| 摘要 | 第1-4页 |
| Abstract | 第4-10页 |
| 第一章 绪论 | 第10-23页 |
| ·引言 | 第10页 |
| ·干扰素-Γ的研究进展 | 第10-22页 |
| ·干扰素-γ的产生和结构特点 | 第11-12页 |
| ·干扰素-γ的生物学特性及作用机制 | 第12-17页 |
| ·干扰素-γ的测定 | 第17-19页 |
| ·IFN-γ受体及其介导的信号传递 | 第19-20页 |
| ·干扰素-γ的应用 | 第20-22页 |
| ·研究内容和方法 | 第22-23页 |
| 第二章 猪干扰素-Γ的表达和纯化 | 第23-40页 |
| ·实验材料 | 第23-26页 |
| ·实验菌种和载体 | 第23页 |
| ·酶和试剂 | 第23-24页 |
| ·培养基 | 第24页 |
| ·溶液 | 第24-25页 |
| ·仪器与设备 | 第25-26页 |
| ·实验方法 | 第26-34页 |
| ·目的片段的扩增与回收 | 第26-27页 |
| ·目的片段和载体的酶切与回收 | 第27-28页 |
| ·目的片段与载体的连接 | 第28页 |
| ·感受态细胞的制备 | 第28页 |
| ·连接产物的转化 | 第28-29页 |
| ·重组质粒的提取与鉴定 | 第29-30页 |
| ·重组菌的诱导表达、最佳表达条件的优化及SDS-PAGE 电泳分析 | 第30-31页 |
| ·rpIFN-γ高效表达产物的纯化 | 第31-33页 |
| ·纯化表达产物的检测 | 第33-34页 |
| ·结果 | 第34-39页 |
| ·原核表达载体的构建及鉴定 | 第34页 |
| ·rpIFN-γ诱导表达条件的优化 | 第34-36页 |
| ·纯化表达产物的检测 | 第36-39页 |
| ·分析与讨论 | 第39-40页 |
| 第三章 重组猪干扰素-Γ的抗病毒活性分析 | 第40-46页 |
| ·实验材料 | 第40-41页 |
| ·实验细胞和病毒 | 第40页 |
| ·试剂 | 第40页 |
| ·溶液 | 第40-41页 |
| ·仪器与设备 | 第41页 |
| ·实验方法 | 第41-43页 |
| ·PK15 细胞的培养 | 第41-42页 |
| ·病毒毒价测定 | 第42页 |
| ·重组pIFN-γ抗病毒活性分析 | 第42-43页 |
| ·结果 | 第43-45页 |
| ·PRV 和标准O 型FMDV 毒价测定 | 第43页 |
| ·rpIFN-γ抗病毒活性测定 | 第43-45页 |
| ·分析与讨论 | 第45-46页 |
| 第四章 重组猪干扰素-Γ体外抗弓形虫作用研究 | 第46-53页 |
| ·材料 | 第47页 |
| ·试剂 | 第47页 |
| ·虫株、细胞和实验动物 | 第47页 |
| ·溶液 | 第47页 |
| ·仪器与设备（与第三章3.1.4 相同） | 第47页 |
| ·方法 | 第47-49页 |
| ·细胞培养 | 第47-48页 |
| ·弓形虫悬液制备 | 第48页 |
| ·培养细胞弓形虫攻虫剂量的测定 | 第48-49页 |
| ·重组猪IFN-γ诱导培养细胞抗弓形虫试验 | 第49页 |
| ·结果 | 第49-51页 |
| ·弓形虫致培养细胞病变观察 | 第49-50页 |
| ·弓形虫攻虫剂量的确定 | 第50页 |
| ·重组猪IFN-γ诱导细胞抗弓形虫结果 | 第50-51页 |
| ·分析与讨论 | 第51-53页 |
| 第五章 重组猪干扰素-Γ诱导的细胞凋亡 | 第53-59页 |
| ·实验材料 | 第53-54页 |
| ·实验细胞 | 第53页 |
| ·试剂 | 第53页 |
| ·溶液 | 第53-54页 |
| ·仪器与设备（与第三章3.1.4 相同） | 第54页 |
| ·实验方法 | 第54-55页 |
| ·PK15 细胞培养：（与第三章3.2.1 相同） | 第54页 |
| ·抗PK15 细胞增殖试验 | 第54页 |
| ·猪干扰素-γ诱导和收集PK15 细胞 | 第54页 |
| ·DNA 提取与电泳分析 | 第54-55页 |
| ·Hoechest 染色检测PK15 细胞凋亡 | 第55页 |
| ·结果 | 第55-57页 |
| ·rpIFN-γ对PK15 细胞增殖抑制试验 | 第55-56页 |
| ·细胞形态的改变 | 第56页 |
| ·DNA 电泳分析 | 第56-57页 |
| ·Hoechest 染色检测PK15 细胞凋亡 | 第57页 |
| ·分析与讨论 | 第57-59页 |
| 第六章 结论 | 第59-60页 |
| 参考文献(REFERENCES) | 第60-65页 |
| 附录 1: 表达载体 PET-30A(﹢)质粒图谱 | 第65-66页 |
| 附录 2: 重组质粒 PET-30A-PIFN-Γ 测序图谱 | 第66-67页 |
| 致谢 | 第67-68页 |
| 作者简介 | 第68页 |
