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加工番茄PG基因片段克隆及植物表达载体的构建

摘要第1-5页
ABSTRACT第5-9页
第一章 文献综述第9-24页
   ·果实成熟软化研究进展第9-14页
     ·果实成熟软化过程中细胞壁及细胞主要成分的变化第9页
     ·果实软化过程的相关酶第9-13页
       ·多聚半乳糖醛酸酶第10页
       ·果胶酯酶(PE)和果胶裂解酶第10页
       ·木葡聚糖内糖基转移酶第10-11页
       ·纤维素酶第11页
       ·糖苷酶第11页
       ·伸展蛋白第11-12页
       ·植物脂氧合酶第12页
       ·淀粉酶和蔗糖酶第12-13页
     ·植物激素与果实成熟软化过程的关系第13页
       ·乙烯第13页
       ·其它几种激素第13页
     ·结束语第13-14页
   ·多聚半乳糖醛酸酶基因研究进展第14-15页
   ·番茄耐贮育种研究第15-18页
     ·迟熟突变材料及应用第15-17页
     ·转基因技术的应用第17-18页
   ·常用的几种植物基因克隆技术第18-19页
     ·图位克隆技术第18页
     ·转座子或T-DNA 标签法第18页
     ·同源序列法第18-19页
     ·表达序列标签法第19页
     ·差异表达基因的分离方法第19页
   ·RNA 介导的基因沉默及其应用第19-23页
     ·导致基因沉默的几种途径第20-22页
       ·反义介导的基因沉默第20页
       ·RNA 干扰(RNAi)介导的基因沉默第20-21页
       ·共阻遏介导的基因沉默第21-22页
       ·病毒介导的基因沉默(VIGS)第22页
     ·基因沉默的应用价值第22-23页
   ·研究目的和意义第23-24页
第二章 材料与方法第24-27页
   ·试验材料第24页
     ·植物材料第24页
     ·酶与试剂第24页
     ·质粒和菌株第24页
     ·引物设计与合成第24页
   ·试验方法第24-27页
     ·RNA 的提取第24-25页
     ·反转录 PCR第25页
     ·PCR 产物回收第25页
     ·PG 基因的 TA 克隆第25页
     ·PG 基因植物表达载体的构建策略第25-26页
     ·表达载体转化根癌农杆菌及其鉴定第26-27页
第三章 结果与分析第27-33页
   ·RNA 的提取及反转录 PCR第27页
   ·PG 基因克隆及序列分析第27页
   ·PG 基因反义表达载体pBinAR-aPG 的构建及鉴定第27-30页
   ·PG 基因正义表达载体pBinAR-PG 的构建及鉴定第30-32页
   ·表达载体导入转化根癌农杆菌 EHA105 及其鉴定第32-33页
第四章 讨论与结论第33-34页
   ·讨论第33页
     ·PG 基因片段克隆第33页
     ·PG 基因表达载体的构建第33页
   ·结论第33-34页
参考文献第34-42页
附录第42-49页
 附录Ⅰ:重组质粒测序结果第42页
 附录Ⅱ: GenBank 比对结果第42-44页
 附录Ⅲ:反义表达载体pBinAR-aPG 构建过程图第44-45页
 附录Ⅳ:正义表达载体pBinAR-PG 构建过程图第45-46页
 附录Ⅴ:常用试剂的配制方法第46-48页
 附录Ⅵ:大肠杆菌感受态的制备与转化第48-49页
致谢第49-50页
作者简介第50页

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