致谢 | 第1-8页 |
摘要 | 第8-9页 |
1 文献综述 | 第9-19页 |
·小麦品质与小麦蛋白质的关系 | 第9-10页 |
·低分子量麦谷蛋白的分类 | 第10-12页 |
·低分子量麦谷蛋白的结构 | 第12-14页 |
·低分子量麦谷蛋白基因在染色体上的定位 | 第14-15页 |
·低分子量麦谷蛋白基因分子标记的开发 | 第15-16页 |
·低分子量麦谷蛋白基因进化分析 | 第16-17页 |
·立题依据及技术路线 | 第17-19页 |
·立题依据 | 第17-18页 |
·技术路线 | 第18-19页 |
2 小麦低分子量麦谷蛋白基因家族成员的克隆及分析 | 第19-27页 |
·材料 | 第19页 |
·方法 | 第19-23页 |
·利用保守引物对筛选的阳性克隆进行扩增 | 第19-23页 |
·BAC 克隆质粒DNA 的提取(碱裂解法) | 第19-20页 |
·扩增低分子量麦谷蛋白基因编码区域所用的引物 | 第20页 |
·PCR 反应体系 | 第20-21页 |
·PCR 反应程序 | 第21页 |
·扩增片段的回收 | 第21页 |
·目标片段的连接与转化 | 第21-22页 |
·菌的培养 | 第22页 |
·质粒的提取 | 第22页 |
·扩增片段重组子的测序 | 第22-23页 |
·结果与分析 | 第23-25页 |
·携带低分子量麦谷蛋白基因BAC 克隆的鉴定 | 第23-24页 |
·低分子量麦谷蛋白基因序列的获得 | 第24-25页 |
·低分子量麦谷蛋白基因序列的比较与分析 | 第25页 |
·讨论 | 第25-27页 |
3 不同类型低分子量麦谷蛋白基因特异标记的开发 | 第27-34页 |
·材料 | 第27页 |
·方法 | 第27-28页 |
·植物基因组DNA 的提取 | 第27-28页 |
·低分子量麦谷蛋白基因特异引物的设计 | 第28页 |
·引物特异性的验证 | 第28页 |
·结果与分析 | 第28-33页 |
·低分子量麦谷蛋白基因特异引物的设计 | 第28-29页 |
·引物特异性的验证 | 第29-33页 |
·讨论 | 第33-34页 |
4 代表性BAC 克隆的测序与分析 | 第34-46页 |
·材料 | 第34页 |
·方法 | 第34-41页 |
·BAC 亚克隆文库的构建 | 第34-39页 |
·BAC DNA 的提取 | 第34-35页 |
·BAC DNA 的切割 | 第35页 |
·Mung Bean 绿豆核酸外切酶处理切割后的BAC DNA | 第35-36页 |
·外切酶酶切产物纯化 | 第36页 |
·虾碱性磷酸酶脱磷处理 | 第36页 |
·PCR 方法加尾 | 第36-37页 |
·片段选择 | 第37页 |
·DNA 的纯化 | 第37页 |
·连接反应 | 第37-38页 |
·连接产物的转化 | 第38页 |
·亚克隆单克隆的制备及保存 | 第38-39页 |
·BAC 亚克隆测序 | 第39页 |
·亚克隆质粒DNA 的制备 | 第39页 |
·亚克隆测序PCR 反应 | 第39页 |
·BAC 全序列的拼接 | 第39-40页 |
·BAC 全序列分析 | 第40-41页 |
·结果与分析 | 第41-44页 |
·BAC 全序列长度的确定 | 第41页 |
·BAC 全序列的组装及初步分析 | 第41-43页 |
·Glu-3 位点的进化分析 | 第43-44页 |
·讨论 | 第44-46页 |
5 全文小结 | 第46-47页 |
参考文献 | 第47-53页 |
附录: 主要试剂配方 | 第53-57页 |
ABSTRACT | 第57-58页 |