| 中文摘要 | 第1-9页 |
| Abstract | 第9-11页 |
| 本文的创新点 | 第11-12页 |
| 第一部分 研究目的和设计思路 | 第12-14页 |
| ·研究目的 | 第12页 |
| ·设计思路 | 第12-13页 |
| ·技术路线框架 | 第13-14页 |
| 第二部分 文献综述 | 第14-40页 |
| ·MGC13096、PDCD2的基本资料及基因分类(Gene ontology) | 第14-24页 |
| ·MGC13096的基本资料 | 第14-16页 |
| ·Gene ontology对 MGC13096的功能和细胞内定位电子预测 | 第16-17页 |
| ·PDCD2的基本资料 | 第17-24页 |
| ·Gene ontology介绍 | 第24-25页 |
| ·如何研究基因功能 | 第25-38页 |
| ·获得基因 | 第25-26页 |
| ·组织表达谱分析 | 第26页 |
| ·基因调节 | 第26页 |
| ·蛋白质细胞定位 | 第26页 |
| ·蛋白质相互作用 | 第26-28页 |
| ·基因功能研究策略 | 第28-38页 |
| 参考文献 | 第38-40页 |
| 第三部分 实验材料和方法 | 第40-51页 |
| ·生物信息学分析 | 第40-41页 |
| ·在细胞中的定位分析 | 第40页 |
| ·组织表达谱和发育表达谱 | 第40页 |
| ·保守结构域分析 | 第40页 |
| ·转录因子结合位点分析 | 第40页 |
| ·基因表达谱分析 | 第40-41页 |
| ·MGC13096、PDCD2转录本1、2编码区(CDS)的克隆 | 第41-42页 |
| ·RT-PCR MGC13096及真核表达载体的构建 | 第41-42页 |
| ·RT-PCR PDCD2两个转录本 | 第42页 |
| ·与NCBI Genbank数据库里的序列比对 | 第42页 |
| ·细胞 DNA提取 | 第42-43页 |
| ·MGC13096、PDCD2在凋亡细胞中的表达 | 第43-44页 |
| ·细胞培养 | 第43页 |
| ·荧光定量 PCR法鉴定 MGC13096、PDCD2的表达 | 第43-44页 |
| ·流式细胞术分析凋亡组细胞和正常细胞的亚 G0期百分比 | 第44页 |
| ·细胞转染 | 第44页 |
| ·HEK293T、pcDNA3.1/293T、MGC13096-pcDNA3.1/293T细胞的生长周期分析，生长曲线，凋亡分析 | 第44-45页 |
| ·细胞生长周期分析 | 第44-45页 |
| ·细胞生长曲线 | 第45页 |
| ·凋亡分析 | 第45页 |
| ·荧光素酶法寻找 MGC13096影响的细胞通路 | 第45-46页 |
| ·细胞培养 | 第45页 |
| ·制备 DNA-Lipfectamine TM2000复合物 | 第45-46页 |
| ·转染 | 第46页 |
| ·数据处理 | 第46页 |
| ·Pull down寻找 MGC13096的相互作用蛋白 | 第46-49页 |
| ·细胞培养 | 第46页 |
| ·原核表达 MGC13096 | 第46-47页 |
| ·Pull-down实验 | 第47-49页 |
| ·蛋白质鉴定 | 第49页 |
| ·主要分析测试仪器 | 第49-50页 |
| 参考文献 | 第50-51页 |
| 第四部分 结果和讨论 | 第51-92页 |
| ·MGC13096的生物信息学分析 | 第51-55页 |
| ·Results of Subprograms | 第51-52页 |
| ·Results of the k-NN Prediction | 第52页 |
| ·MGC13096的组织和发育表达谱 | 第52-53页 |
| ·MGC13096的基因表达谱分析 | 第53-55页 |
| ·PDCD2的生物信息学分析 | 第55-70页 |
| ·Results of Subprograms | 第55-57页 |
| ·Results of the k-NN Prediction | 第57页 |
| ·PDCD2的组织和发育表达谱 | 第57-58页 |
| ·PDCD2的保守结构域 | 第58-59页 |
| ·转录因子结合位点 | 第59-61页 |
| ·PDCD2基因表达谱分析 | 第61-70页 |
| ·MGC13096、PDCD2转录本1、2编码区(CDS)及 PDCD2_C domain的克隆及序列比对 | 第70-72页 |
| ·MGC13096、PDCD2在凋亡细胞中的表达 | 第72-76页 |
| ·流式细胞仪分析凋亡细胞和正常细胞的亚 G0期百分比 | 第72-75页 |
| ·MGC13096、PDCD2在凋亡细胞中的表达 | 第75-76页 |
| ·MGC13096的过表达引起细胞生长变缓不是凋亡引起的 | 第76-81页 |
| ·B12细胞中MGC13096的表达比293T和 H5增加了9倍还多 | 第77页 |
| ·H5，B12细胞生长曲线 | 第77-78页 |
| ·HEK293T、H5、B12细胞的生长周期分析 | 第78页 |
| ·HEK293T、H5、B12细胞凋亡分析 | 第78-81页 |
| ·荧光素酶法寻找 MGC13096影响的细胞通路 | 第81页 |
| ·Pull down寻找 MGC13096的相互作用蛋白 | 第81-88页 |
| ·MGC13096-pET32a/BL21(DE3)在几种培养基中的生长曲线 | 第82-83页 |
| ·原核表达 MGC13096 | 第83-84页 |
| ·原核表达 PDCD2_C domain | 第84页 |
| ·Pull-down实验 | 第84-85页 |
| ·蛋白质鉴定 | 第85-88页 |
| ·进一步的研究展望 | 第88页 |
| 参考文献 | 第88-92页 |
| 附录1: 细菌培养基配方 | 第92页 |
| 附录2: MGC13096的测序报告 | 第92-95页 |
| 附录3: 凋亡细胞中MGC13096、PDCD2、18s rRNA的表达 | 第95-99页 |
| 附录4: 293T、H5、B12细胞中MGC13096、18s rRNA的表达 | 第99-102页 |
| 附录5: MGC13096相互作用蛋白质谱图 | 第102-105页 |
| 附录6: 博士生期间发表的论文 | 第105-106页 |
| 致谢 | 第106页 |
