| 中文摘要 | 第1-7页 |
| 英文摘要 | 第7-16页 |
| 第一章 肿瘤的基因治疗 | 第16-62页 |
| ·肿瘤基因治疗概述 | 第16-22页 |
| ·肿瘤的危害 | 第16页 |
| ·基因治疗的基本原理 | 第16-19页 |
| ·肿瘤基因治疗简介 | 第19页 |
| ·用于肿瘤治疗的基因 | 第19-22页 |
| ·用于肿瘤基因治疗的载体 | 第22-60页 |
| ·肿瘤基因治疗载体概述 | 第22-26页 |
| ·复制缺陷型病毒载体 | 第26-45页 |
| ·复制型病毒载体(溶瘤病毒) | 第45-60页 |
| ·结语 | 第60-62页 |
| 第二章 BAC-研究疱疹病毒基因组的新工具 | 第62-74页 |
| ·疱疹病毒基因组方法学的发展历史 | 第62-63页 |
| ·BAC技术在疱疹病毒基因组研究中的应用 | 第63-72页 |
| ·BAC技术 | 第64-65页 |
| ·BAC克隆过程和稳定性 | 第65-66页 |
| ·BAC克隆的修饰方法 | 第66-71页 |
| ·BAC-DNA在疱疹病毒研究方面的应用 | 第71-72页 |
| ·本研究的研究背景和目的 | 第72-74页 |
| 第三章 几种溶瘤型HSV-1的构建 | 第74-111页 |
| ·引言 | 第74-76页 |
| ·质粒、细胞、菌株、病毒和试剂 | 第76-77页 |
| ·分子生物学方法 | 第77-85页 |
| ·DNA的制备 | 第77-79页 |
| ·大肠杆菌感受态细胞的制备 | 第79-80页 |
| ·DNA片段回收 | 第80-81页 |
| ·DNA片段及载体的连接 | 第81页 |
| ·质粒DNA的转化 | 第81-82页 |
| ·菌落PCR | 第82页 |
| ·Southern杂交探针的标记与纯化 | 第82-83页 |
| ·Southern杂交方法 | 第83页 |
| ·转染方法 | 第83-84页 |
| ·总RNA提取 | 第84页 |
| ·RT-PCR | 第84-85页 |
| ·细胞培养方法 | 第85-86页 |
| ·细胞培养基的配制 | 第85页 |
| ·细胞传代培养 | 第85-86页 |
| ·细胞的冻存与复苏 | 第86页 |
| ·细胞计数 | 第86页 |
| ·重组病毒的构建 | 第86-96页 |
| ·mtHSV的构建 | 第87-89页 |
| ·RecA依赖的同源重组构建HSV1-Δrr-V1 | 第89-93页 |
| ·HSV1-EN-Δrr的构建 | 第93-96页 |
| ·结果 | 第96-108页 |
| ·mtHSV的构建 | 第96-100页 |
| ·HSV1-Δrr-V1的构建 | 第100-104页 |
| ·HSV1-EN-Δrr的构建 | 第104-108页 |
| ·讨论 | 第108-111页 |
| 第四章 mtHSV的体外溶瘤试验 | 第111-125页 |
| ·引言 | 第111-112页 |
| ·材料和方法 | 第112-117页 |
| ·细胞系、质粒、病毒和动物 | 第112-113页 |
| ·试剂、血清和培养基 | 第113-114页 |
| ·细胞培养 | 第114页 |
| ·病毒的增殖和纯化 | 第114-115页 |
| ·空斑试验 | 第115-116页 |
| ·mtHSV对抗疱疹药物的敏感试验 | 第116页 |
| ·病毒的复制试验 | 第116页 |
| ·病毒的细胞毒性试验 | 第116-117页 |
| ·结果与分析 | 第117-123页 |
| ·病毒的增殖 | 第117-118页 |
| ·mtHSV对抗疱疹药物的敏感性 | 第118页 |
| ·mtHSV在几种哺乳动物细胞中的复制 | 第118-119页 |
| ·mtHSV的细胞毒力试验 | 第119-123页 |
| ·讨论 | 第123-125页 |
| 第五章 mtHSV治疗小鼠肉瘤的动物试验 | 第125-144页 |
| ·引言 | 第125-126页 |
| ·材料和方法 | 第126-130页 |
| ·细胞系、病毒、抗体和动物 | 第126页 |
| ·试剂 | 第126-127页 |
| ·荷S-180小鼠肉瘤的动物模型的建立 | 第127页 |
| ·荷瘤小鼠的生存期试验 | 第127页 |
| ·治疗小鼠的病理检查 | 第127-128页 |
| ·免疫组化检测 | 第128-129页 |
| ·组织DNA的提取 | 第129页 |
| ·PCR检测组织中病毒 | 第129页 |
| ·电镜分析 | 第129-130页 |
| ·统计学分析 | 第130页 |
| ·结论 | 第130-141页 |
| ·mtHSV治疗的生存期试验 | 第130-135页 |
| ·病理学和组织学结论# | 第135-138页 |
| ·免疫组化结果 | 第138-141页 |
| ·PCR结果 | 第141页 |
| ·电镜观察结果 | 第141页 |
| ·讨论 | 第141-144页 |
| 第六章 mtHSV对荷人肝癌Hep-3B裸鼠的治疗 | 第144-161页 |
| ·引言 | 第145页 |
| ·材料与方法 | 第145-149页 |
| ·细胞与实验动物 | 第145-146页 |
| ·Hep-3B细胞的大量培养及浓缩 | 第146页 |
| ·建立荷瘤裸鼠模型 | 第146-147页 |
| ·mtHSV的制备和保存 | 第147页 |
| ·mtHSV对荷Hep-3b裸鼠的治疗方案 | 第147-148页 |
| ·裸鼠观察与肿瘤测量及取材 | 第148页 |
| ·裸鼠各组织总RNA的提取和RT-PCR | 第148页 |
| ·血液学指标检测 | 第148-149页 |
| ·血液生化指标检测 | 第149页 |
| ·系统尸检及病理组织学检查 | 第149页 |
| ·统计学分析 | 第149页 |
| ·结果 | 第149-159页 |
| ·荷人瘤Hep-3B裸鼠模型的建立 | 第149页 |
| ·mtHSV的体内抑瘤效应 | 第149-153页 |
| ·RT-PCR产物的电泳检测 | 第153-154页 |
| ·治疗裸鼠生理指标的检测 | 第154-157页 |
| ·系统尸检结果 | 第157-158页 |
| ·病理组织学检查 | 第158-159页 |
| ·讨论 | 第159-161页 |
| 第七章 HSV1-Δrr-V1的溶瘤效应 | 第161-174页 |
| ·引言 | 第161-162页 |
| ·材料与方法 | 第162-164页 |
| ·试剂、载体、菌株、细胞 | 第162页 |
| ·转染方法 | 第162页 |
| ·绿色荧光蛋白基因的表达 | 第162-163页 |
| ·病毒学研究方法 | 第163页 |
| ·HSV1-Δrr-V1对肿瘤细胞的毒力试验 | 第163页 |
| ·HSV1-Δrr-V1的半数致死量测定 | 第163页 |
| ·HSV1-Δrr-V1的体外抑瘤试验 | 第163-164页 |
| ·结果 | 第164-172页 |
| ·HSV1-Δrr-V1在Vero细胞中的包装和增值 | 第164-166页 |
| ·HSV1-Δrr-V1中EGFP基因的表达 | 第166-168页 |
| ·HSV1-Δrr-V1的细胞毒性试验 | 第168-170页 |
| ·HSV1-Δrr-V1的动物试验 | 第170-171页 |
| ·HSV1-Δrr-V1的体内肿瘤抑制试验 | 第171-172页 |
| ·讨论 | 第172-174页 |
| 研究总结 | 第174-175页 |
| 参考文献 | 第175-194页 |
| 博士期间发表的论文 | 第194-195页 |
| 致谢 | 第195-197页 |
