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华南三地红树林土壤微生物区系及PGPR多样性研究

摘要第1-6页
Abstract第6-11页
1 前言第11-23页
   ·红树林生态作用及其分布第11页
   ·红树林土壤微生物区系第11-12页
   ·PGPR机理研究第12-15页
     ·PGPR促进植物生长的机制第12-13页
     ·PGPR的生防机制第13-15页
   ·红树林PGPR的研究状况第15-16页
   ·研究微生物生物多样性的意义第16-17页
   ·关于研究微生物多样性的技术支持以及研究状况第17-22页
     ·保守基因的序列测定第18-19页
     ·16S rDNA PCR-RFLP技术第19页
     ·随机扩增的多态性DNA技术(RAPD)第19-20页
     ·扩增片段多态性(AFLP)第20页
     ·变性梯度凝胶电泳(DGGE)第20-21页
     ·Biolog鉴定系统第21-22页
   ·本研究的目的意义第22-23页
2 材料与方法第23-34页
   ·样地概况第23页
   ·采样方法第23-24页
   ·土壤样品的理化分析方法第24页
   ·土壤样品微生物数量测定第24-25页
   ·微生物数量与土壤理化因子相关性统计分析第25-26页
   ·溶磷菌的筛选分离第26页
   ·固氮菌的筛选分离第26页
   ·PGPR单菌落的挑选及菌种保藏第26-27页
   ·PGPR 16S rDNA基因扩增第27-29页
     ·溶液、缓冲液和试剂第27页
     ·基因组DNA的提取第27-28页
     ·16S rDNA引物的设计第28页
     ·PCR扩增第28-29页
   ·PGPR 16S rDNA-RFLP第29页
   ·RFLP酶切图谱数据分析与处理第29页
   ·16S rDNA PCR扩增产物纯化及克隆第29-31页
     ·DNA片段回收第29-30页
     ·感受态细胞E.coli DH5a的制备第30页
     ·DNA连接与转化第30页
     ·快速碱裂解法提取质粒第30-31页
     ·质粒酶切第31页
     ·DNA序列测定第31页
   ·nifH基因的扩增、克隆及测序第31-33页
     ·PCR扩增第32页
     ·DNA测序第32-33页
   ·各代表菌株的溶磷能力测定第33-34页
     ·溶磷菌溶磷能力的定性测定第33页
     ·溶磷菌溶磷能力的定量测定第33-34页
3 结果与分析第34-56页
   ·土壤微生物的数量第34页
   ·红树林土壤理化性质和养分含量第34-35页
   ·红树林微生物数量与土壤主要理化因子之间的关系第35-36页
   ·红树林土壤微生物数量与主要理化因子之间的多元回归分析第36-37页
   ·PGPR的筛选与鉴定第37-53页
     ·红树林根际PGPR的分布状况及菌落特征第37-39页
     ·16S rDNA PCR产物的酶切图谱第39-42页
     ·RFLP聚类结果第42-43页
     ·nifH基因的扩增第43-45页
     ·16S rDNA序列测定第45-53页
   ·溶磷能力的测定第53-56页
     ·溶磷菌溶磷能力的定性测定第53-54页
     ·溶磷菌溶磷能力的定量测定第54-56页
4 讨论与结论第56-60页
5 对进一步研究的建议第60-61页
致谢第61-62页
参考文献第62-69页
附录第69-71页

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