中文摘要 | 第1-5页 |
英文摘要 | 第5-10页 |
前言 | 第10-27页 |
1 生长激素研究进展 | 第10-14页 |
·生长激素及其家族成员 | 第10页 |
·生长激素的分泌和调节 | 第10-11页 |
·鱼类生长激素结构和生物学功能研究进展 | 第11-13页 |
·生长激素的分子结构特点及同源性比较 | 第11-13页 |
·生长激素的分子结构 | 第11-12页 |
·生长激素的同源性比较 | 第12-13页 |
·生长激素作用机理 | 第13页 |
·鱼生长激素在水产养殖中的应用 | 第13-14页 |
2 对虾白斑综合症病毒 | 第14-25页 |
·对虾白斑综合症的病原体 | 第14-16页 |
·对虾白斑综合症病毒(WSSV)的命名 | 第14-16页 |
·对虾白斑综合症病毒(WSSV)的分类地位 | 第16页 |
·对虾白斑综合症的症状及病理变化 | 第16-17页 |
·对虾白斑综合症的症状 | 第16页 |
·对虾白斑综合症的病理变化 | 第16-17页 |
·WSSV的大小、形态结构 | 第17-18页 |
·WSSV的感染宿主、传播途径 | 第18页 |
·WSSV的感染宿主的大小、形态结构 | 第18页 |
·WSSV的传播途径 | 第18页 |
·WSSV感染的动物模型 | 第18-19页 |
·WSSV的基因组及其编码的多肽 | 第19-25页 |
·WSSV的基因组及其稳定性 | 第19-20页 |
·WSSV基因组编码的多肽 | 第20-25页 |
·WSSV病毒粒子的主要结构蛋白 | 第20-25页 |
·结构蛋白之间的同源性及其理化特点 | 第25页 |
3 本研究的背景、目的和意义 | 第25-27页 |
材料与方法 | 第27-33页 |
1 材料 | 第27-29页 |
·菌种和质粒 | 第27页 |
·常用工具酶及试剂盒 | 第27页 |
·引物 | 第27页 |
·培养基 | 第27页 |
·常用溶液 | 第27-29页 |
·小量碱法制备质粒所用溶液 | 第27-28页 |
·琼脂糖凝胶电泳所用溶液 | 第28页 |
·丙烯酰胺凝胶电泳所用溶液 | 第28-29页 |
·Western blotting所用溶液 | 第29页 |
·其它溶液的配制 | 第29页 |
·主要仪器 | 第29页 |
2 实验方法 | 第29-33页 |
·碱裂解法提取质粒DNA | 第30页 |
·PCR | 第30-31页 |
·PCR产物的回收与纯化 | 第31页 |
·连接 | 第31-32页 |
·转化 | 第32页 |
·冷氯化钙法制备感受态细胞 | 第32页 |
·质粒转化大肠杆菌JM109感受态细胞 | 第32页 |
·阳性重组子的检测 | 第32-33页 |
第一章 囊膜蛋白基因vp28在大肠杆菌中的克隆,表达 | 第33-39页 |
0 前言 | 第33页 |
1 材料和方法 | 第33-37页 |
·材料 | 第33-34页 |
·方法 | 第34-37页 |
·PCR扩增vp28基因 | 第34页 |
·克隆载体pMD18-T28的构建 | 第34页 |
·重组表达载体的构建 | 第34-35页 |
·外源蛋白在E.coli BL21(DE3)中的表达 | 第35-37页 |
·E.coli BL21(DE3)-pET-vp28的诱导表达 | 第35-36页 |
·基因工程蛋白的粗提取 | 第36页 |
·表达产物的SDS-PAGE鉴定 | 第36页 |
·Western blotting检测 | 第36-37页 |
2 结果 | 第37-39页 |
·PCR扩增vp28基因 | 第37页 |
·重组质粒pET-vp28的构建和鉴定 | 第37页 |
·外源蛋白在E.coli BL21(DE3)中的表达 | 第37-38页 |
·表达产物的Western blotting检测 | 第38-39页 |
3 讨论 | 第39页 |
第二章 鲤鱼生长激素在大肠杆菌中的克隆,表达 | 第39-45页 |
0 前言 | 第39-40页 |
1 材料与方法 | 第40-42页 |
·材料 | 第40页 |
·方法 | 第40-42页 |
·鲤鱼脑垂体总RNA提取 | 第40页 |
·引物设计与合成及RT-PCR | 第40页 |
·克隆载体的构建 | 第40-41页 |
·DNA序列测序 | 第41页 |
·重组表达质粒的构建 | 第41-42页 |
·外源蛋白在E.coli BL21(DE3)中的表达 | 第42页 |
·E.coli BL2l(DE3)-pET-GH的诱导表达 | 第42页 |
·基因工程蛋白的粗提取 | 第42页 |
·表达产物的SDS-PAGE鉴定 | 第42页 |
2 结果 | 第42-44页 |
·总RNA的提取 | 第42-43页 |
·RT-PCR扩增鲤鱼GH cDNA | 第43页 |
·克隆载体的构建与筛选 | 第43页 |
·DNA序列分析 | 第43页 |
·表达载体的构建和筛选 | 第43页 |
·外源蛋白在E.coli BL21(DE3)中的表达 | 第43-44页 |
3 讨论 | 第44-45页 |
参考文献 | 第45-55页 |
致谢 | 第55页 |