摘要 | 第1-6页 |
Abstact | 第6-11页 |
第一章 脊椎动物肌肉的发育和调控 | 第11-38页 |
1 肌肉发生、发育的组织学研究 | 第11-14页 |
·肌肉的起源和发生 | 第11-12页 |
·肌肉组织的分类 | 第12页 |
·骼肌的结构 | 第12-14页 |
·骨骼肌的进化 | 第14页 |
2 肌肉发育的细胞学研究 | 第14-18页 |
·肌源干细胞 | 第14-16页 |
·肌卫星细胞 | 第16-18页 |
3 肌肉发育的基因调控 | 第18-35页 |
·MyoD基因家族 | 第19-23页 |
·IGFs | 第23-26页 |
·MSTN | 第26-30页 |
·锌指蛋白及其对肌肉发育的调节 | 第30-33页 |
·其他因子对肌肉发育的影响 | 第33-35页 |
4 本研究的目的、意义和展望 | 第35-38页 |
·研究的目的和意义 | 第35-36页 |
·研究展望 | 第36-38页 |
第二章 草鱼MyoD基因全长cDNA克隆 | 第38-53页 |
1 材料和方法 | 第38-45页 |
·实验材料 | 第38-40页 |
·实验用草鱼受精卵 | 第38页 |
·菌种和质粒 | 第38页 |
·相关试剂及试剂盒 | 第38-39页 |
·培养基 | 第39-40页 |
·LB液体培养基配制 | 第39页 |
·Amp~+ LB固体培养基 | 第39-40页 |
·实验方法 | 第40-45页 |
·引物的设计和合成 | 第40页 |
·草鱼胚胎总RNA的提取 | 第40-45页 |
2 结果 | 第45-53页 |
·草鱼MyoD基因cDNA 3’末端扩增 | 第45-46页 |
·草鱼MyoD基因cDNA 5’末端扩增 | 第46-47页 |
·草鱼MyoD基因全长cDNA序列 | 第47-48页 |
·草鱼MyoD基因和蛋白质结构分析 | 第48-49页 |
·草鱼MyoD基因氨基酸序列的信号肽分析 | 第49-50页 |
·不同动物MyoD基因序列的同源性比较 | 第50-53页 |
第三章 草鱼MyoD基因在大肠杆菌中的表达研究 | 第53-67页 |
1 材料和方法 | 第53-61页 |
·实验材料 | 第53-54页 |
·菌株与质粒 | 第53页 |
·主要药品和试剂 | 第53页 |
·培养基 | 第53-54页 |
·常用溶液及缓冲液 | 第54页 |
·实验方法 | 第54-61页 |
2 结果 | 第61-67页 |
·草鱼MyoD成熟肽改造PCR扩增 | 第61-62页 |
·草鱼MyoD原核表达质粒PBV220—MyoD的构建及检测 | 第62-65页 |
·重组菌的诱导表达 | 第65-67页 |
第四章 草鱼MyoD基因在毕赤酵母菌中的表达研究 | 第67-80页 |
1 材料和方法 | 第67-74页 |
·材料 | 第67-69页 |
·方法 | 第69-74页 |
2 结果 | 第74-80页 |
·草鱼MyoD基因真核表达载体构建 | 第74-76页 |
·重组毕赤酵母工程菌的转化和检测 | 第76-77页 |
·重组毕赤酵母工程菌的诱导表达 | 第77-80页 |
第五章 草鱼MyoD、MSTN基因在草鱼不同发育阶段表达规律的研究 | 第80-86页 |
1 材料和方法 | 第80-83页 |
·材料 | 第80-81页 |
·实验方法 | 第81-83页 |
2 结果 | 第83-86页 |
·草鱼MyoD和β-actin基因在不同发育阶段的表达 | 第83-85页 |
·草鱼MSTN基因在不同发育阶段的表达 | 第85-86页 |
第六章 讨论和结论 | 第86-98页 |
1 讨论 | 第86-97页 |
·草鱼MyoD基因及其结构 | 第86页 |
·不同动物MyoD及其氨基酸序列同源性比较及其与肌肉发育的关系 | 第86-90页 |
·草鱼MyoD基因原核表达 | 第90-92页 |
·草鱼MyoD基因在毕赤酵母中的表达 | 第92-94页 |
·草鱼MyoD基因在不同发育阶段的表达规律 | 第94-95页 |
·草鱼MSTN基因在不同发育阶段的表达规律及其和MyoD基因的互作 | 第95-97页 |
2 结论 | 第97-98页 |
·首次克隆并获得了草鱼MyoD全长cDNA序列。 | 第97页 |
·分析并揭示了MyoD基因结构和脊椎动物进化的关系 | 第97页 |
·构建了草鱼MyoD基因的原核表达载体并获得了重组蛋白 | 第97页 |
·首次构建了草鱼MyoD基因毕赤酵母真核表达载体pPICZαA-MyoD,并获得了基因工程菌和重组蛋白 | 第97页 |
·首次在草鱼上对控制肌肉发育的正调控基因MyoD和负调控基因MSTN的表达关系进行了初步探索 | 第97-98页 |
参考文献 | 第98-110页 |
附录 | 第110-113页 |
致谢 | 第113-114页 |
作者简介 | 第114页 |