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草鱼MyoD基因cDNA克隆和表达研究

摘要第1-6页
Abstact第6-11页
第一章 脊椎动物肌肉的发育和调控第11-38页
 1 肌肉发生、发育的组织学研究第11-14页
   ·肌肉的起源和发生第11-12页
   ·肌肉组织的分类第12页
   ·骼肌的结构第12-14页
   ·骨骼肌的进化第14页
 2 肌肉发育的细胞学研究第14-18页
   ·肌源干细胞第14-16页
   ·肌卫星细胞第16-18页
 3 肌肉发育的基因调控第18-35页
   ·MyoD基因家族第19-23页
   ·IGFs第23-26页
   ·MSTN第26-30页
   ·锌指蛋白及其对肌肉发育的调节第30-33页
   ·其他因子对肌肉发育的影响第33-35页
 4 本研究的目的、意义和展望第35-38页
   ·研究的目的和意义第35-36页
   ·研究展望第36-38页
第二章 草鱼MyoD基因全长cDNA克隆第38-53页
 1 材料和方法第38-45页
   ·实验材料第38-40页
     ·实验用草鱼受精卵第38页
     ·菌种和质粒第38页
     ·相关试剂及试剂盒第38-39页
     ·培养基第39-40页
       ·LB液体培养基配制第39页
       ·Amp~+ LB固体培养基第39-40页
   ·实验方法第40-45页
     ·引物的设计和合成第40页
     ·草鱼胚胎总RNA的提取第40-45页
 2 结果第45-53页
   ·草鱼MyoD基因cDNA 3’末端扩增第45-46页
   ·草鱼MyoD基因cDNA 5’末端扩增第46-47页
   ·草鱼MyoD基因全长cDNA序列第47-48页
   ·草鱼MyoD基因和蛋白质结构分析第48-49页
   ·草鱼MyoD基因氨基酸序列的信号肽分析第49-50页
   ·不同动物MyoD基因序列的同源性比较第50-53页
第三章 草鱼MyoD基因在大肠杆菌中的表达研究第53-67页
 1 材料和方法第53-61页
   ·实验材料第53-54页
     ·菌株与质粒第53页
     ·主要药品和试剂第53页
     ·培养基第53-54页
     ·常用溶液及缓冲液第54页
   ·实验方法第54-61页
 2 结果第61-67页
   ·草鱼MyoD成熟肽改造PCR扩增第61-62页
   ·草鱼MyoD原核表达质粒PBV220—MyoD的构建及检测第62-65页
   ·重组菌的诱导表达第65-67页
第四章 草鱼MyoD基因在毕赤酵母菌中的表达研究第67-80页
 1 材料和方法第67-74页
   ·材料第67-69页
   ·方法第69-74页
 2 结果第74-80页
   ·草鱼MyoD基因真核表达载体构建第74-76页
   ·重组毕赤酵母工程菌的转化和检测第76-77页
   ·重组毕赤酵母工程菌的诱导表达第77-80页
第五章 草鱼MyoD、MSTN基因在草鱼不同发育阶段表达规律的研究第80-86页
 1 材料和方法第80-83页
   ·材料第80-81页
   ·实验方法第81-83页
 2 结果第83-86页
   ·草鱼MyoD和β-actin基因在不同发育阶段的表达第83-85页
   ·草鱼MSTN基因在不同发育阶段的表达第85-86页
第六章 讨论和结论第86-98页
 1 讨论第86-97页
   ·草鱼MyoD基因及其结构第86页
   ·不同动物MyoD及其氨基酸序列同源性比较及其与肌肉发育的关系第86-90页
   ·草鱼MyoD基因原核表达第90-92页
   ·草鱼MyoD基因在毕赤酵母中的表达第92-94页
   ·草鱼MyoD基因在不同发育阶段的表达规律第94-95页
   ·草鱼MSTN基因在不同发育阶段的表达规律及其和MyoD基因的互作第95-97页
 2 结论第97-98页
   ·首次克隆并获得了草鱼MyoD全长cDNA序列。第97页
   ·分析并揭示了MyoD基因结构和脊椎动物进化的关系第97页
   ·构建了草鱼MyoD基因的原核表达载体并获得了重组蛋白第97页
   ·首次构建了草鱼MyoD基因毕赤酵母真核表达载体pPICZαA-MyoD,并获得了基因工程菌和重组蛋白第97页
   ·首次在草鱼上对控制肌肉发育的正调控基因MyoD和负调控基因MSTN的表达关系进行了初步探索第97-98页
参考文献第98-110页
附录第110-113页
致谢第113-114页
作者简介第114页

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