摘要 | 第1-4页 |
Abstract | 第4-5页 |
前言 | 第5-8页 |
材料与方法 | 第8-24页 |
一、实验材料 | 第8-11页 |
1 质粒载体 | 第8-9页 |
2 大肠杆菌菌株 | 第9页 |
3 工具酶及DNA分子量标准 | 第9页 |
4 试剂盒 | 第9-10页 |
5 主要化学试剂 | 第10页 |
6 培养基 | 第10页 |
7 主要仪器设备 | 第10页 |
8 DNA序列分析软件 | 第10页 |
9 引物 | 第10-11页 |
二、实验方法 | 第11-24页 |
1 质粒的构建 | 第11-16页 |
2 重组蛋白质的表达 | 第16-18页 |
3 可溶形式GST融合蛋白的亲和纯化 | 第18页 |
4 SNCA native蛋白的分离纯化 | 第18页 |
5 SNCA蛋白晶体的生长 | 第18-19页 |
6 组织蛋白的提取 | 第19-20页 |
7 GST融合蛋白的PULL-DOWN实验 | 第20-21页 |
8 SDS-PAGE凝胶的AgNO_3染色方法 | 第21页 |
9 差异蛋白质的质谱分析 | 第21-24页 |
实验结果 | 第24-37页 |
1 人SNCA基因和SNCG基因cDNA的克隆 | 第24-28页 |
2 pGEX4T-1-SNCA和pGEX4T-1-SNCG原核表达载体的构建 | 第28页 |
3 融合蛋白GST-SNCA和GST-SNCG的表达纯化 | 第28-30页 |
4 SNCA蛋白的结晶 | 第30-31页 |
5 人SNCA的突变体A53T的获得 | 第31-33页 |
6 SNCG(γ—synuclein)的GST-PULLDOWN | 第33-34页 |
7 差异蛋白质谱分析 | 第34-35页 |
8 人SNCG的CpG岛的克隆 | 第35-37页 |
讨论 | 第37-47页 |
小结 | 第47-48页 |
论文参考文献 | 第48-51页 |
综述 | 第51-68页 |
综述参考文献 | 第62-68页 |
致谢 | 第68页 |