| 中文摘要 | 第1-6页 |
| ABSTRACT | 第6-7页 |
| 前言 | 第7-31页 |
| 模式生物 | 第7-9页 |
| ·模式生物对生物学研究的重要性 | 第7页 |
| ·转基因小鼠作为动物模型的重要性 | 第7-8页 |
| ·模式生物的研究技术及其相互借鉴 | 第8页 |
| ·果蝇遗传学的常用技术 | 第8-9页 |
| GAL4/UAS系统 | 第9-19页 |
| ·GAL4/UAS系统的基本知识: | 第10-11页 |
| ·对GAL4/UAS系统的改进 | 第11-15页 |
| ·提高诱导效率 | 第11页 |
| ·获得新的组织特异性表达GAL4品系的方法 | 第11-12页 |
| ·全基因组范围构建UAS-目标基因表达系统 | 第12页 |
| ·提高控制的精确性: | 第12-15页 |
| ·GAL4/UAS系统应用的拓展 | 第15-18页 |
| ·精细的嵌合体分析 | 第15-17页 |
| ·进行组织特异性的基因敲除。 | 第17页 |
| ·利用EP品系进行全基因组范围的基因捕捉 | 第17-18页 |
| ·小鼠中序的GAL4/UAS系统 | 第18-19页 |
| ·诱导表达系统在转基因小鼠中的意义 | 第18页 |
| ·小鼠中GAL4/UAS系统研究的历史 | 第18-19页 |
| ·小鼠中对GAL4/UAS系统的改造 | 第19页 |
| ·GAL4/UAS系统的—些问题: | 第19页 |
| 标记基因及其应用 | 第19-23页 |
| ·标记基因在果蝇遗传学中的应用 | 第19-20页 |
| ·作为转基因报告基因,用于跟踪转基因果蝇。 | 第19-20页 |
| ·用来标记不同的染色体。 | 第20页 |
| ·小鼠中的转基因标记 | 第20-23页 |
| ·毛色基因标记 | 第20-21页 |
| ·生化标记 | 第21-22页 |
| ·荧光蛋白标记 | 第22页 |
| ·荧光蛋白在小鼠标记中的应用 | 第22-23页 |
| 转录后基因调控—RNAI | 第23-27页 |
| ·RNAi的发展历史 | 第23-24页 |
| ·RNAi在果蝇研究中的应用 | 第24页 |
| ·小鼠中RNAi | 第24-27页 |
| ·哺乳动物中进行RNAi的途径 | 第24-25页 |
| ·PKR与RNAi非特异性抑制效应 | 第25-27页 |
| 参考文献 | 第27-31页 |
| 第一部分 小鼠转基因标记的构建 | 第31-45页 |
| 摘要 | 第31-32页 |
| 材料与方法 | 第32-34页 |
| 转基因质粒的构建: | 第32页 |
| pCX-mRFP1的构建 | 第32页 |
| agouti与Tyrosinase构建: | 第32页 |
| 转基因小鼠: | 第32-33页 |
| 小鼠: | 第32页 |
| 用于鉴定转基因小鼠的引物: | 第32-33页 |
| 活体小鼠荧光观察: | 第33页 |
| 小鼠行为学分析: | 第33页 |
| 解剖 | 第33页 |
| 切片 | 第33页 |
| 细胞 | 第33-34页 |
| 结果 | 第34-43页 |
| 细胞表达 | 第34页 |
| 不同转基因标记在小鼠中的表达 | 第34-35页 |
| mRFP1转基因小鼠 | 第35-36页 |
| mRFP1的剂量效应 | 第36-37页 |
| pCX-mRFP1在不同组织中的表达 | 第37-38页 |
| pCX-mRFP1在发育过程中的表达 | 第38-39页 |
| pCX-mRFP1对小鼠的影响检测 | 第39-43页 |
| 讨论 | 第43-44页 |
| 参考文献 | 第44-45页 |
| 第二部分 GAL4/UAS二元表达系统在小鼠中的应用 | 第45-58页 |
| 摘要 | 第45-46页 |
| 材料与方法 | 第46-49页 |
| 质粒 | 第46-47页 |
| 组织特异性Ga14质粒 | 第46-47页 |
| 细胞培养与转染 | 第47页 |
| 小鼠 | 第47-48页 |
| 转基因小鼠与鉴定 | 第48页 |
| 切片与x-gal染色: | 第48-49页 |
| 结果 | 第49-54页 |
| 细胞功能测试 | 第49页 |
| 转基因小鼠 | 第49-50页 |
| 双阳性小鼠的获得 | 第50-51页 |
| 不同的UAS-LacZ质粒比较 | 第51-52页 |
| CAL4不同突变体与UAS-nLacZ诱导效率的细胞鉴定 | 第52-53页 |
| 5xUAS-nLacZ染色 | 第53-54页 |
| 讨论 | 第54-57页 |
| 细胞内效率与个体内效率 | 第54页 |
| 组织特异性及控制的严谨性 | 第54-55页 |
| 不同构建的诱导效率 | 第55页 |
| UAS突变体 | 第55页 |
| GAL4突变体 | 第55页 |
| GAL4/UAS系统的拓展 | 第55-57页 |
| 参考文献 | 第57-58页 |
| 第三部分 通过RNAI降低PKR水平以提高哺乳动物中RNAI的特异性 | 第58-69页 |
| 摘要 | 第58-59页 |
| 材料与方法 | 第59-61页 |
| 质粒构建 | 第59页 |
| 细胞培养与转染 | 第59页 |
| ONPG显色定量lacZ表达 | 第59-60页 |
| MTT法细胞活细胞数检测 | 第60页 |
| 实时定量PCR检测PKR与OAS1转录水平检测 | 第60-61页 |
| 结果 | 第61-66页 |
| 长的双链RNA可以非特异的降低细胞内其他基因的表达 | 第61-62页 |
| 共表达大肠杆菌rnc可以消除双链RNA的表达抑制 | 第62-63页 |
| 双链RNA可诱导PKR表达 | 第63页 |
| IPKR可以降低PKR表达水平 | 第63-64页 |
| IPKR可以降低双链RNA引起的非特异性基因表达抑制 | 第64-66页 |
| 讨论 | 第66-68页 |
| 参考文献 | 第68-69页 |
| 致谢 | 第69-70页 |
| 附录:相关论文发表情况 | 第70-71页 |
