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四倍体小麦低分子量麦谷蛋白基因家族的研究

致谢第1-8页
摘要第8-9页
1 文献综述第9-19页
   ·小麦品质与小麦蛋白质的关系第9-10页
   ·低分子量麦谷蛋白的分类第10-12页
   ·低分子量麦谷蛋白的结构第12-14页
   ·低分子量麦谷蛋白基因在染色体上的定位第14-15页
   ·低分子量麦谷蛋白基因分子标记的开发第15-16页
   ·低分子量麦谷蛋白基因进化分析第16-17页
   ·立题依据及技术路线第17-19页
     ·立题依据第17-18页
     ·技术路线第18-19页
2 小麦低分子量麦谷蛋白基因家族成员的克隆及分析第19-27页
   ·材料第19页
   ·方法第19-23页
     ·利用保守引物对筛选的阳性克隆进行扩增第19-23页
       ·BAC 克隆质粒DNA 的提取(碱裂解法)第19-20页
       ·扩增低分子量麦谷蛋白基因编码区域所用的引物第20页
       ·PCR 反应体系第20-21页
       ·PCR 反应程序第21页
       ·扩增片段的回收第21页
       ·目标片段的连接与转化第21-22页
       ·菌的培养第22页
       ·质粒的提取第22页
       ·扩增片段重组子的测序第22-23页
   ·结果与分析第23-25页
     ·携带低分子量麦谷蛋白基因BAC 克隆的鉴定第23-24页
     ·低分子量麦谷蛋白基因序列的获得第24-25页
     ·低分子量麦谷蛋白基因序列的比较与分析第25页
   ·讨论第25-27页
3 不同类型低分子量麦谷蛋白基因特异标记的开发第27-34页
   ·材料第27页
   ·方法第27-28页
     ·植物基因组DNA 的提取第27-28页
     ·低分子量麦谷蛋白基因特异引物的设计第28页
     ·引物特异性的验证第28页
   ·结果与分析第28-33页
     ·低分子量麦谷蛋白基因特异引物的设计第28-29页
     ·引物特异性的验证第29-33页
   ·讨论第33-34页
4 代表性BAC 克隆的测序与分析第34-46页
   ·材料第34页
   ·方法第34-41页
     ·BAC 亚克隆文库的构建第34-39页
       ·BAC DNA 的提取第34-35页
       ·BAC DNA 的切割第35页
       ·Mung Bean 绿豆核酸外切酶处理切割后的BAC DNA第35-36页
       ·外切酶酶切产物纯化第36页
       ·虾碱性磷酸酶脱磷处理第36页
       ·PCR 方法加尾第36-37页
       ·片段选择第37页
       ·DNA 的纯化第37页
       ·连接反应第37-38页
       ·连接产物的转化第38页
       ·亚克隆单克隆的制备及保存第38-39页
     ·BAC 亚克隆测序第39页
       ·亚克隆质粒DNA 的制备第39页
       ·亚克隆测序PCR 反应第39页
     ·BAC 全序列的拼接第39-40页
     ·BAC 全序列分析第40-41页
   ·结果与分析第41-44页
     ·BAC 全序列长度的确定第41页
     ·BAC 全序列的组装及初步分析第41-43页
     ·Glu-3 位点的进化分析第43-44页
   ·讨论第44-46页
5 全文小结第46-47页
参考文献第47-53页
附录: 主要试剂配方第53-57页
ABSTRACT第57-58页

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