中文摘要 | 第1-6页 |
英文摘要 | 第6-14页 |
引言 | 第14-23页 |
材料与方法 | 第23-37页 |
1 材料与设备 | 第23-25页 |
2 方法 | 第25-37页 |
2.1 酶液提取条件 | 第25页 |
2.2 酶液中蛋白质含量测定 | 第25页 |
2.3 酶活力测定 | 第25页 |
2.4 各种糖的测定方法 | 第25-26页 |
2.5 β-呋喃果糖苷酶产生菌株的筛选和发酵条件的优化 | 第26-27页 |
2.5.1 米曲霉和节杆菌产酶条件的确定 | 第26页 |
2.5.2 黑曲霉产酶条件的确定 | 第26-27页 |
2.6 β-呋喃果糖苷酶固定化研究 | 第27-29页 |
2.6.1 黑曲霉菌丝的制备 | 第28页 |
2.6.2 海藻酸钠溶液制备和固定化方法 | 第28页 |
2.6.3 实验设计 | 第28-29页 |
2.6.4 固定化菌丝的酶活力测定 | 第29页 |
2.6.5 半衰期的测定 | 第29页 |
2.6.6 固定化菌体生产FOS的方法 | 第29页 |
2.7 小型发酵罐30L生产FOS试验研究 | 第29-30页 |
2.7.1 菌丝的提取 | 第30页 |
2.7.2 固定化酶的制备 | 第30页 |
2.7.3 30L发酵罐生产菌体最优条件的确定 | 第30页 |
2.8 1000L发酵罐生产FOS的试验研究 | 第30-32页 |
2.8.1 黑曲霉的活化 | 第31页 |
2.8.2 中试产酶培养基的优化 | 第31页 |
2.8.3 三因素三水平正交实验确定培养基中固含物最佳配比 | 第31页 |
2.8.4 培养基固含量对产酶的影响 | 第31页 |
2.8.5 接种量对产酶的影响 | 第31页 |
2.8.6 通气量对产酶的影响 | 第31页 |
2.8.7 菌丝的提取 | 第31-32页 |
2.8.8 固定化酶的制备 | 第32页 |
2.8.9 酶活的测定和FOS的检测 | 第32页 |
2.8.10 1000L反应罐生产FOS试验 | 第32页 |
2.8.11 连续化生产FOS试验 | 第32页 |
2.9 FOS的检测 | 第32-34页 |
2.9.1 液相色谱法(HPLC)检测FOS | 第32-33页 |
2.9.2 气相色谱法(HPLC)检测FOS | 第33-34页 |
2.9.3 化学法检测FOS | 第34页 |
2.10 不同方法测定β-呋喃果糖苷酶的Km | 第34-37页 |
2.10.1 培养条件和酶提取 | 第34-35页 |
2.10.2 酶活测定 | 第35页 |
2.10.3 β-呋喃果糖苷酶的Km的测定 | 第35-37页 |
结果与讨论 | 第37-67页 |
1 标准蛋白与光密度的线性关系 | 第37页 |
2 各种菌株产酶特性结果 | 第37-40页 |
2.1 不同pH和培养时间黑曲霉产酶特性结果 | 第37-38页 |
2.2 不同pH和培养时间米曲霉产酶特性结果 | 第38页 |
2.3 不同pH和培养时间节杆菌产酶特性结果 | 第38-39页 |
2.4 不同来源酶生产FOS最适反应条件结果 | 第39-40页 |
2.4.1 米曲霉生产FOS正交试验结果 | 第39页 |
2.4.2 节杆菌生产FOS正交试验结果 | 第39-40页 |
3 黑曲霉的观察与产酶条件结果 | 第40-49页 |
3.1 外表观察 | 第40页 |
3.2 菌株分生孢子和菌体显微观察 | 第40页 |
3.3 菌株分生孢子和菌体显微观察 | 第40-41页 |
3.4 温度对菌株产酶性能影响结果 | 第41页 |
3.5 pH对菌株产酶性能影响结果 | 第41页 |
3.6 碳源对菌株产酶性能影响结果 | 第41-42页 |
3.7 氮源对菌株产酶性能影响结果 | 第42页 |
3.8 旋转正交实验确定最佳酶产率的培养基配方结果 | 第42-44页 |
3.9 各因素对产酶率的贡献率 | 第44-45页 |
3.10 因素分析 | 第45-49页 |
3.10.1 单因素分析 | 第45-47页 |
3.10.2 双因素分析 | 第47-49页 |
4 固定化前后酶活力变化比较 | 第49-52页 |
4.1 固定化后酶活力和反应24小时酶的剩余活力 | 第49页 |
4.2 海藻酸钠溶液浓度以及混合比例对固定化菌体酶活力的影响 | 第49-50页 |
4.3 半衰期的测定 | 第50页 |
4.4 固定化菌体生产FOS实验结果 | 第50-52页 |
5 30L发酵罐生产FOS实验研究 | 第52-54页 |
5.1 30L发酵罐菌丝生产实验过程中温度、pH、溶氧率、搅拌速率(rpm)指标的变化 | 第52页 |
5.2 通气量对产酶的影响 | 第52-53页 |
5.3 料液固含量对FOS含量的影响 | 第53-54页 |
5.4 不同加酶量对反应时间和FOS含量影响 | 第54页 |
6 1000L发酵罐生产FOS试验研究结果 | 第54-57页 |
6.1 中试产酶培养基调整后试验结果 | 第54页 |
6.2 中试产酶培养基优化后试验结果 | 第54-55页 |
6.3 培养基固含量对产酶影响 | 第55页 |
6.4 接种量对产酶影响 | 第55-56页 |
6.5 通气量对产酶影响 | 第56-57页 |
6.6 1000L发酵反应罐FOS中试生产试验结果 | 第57页 |
6.7 连续化生产FOS实验结果 | 第57页 |
7 FOS的检测 | 第57-64页 |
7.1 波相色谱法检测FOS实验结果 | 第57-59页 |
7.1.1 各种糖标样F值的HPLC法测定结果 | 第57页 |
7.1.2 FOS糖浆的检测结果 | 第57-58页 |
7.1.3 回收实验结果 | 第58-59页 |
7.1.4 精密度实验结果 | 第59页 |
7.1.5 讨论 | 第59页 |
7.2 气相色谱法检测FOS实验结果 | 第59-62页 |
7.2.1 标准糖样色谱图 | 第59-60页 |
7.2.2 各种糖的保留值及校正因子 | 第60页 |
7.2.3 数据处理 | 第60-61页 |
7.2.4 测定的精密度和回收率 | 第61-62页 |
7.2.5 讨论 | 第62页 |
7.3 化学法间接测定FOS | 第62-64页 |
7.3.1 不同培养时间各种糖组分变化结果 | 第62-63页 |
7.3.2 化学法确定反应终点和FOS含量的测定结果 | 第63页 |
7.3.3 讨论 | 第63-64页 |
8 不同方法测定β-呋喃果糖苷酶的Km的比较结果 | 第64-67页 |
8.1 不同底物浓度进行反应速度测定数据结果 | 第64-65页 |
8.2 不同方法测定β-呋喃果糖苷酶的Km结果与讨论 | 第65-67页 |
中试试验中关键设备的设计 | 第67-86页 |
1 中试车间平面布置规划、生产工艺设计及设备选型 | 第67-72页 |
1.1 主原料和辅助原料供应条件 | 第67页 |
1.2 中试车间平面布置规划 | 第67-69页 |
1.3 工艺流程设计 | 第69-71页 |
1.4 主要生产设备的选型和设备清单 | 第71-72页 |
2 菌体与海藻酸钠混合设备的设计与制造 | 第72-78页 |
2.1 结构及工作过程 | 第72页 |
2.2 主要部件设计及其校核 | 第72-77页 |
2.3 讨论 | 第77-78页 |
3 造粒机的设计与制造 | 第78-86页 |
3.1 结构及工作过程 | 第78页 |
3.2 主要部件设计及其校核 | 第78-86页 |
结论 | 第86-90页 |
参考文献 | 第90-95页 |
附录: FOS质量标准 | 第95-98页 |
致 谢 | 第98页 |