| 中文摘要 | 第1-8页 |
| 英文摘要 | 第8-10页 |
| 引言 | 第10-30页 |
| 1.苏云金芽孢杆菌 | 第10-21页 |
| ·苏云金芽孢杆菌概述 | 第10-11页 |
| ·杀虫晶体蛋白的基本特征 | 第11-12页 |
| ·杀虫晶体蛋白的结构及其功能 | 第12-14页 |
| ·杀虫晶体蛋白的作用过程及杀虫机制 | 第14-16页 |
| ·昆虫抗性与抗性管理 | 第16-18页 |
| ·杀虫晶体蛋白的分类 | 第18-20页 |
| ·杀虫晶体蛋白分离纯化的研究现状 | 第20-21页 |
| 2.微生物蛋白质组学 | 第21-28页 |
| ·微生物蛋白质组学的研究现状 | 第22-26页 |
| ·基因工程菌蛋白质组学 | 第26-27页 |
| ·微生物亚蛋白质组学 | 第27-28页 |
| 3.立题依据和意义 | 第28-30页 |
| 材料与方法 | 第30-40页 |
| 1.材料 | 第30-31页 |
| ·供试菌株 | 第30页 |
| ·培养基 | 第30页 |
| ·主要试剂 | 第30-31页 |
| ·要仪器 | 第31页 |
| 2.方法 | 第31-40页 |
| ·菌体培养与伴孢晶体的分离 | 第31-32页 |
| ·样品蛋白的提取 | 第32页 |
| ·20-kb DNA的酶切消化 | 第32页 |
| ·蛋白质含量的测定 | 第32-33页 |
| ·SDS-PAGE所需试剂 | 第33-34页 |
| ·样品处理 | 第34页 |
| ·第一向固相pH梯度等电聚焦 | 第34页 |
| ·第二向SDS-PAGE垂直板电泳 | 第34-36页 |
| ·染色 | 第36页 |
| ·图象分析 | 第36页 |
| ·双向凝胶电泳分离的蛋白质点的鉴定 | 第36-38页 |
| ·Cry1Ac毒性核心片段的三维结构分析 | 第38-40页 |
| 结果与分析 | 第40-54页 |
| 1.蛋白质含量测定 | 第40-41页 |
| 2.样品的制备 | 第41-44页 |
| 3.图谱分析 | 第44-47页 |
| ·苏云金杆菌4.0718菌株、库斯塔克亚种HD-1菌株的双向电泳图谱分析 | 第44-46页 |
| ·Cry1Ac重组菌株HTX42杀虫晶体蛋白的双向电泳图谱分析 | 第46-47页 |
| 4.蛋白质斑点的MALDI-TOF-MS肽质量指纹分析 | 第47-49页 |
| 5.鉴定的差异蛋白质点的功能分析 | 第49-50页 |
| 6.Cry1Ac毒性核心片段的结构特征 | 第50-54页 |
| 讨论 | 第54-62页 |
| 1.杀虫晶体蛋白双向电泳图谱的获得 | 第54-58页 |
| ·蛋白样品的裂解液选择与电泳样品制备 | 第54-55页 |
| ·晶体蛋白双向电泳操作技术 | 第55-57页 |
| ·晶体蛋白双向电泳图谱特征与杀虫活性相关性 | 第57-58页 |
| 2.原位酶解样品与质谱鉴定 | 第58-59页 |
| ·原位酶解的技术操作 | 第58-59页 |
| 3.Cry1Ac毒性核心片段的三维结构与杀虫活性关系的分析 | 第59-62页 |
| 结论 | 第62-64页 |
| 参考文献 | 第64-74页 |
| 附录 | 第74-76页 |
| 致谢 | 第76-78页 |
| 原创性声明 | 第78页 |
