法 | 第19页 |
·差异表达基因的分离方法 | 第19页 |
·RNA 介导的基因沉默及其应用 | 第19-23页 |
·导致基因沉默的几种途径 | 第20-22页 |
·反义介导的基因沉默 | 第20页 |
·RNA 干扰(RNAi)介导的基因沉默 | 第20-21页 |
·共阻遏介导的基因沉默 | 第21-22页 |
·病毒介导的基因沉默(VIGS) | 第22页 |
·基因沉默的应用价值 | 第22-23页 |
·研究目的和意义 | 第23-24页 |
第二章 材料与方法 | 第24-27页 |
·试验材料 | 第24页 |
·植物材料 | 第24页 |
·酶与试剂 | 第24页 |
·质粒和菌株 | 第24页 |
·引物设计与合成 | 第24页 |
·试验方法 | 第24-27页 |
·RNA 的提取 | 第24-25页 |
·反转录 PCR | 第25页 |
·PCR 产物回收 | 第25页 |
·PG 基因的 TA 克隆 | 第25页 |
·PG 基因植物表达载体的构建策略 | 第25-26页 |
·表达载体转化根癌农杆菌及其鉴定 | 第26-27页 |
第三章 结果与分析 | 第27-33页 |
·RNA 的提取及反转录 PCR | 第27页 |
·PG 基因克隆及序列分析 | 第27页 |
·PG 基因反义表达载体pBinAR-aPG 的构建及鉴定 | 第27-30页 |
·PG 基因正义表达载体pBinAR-PG 的构建及鉴定 | 第30-32页 |
·表达载体导入转化根癌农杆菌 EHA105 及其鉴定 | 第32-33页 |
第四章 讨论与结论 | 第33-34页 |
·讨论 | 第33页 |
·PG 基因片段克隆 | 第33页 |
·PG 基因表达载体的构建 | 第33页 |
·结论 | 第33-34页 |
参考文献 | 第34-42页 |
附录 | 第42-49页 |
附录Ⅰ:重组质粒测序结果 | 第42页 |
附录Ⅱ: GenBank 比对结果 | 第42-44页 |
附录Ⅲ:反义表达载体pBinAR-aPG 构建过程图 | 第44-45页 |
附录Ⅳ:正义表达载体pBinAR-PG 构建过程图 | 第45-46页 |
附录Ⅴ:常用试剂的配制方法 | 第46-48页 |
附录Ⅵ:大肠杆菌感受态的制备与转化 | 第48-49页 |
致谢 | 第49-50页 |
作者简介 | 第50页 |