| 1 前言 | 第1-21页 |
| 1．1 综述 | 第8页 |
| 1．2 乙醇的理化性质 | 第8-9页 |
| 1．3 发展燃料酒精的意义 | 第9-12页 |
| 1．4 国外燃料酒精工业概况 | 第12页 |
| 1．5 我国酒精工业的历史和现状 | 第12-13页 |
| 1．6 淀粉质原料酒精生产王艺的进展 | 第13-14页 |
| 1．7 酒糟糟液的处理方法 | 第14页 |
| 1．8 酒精生产对酵母的要求 | 第14页 |
| 1．9 构建耐高温、耐高浓度酒精和高渗透压酵母菌的方法 | 第14-16页 |
| 1．10 细胞电诱导融合技术的简介 | 第16-18页 |
| 1．11 论文立题依据 | 第18-20页 |
| 1．12 采用的技术路线 | 第20-21页 |
| 2 材料与方法 | 第21-30页 |
| 2．1 材料 | 第21-23页 |
| 2．1．1 菌种 | 第21页 |
| 2．1．2 培养基 | 第21-22页 |
| 2．1．3 溶液 | 第22-23页 |
| 2．1．4 主要仪器和设备 | 第23页 |
| 2．2 实验方法 | 第23-30页 |
| 2．2．1 生长曲线的测定 | 第23页 |
| 2．2．2 酵母菌单倍体的分离 | 第23-24页 |
| 2．2．3 单倍体的确定 | 第24页 |
| 2．2．4 紫外线诱变菌体致死率曲线的测定 | 第24-25页 |
| 2．2．5 遗传标记的制作 | 第25-26页 |
| 2．2．6 营养缺陷型的检出 | 第26页 |
| 2．2．7 营养缺陷型的鉴定 | 第26页 |
| 2．2．8 菌体回复突变率的测定 | 第26页 |
| 2．2．9 菌种的分离、纯化 | 第26页 |
| 2．2．10 酵母生长温度极限的测定 | 第26-27页 |
| 2．2．11 酵母死灭温度的测定 | 第27页 |
| 2．2．12 酵母生长发酵pH值极限的测定 | 第27页 |
| 2．2．13 酵母耐酒精浓度的测定 | 第27页 |
| 2．2．14 酵母耐还原糖能力的测定 | 第27页 |
| 2．2．15 原生质体的制备 | 第27-28页 |
| 2．2．16 原生质体形成率和再生率的测定 | 第28页 |
| 2．2．17 去离子重蒸水电导率的测定 | 第28页 |
| 2．2．18 细胞成串率的计算 | 第28页 |
| 2．2．19 原生质体的电诱导融合 | 第28页 |
| 2．2．20 融合子的检出 | 第28页 |
| 2．2．21 发酵工艺 | 第28页 |
| 2．2．22 玉米中粗淀粉含量的测定 | 第28-29页 |
| 2．2．23 发酵糖化醪分析 | 第29页 |
| 2．2．24 发酵成熟醪分析 | 第29页 |
| 2．2．25 淀粉理论出酒率、实际出酒率、原料利用率和淀粉利用率 | 第29页 |
| 2．2．26 定磷法测定DNA含量 | 第29页 |
| 2．2．27 DNA含量的测定及染色体倍数的确定 | 第29-30页 |
| 3 结果与讨论 | 第30-51页 |
| 3．1 出发菌株的筛及选理化特性的测定 | 第30-31页 |
| 3．2 亲株单倍体的分离与鉴定 | 第31-33页 |
| 3．3 亲株生长曲线的测定 | 第33-34页 |
| 3．4 Y111·6（α）遗传标记的制备 | 第34-36页 |
| 3．4．1 出发菌株的选择 | 第34页 |
| 3．4．2 Y111·6（α）型单倍体紫外线诱变致死率、突变率曲线的测定 | 第34-35页 |
| 3．4．3 营养缺陷型的检出及鉴定 | 第35页 |
| 3．4．4 营养缺陷型菌株稳定性的验证 | 第35-36页 |
| 3．4．5 Y111·6（α）的缺陷型与出发菌株发酵性能的比较 | 第36页 |
| 3．5 亲株原生质体制备条件的确定 | 第36-39页 |
| 3．5．1 溶壁酶浓度的确定 | 第36-37页 |
| 3．5．2 破壁时间及原生质体再生率的确定 | 第37-39页 |
| 3．6 原生质体电诱导融合参数的确定 | 第39-43页 |
| 3．6．1 交变电场的频率和场强的确定 | 第39-40页 |
| 3．6．2 融合条件的确定 | 第40-43页 |
| 3．7 原生质体电融合 | 第43页 |
| 3．8 融合子的检出 | 第43页 |
| 3．9 融合子的筛选 | 第43-44页 |
| 3．9．1 假阳性菌株的排除 | 第43页 |
| 3．9．2 耐酒精与耐还原糖能力的初筛 | 第43-44页 |
| 3．9．3 发酵性能的复筛 | 第44页 |
| 3．10 融合子的鉴定 | 第44-47页 |
| 3．10．1 融合子的大小及体积的测定 | 第44-45页 |
| 3．10．2 融合子与亲株理化特性的比较 | 第45页 |
| 3．10．3 融合子DNA的含量及染色体倍数的确定 | 第45-46页 |
| 3．10．4 融合子稳定性的测定 | 第46-47页 |
| 3．11 融合子发酵性能的测定 | 第47-49页 |
| 3．12 酒精得率、淀粉利用率 | 第49-51页 |
| 4 小结 | 第51-52页 |
| 5 展望 | 第52-53页 |
| 6 参考文献 | 第53-56页 |
| 7 致谢 | 第56页 |
| 8 研究生期间论文发表情况 | 第56页 |
