| 摘要 | 第1-4页 |
| ABSTRACT | 第4-7页 |
| 第一章 绪论 | 第7-13页 |
| ·研究背景 | 第7-10页 |
| ·骨质疏松症及其治疗现状 | 第7页 |
| ·甲状旁腺激素的结构与功能 | 第7-8页 |
| ·甲状旁腺激素对成骨细胞作用的研究进展 | 第8-9页 |
| ·甲状旁腺激素的药物化情况 | 第9-10页 |
| ·甲状旁腺激素临床应用中存在的问题和解决方法 | 第10-11页 |
| ·存在问题 | 第10-11页 |
| ·解决方法 | 第11页 |
| ·立题背景及研究内容 | 第11-13页 |
| 第二章 融合蛋白PTH-HSA 的制备及纯化 | 第13-31页 |
| ·材料 | 第13-14页 |
| ·菌株 | 第13页 |
| ·培养基 | 第13页 |
| ·材料与试剂 | 第13-14页 |
| ·主要仪器 | 第14页 |
| ·方法 | 第14-18页 |
| ·Pichia pastoris KM71/PTH-HSA 菌株的生长曲线测量 | 第14页 |
| ·正交试验优化表达条件 | 第14-15页 |
| ·PTH-HSA 融合蛋白发酵上清的制备 | 第15页 |
| ·发酵上清的两种预处理方法的比较 | 第15-16页 |
| ·纯化路线一 | 第16页 |
| ·纯化路线二 | 第16-17页 |
| ·纯化产物分析与鉴定 | 第17-18页 |
| ·结果 | 第18-29页 |
| ·Pichia pastoris KM71/PTH-HSA菌株的生长曲线 | 第18-19页 |
| ·正交实验优化表达条件结果 | 第19-20页 |
| ·PTH-HSA 融合蛋白发酵上清的制备 | 第20页 |
| ·发酵上清的两种预处理方法的比较 | 第20-21页 |
| ·纯化路线一 | 第21-23页 |
| ·纯化路线二 | 第23-29页 |
| ·纯化产物鉴定结果 | 第29页 |
| ·结论 | 第29页 |
| ·讨论 | 第29-31页 |
| 第三章 融合蛋白PTH-HSA 的活性评价 | 第31-39页 |
| ·材料 | 第32页 |
| ·实验动物 | 第32页 |
| ·主要试剂 | 第32页 |
| ·主要仪器 | 第32页 |
| ·方法 | 第32-34页 |
| ·成骨细胞分离与培养 | 第32页 |
| ·成骨细胞的鉴定 | 第32页 |
| ·PTH-HSA 对成骨细胞增殖的影响（MTT 法） | 第32-33页 |
| ·PTH-HSA 对成骨细胞碱性磷酸酶（ALP）活性的影响（PNPP 偶氮法） | 第33页 |
| ·PTH-HSA 对骨基质细胞/成骨细胞、C57/Black 小鼠骨髓基质细胞 RANKL 和 OPG 基因表达的影响 | 第33页 |
| ·UAMS32 骨基质细胞/成骨细胞与 C57/Black 小鼠骨髓悬浮细胞共培养实验观察PTH-HSA 的生物活性 | 第33-34页 |
| ·PTH-HSA 对骨细胞中 IGF-1(Insulin-like growth factor I) 基因表达的影响 | 第34页 |
| ·结果 | 第34-37页 |
| ·成骨细胞鉴定 | 第34页 |
| ·MTT 法和 PNPP 法测定成骨细胞活性结果 | 第34-35页 |
| ·PTH-HSA 对骨基质细胞成骨细胞,C57/Black 小鼠骨髓基质细胞 RANKL 和 OPG 基因表达的影响实验结果 | 第35-36页 |
| ·UAMS32 骨基质细胞/成骨细胞与 C57/Black 小鼠骨髓悬浮细胞共培养实验观察PTH-HSA 的生物活性实验结果 | 第36页 |
| ·PTH-HSA 对骨细胞中 IGF-1(Insulin-like growth factor I) 基因表达的影响实验结果 | 第36-37页 |
| ·结论 | 第37页 |
| ·讨论 | 第37-39页 |
| 小结 | 第39-40页 |
| 存在问题与展望 | 第40-41页 |
| 致谢 | 第41-42页 |
| 参考文献 | 第42-46页 |
| 附录：攻读硕士学位期间发表的文章 | 第46页 |
