| 摘要 | 第1-5页 |
| Abstract | 第5-12页 |
| 1 引言 | 第12-25页 |
| ·猪圆环病毒2 型概述 | 第12-20页 |
| ·PCV2 的生物学特性 | 第12-13页 |
| ·PCV2 的基因组结构及主要编码的蛋白 | 第13-14页 |
| ·PCV2 基因型分析 | 第14-15页 |
| ·PCV2 的流行病学及临诊症状 | 第15页 |
| ·PCV2 的致病机理 | 第15-18页 |
| ·PCV2 感染对疫苗免疫效果的影响 | 第18-19页 |
| ·PCV2 的诊断及防治 | 第19-20页 |
| ·猪瘟及其危害 | 第20-21页 |
| ·猪瘟的防治 | 第21-22页 |
| ·研究内容和技术路线 | 第22页 |
| ·研究内容 | 第22页 |
| ·技术路线（见下页） | 第22页 |
| ·研究目的与意义 | 第22-23页 |
| ·研究目标 | 第23-25页 |
| 2 材料 | 第25-30页 |
| ·毒株与疫苗 | 第25页 |
| ·细胞因子重组质粒 | 第25页 |
| ·实验动物 | 第25页 |
| ·主要试剂 | 第25-29页 |
| ·RNA 和DNA 提取试剂 | 第25-26页 |
| ·细胞培养用溶液 | 第26页 |
| ·大肠杆菌感受态细胞制备及转化用溶液 | 第26-27页 |
| ·琼脂糖凝胶电泳用溶液 | 第27页 |
| ·外周血淋巴细胞增殖试验用溶液 | 第27-28页 |
| ·流式细胞术检测用标记抗体 | 第28页 |
| ·其它试剂 | 第28-29页 |
| ·主要仪器 | 第29-30页 |
| 3 方法 | 第30-38页 |
| ·PCR 用引物的设计与合成 | 第30页 |
| ·细胞因子实时荧光定量PCR 标准曲线的建立 | 第30-32页 |
| ·大肠杆菌感受态细胞的制备-CaCl_2 法 | 第30-31页 |
| ·细胞因子重组质粒的转化 | 第31页 |
| ·细胞因子重组质粒DNA 的提取 | 第31页 |
| ·细胞因子实时荧光定量PCR 标准曲线的建立 | 第31-32页 |
| ·动物试验设计 | 第32-33页 |
| ·血清中PCV2 核酸及PCV2 特异性抗体的检测 | 第33-34页 |
| ·血清中PCV2 核酸的检测 | 第33页 |
| ·血清中PCV2 特异性抗体检测 | 第33-34页 |
| ·血清中CSFV 特异性抗体的检测 | 第34页 |
| ·外周血淋巴细胞增殖试验（MTT 法） | 第34-35页 |
| ·外周血淋巴细胞的分离 | 第34-35页 |
| ·外周血淋巴细胞增殖试验 | 第35页 |
| ·外周血中免疫细胞含量的测定 | 第35-36页 |
| ·外周血中白细胞和淋巴细胞含量的测定 | 第35页 |
| ·外周血淋巴细胞中NK 细胞、T 细胞及T 细胞亚群含量的测定 | 第35-36页 |
| ·外周血淋巴细胞中细胞因子MRNA 转录水平的测定 | 第36-37页 |
| ·外周血淋巴细胞中总RNA 的提取 | 第36页 |
| ·外周血淋巴细胞中总RNA 的反转录 | 第36页 |
| ·外周血淋巴细胞中细胞因子mRNA 转录水平的测定 | 第36-37页 |
| ·数据表示和统计分析 | 第37-38页 |
| 4 结果与分析 | 第38-58页 |
| ·细胞因子目的基因片段标准曲线的建立 | 第38-40页 |
| ·在PCV2 感染猪的血清中检测到了PCV2 核酸及PCV2 特异性抗体 | 第40-41页 |
| ·PCV2 感染抑制了 CSF 弱毒疫苗免疫猪CSFV 特异性抗体的产生 | 第41-42页 |
| ·PCV2 感染降低了 CSF 弱毒疫苗免疫猪外周血淋巴细胞的增殖活性 | 第42-43页 |
| ·PCV2 感染对 CSF 弱毒疫苗免疫猪白细胞含量的影响 | 第43-44页 |
| ·PCV2 感染对 CSF 弱毒疫苗免疫猪外周血淋巴细胞含量的影响 | 第44-45页 |
| ·PCV2 感染对 CSF 弱毒疫苗免疫猪NK 细胞含量的影响 | 第45-46页 |
| ·PCV2 感染对 CSF 弱毒疫苗免疫猪外周血淋巴细胞中T 细胞及T 亚群含量的影响 | 第46-51页 |
| ·外周血淋巴细胞中T 细胞含量的变化 | 第46-47页 |
| ·外周血淋巴细胞中Th 细胞亚群含量的变化 | 第47-48页 |
| ·外周血淋巴细胞中Tc 细胞亚群含量的变化 | 第48-49页 |
| ·外周血淋巴细胞中Tm 细胞亚群含量的变化 | 第49-50页 |
| ·外周血淋巴细胞中γδT 细胞亚群含量的变化 | 第50-51页 |
| ·PCV2 感染对 CSF 弱毒疫苗免疫猪PBLC 内细胞因子MRNA 转录水平的影响 | 第51-58页 |
| ·IFN-γmRNA 的转录水平 | 第51-52页 |
| ·IL-2 m RNA 的转录水平 | 第52-53页 |
| ·IL-4 m RNA 的转录水平 | 第53-54页 |
| ·IL-10 mRNA 的转录水平 | 第54-55页 |
| ·IL-12p40 mRNA 的转录水平 | 第55-56页 |
| ·IL-18 mRNA 的转录水平 | 第56-58页 |
| 5 讨论 | 第58-63页 |
| ·实时荧光定量PCR 的应用 | 第58页 |
| ·PCV2 感染导致CSF 弱毒疫苗免疫猪体液免疫应答功能抑制 | 第58-59页 |
| ·PCV2 感染导致CSF 弱毒疫苗免疫猪PBLC 增殖活性的短期下降 | 第59页 |
| ·PCV2 感染对CSF 弱毒疫苗免疫猪外周血中白细胞和NK 细胞含量的影响 | 第59-60页 |
| ·PCV2 感染对T 细胞亚群含量变化的影响 | 第60-61页 |
| ·PCV2 感染对PBLC 内细胞因子MRNA 转录水平的影响 | 第61-63页 |
| 6 结论 | 第63-64页 |
| 参考文献 | 第64-71页 |
| 作者简介 | 第71-72页 |
| 致谢 | 第72-73页 |
