| 摘要 | 第1-6页 |
| Abstract | 第6-12页 |
| 第一章 引言 | 第12-20页 |
| ·研究背景 | 第12页 |
| ·国内外研究进展 | 第12-20页 |
| ·RV 基因组的结构特点 | 第12-13页 |
| ·病毒粒子的结构特点 | 第13-14页 |
| ·病毒分型 | 第14页 |
| ·结构蛋白 | 第14-17页 |
| ·狂犬病诊断方法的研究进展 | 第17-18页 |
| ·RV 单抗的研究进展 | 第18-20页 |
| 第二章 狂犬病毒糖蛋白膜外区克隆及序列分析 | 第20-32页 |
| ·实验材料 | 第20-21页 |
| ·RV 毒株 | 第20页 |
| ·菌种、工具酶及主要试剂 | 第20页 |
| ·实验器材 | 第20-21页 |
| ·实验方法 | 第21-26页 |
| ·引物设计与合成 | 第21页 |
| ·RV 病毒 RNA 的提取 | 第21页 |
| ·RT-PCR、重组质粒的构建 | 第21-25页 |
| ·阳性重组克隆质粒的鉴定及测序 | 第25页 |
| ·目的基因的序列分析 | 第25-26页 |
| ·实验结果 | 第26-31页 |
| ·GP 膜外区基因的 RT-PCR 扩增结果 | 第26页 |
| ·GP 膜外区基因的克隆结果 | 第26-27页 |
| ·阳性重组质粒 pMD-G 的测序鉴定与分析 | 第27-28页 |
| ·目的基因的优化分析 | 第28-31页 |
| ·实验讨论 | 第31-32页 |
| 第三章 狂犬病毒糖蛋白膜外区基因的原核表达及纯化 | 第32-41页 |
| ·实验材料与方法 | 第32-33页 |
| ·相关的载体 | 第32页 |
| ·菌种、工具酶及主要试剂 | 第32页 |
| ·实验器材 | 第32-33页 |
| ·实验方法 | 第33-35页 |
| ·重组原核表达载体的构建和鉴定 | 第33页 |
| ·重组菌的诱导表达及 SDS-PAGE 鉴定 | 第33页 |
| ·工程菌的大量表达、纯化及浓度测定 | 第33-34页 |
| ·重组蛋白的 Western blotting 鉴定 | 第34-35页 |
| ·重组蛋白的质谱鉴定 | 第35页 |
| ·实验结果 | 第35-39页 |
| ·重组克隆载体 pMD-G2 及表达载体 pET28a(+)的酶切鉴定 | 第35-36页 |
| ·重组表达质粒 pET-G 的双酶切鉴定 | 第36页 |
| ·重组蛋白的 SDS-PAGE 鉴定及最佳表达条件的确定 | 第36-38页 |
| ·重组蛋白的 Western blotting 的测定 | 第38-39页 |
| ·质谱鉴定结果 | 第39页 |
| ·讨论 | 第39-41页 |
| 第四章 狂犬病毒糖蛋白膜外区单克隆抗体的制备 | 第41-51页 |
| ·实验材料 | 第41页 |
| ·免疫原、实验动物及细胞的准备 | 第41页 |
| ·主要试剂和实验器材 | 第41页 |
| ·实验器材 | 第41页 |
| ·实验方法 | 第41-46页 |
| ·小鼠免疫 | 第41-42页 |
| ·间接 ELISA 法确定最佳抗原包被量和血清稀释度 | 第42页 |
| ·检测小鼠血清的效价 | 第42页 |
| ·细胞的准备 | 第42-43页 |
| ·细胞融合 | 第43-44页 |
| ·阳性杂交瘤细胞的筛选与克隆化 | 第44-45页 |
| ·单抗腹水的制备 | 第45页 |
| ·杂交瘤细胞与单抗特性的鉴定 | 第45-46页 |
| ·结果 | 第46-49页 |
| ·间接 ELISA 法确定最佳抗原包被量和血清稀释度 | 第46-47页 |
| ·免疫小鼠的效价 | 第47页 |
| ·细胞融合过程中细胞的形态 | 第47-48页 |
| ·单克隆抗体亚类的鉴定 | 第48页 |
| ·杂交瘤细胞染色体数目的鉴定 | 第48-49页 |
| ·腹水的效价 | 第49页 |
| ·杂交瘤细胞株分泌抗体的稳定性的评价 | 第49页 |
| ·讨论 | 第49-51页 |
| 第五章 全文结论 | 第51-52页 |
| 参考文献 | 第52-57页 |
| 附录 | 第57-60页 |
| 致谢 | 第60-61页 |
| 作者简介 | 第61页 |
