符号说明 | 第1-12页 |
中文摘要 | 第12-14页 |
英文摘要 | 第14-17页 |
1 引言 | 第17-33页 |
·光合作用的光抑制 | 第17-22页 |
·光抑制的原理 | 第17-18页 |
·光抑制、光破坏的防御 | 第18-22页 |
·减少光吸收、增加光能利用能力 | 第18页 |
·状态转换 | 第18-19页 |
·增加热耗散 | 第19-21页 |
·光呼吸 | 第21页 |
·Mehler 反应 | 第21-22页 |
·高等植物体内的叶黄素循环 | 第22-23页 |
·叶黄素循环的主要功能 | 第23-26页 |
·热耗散 | 第24-25页 |
·防止膜脂过氧化 | 第25页 |
·稳定类囊体膜结构 | 第25页 |
·对蓝光的响应 | 第25页 |
·参与ABA 合成途径 | 第25-26页 |
·叶黄素循环能量耗散的分子机理 | 第26-28页 |
·紫黄质脱环氧化酶 | 第28-31页 |
·分子特性 | 第28-29页 |
·紫黄质脱环氧化酶的调节 | 第29-31页 |
·pH 值 | 第29-30页 |
·抗坏血酸(AsA) | 第30页 |
·DTT | 第30页 |
·温度 | 第30-31页 |
·UV-B | 第31页 |
·膜脂 | 第31页 |
·玉米黄质环氧化酶(ZE) | 第31-32页 |
·研究的目的、意义 | 第32-33页 |
2 材料与方法 | 第33-52页 |
·试验材料与处理 | 第33-34页 |
·植物材料 | 第33页 |
·材料处理 | 第33页 |
·菌株与质粒 | 第33页 |
·酶及生化试剂 | 第33页 |
·PCR 引物 | 第33-34页 |
·试验方法 | 第34-52页 |
·利用TRIZOL 试剂盒提取RNA | 第34-35页 |
·RNA 反转录 | 第35-36页 |
·小麦紫黄质脱环氧化酶基因和玉米黄质环氧化酶基因中间片段的克隆 | 第36-37页 |
·电泳目的基因片段的回收 | 第37页 |
·克隆载体的构建 | 第37-40页 |
·大肠杆菌感受态细胞的制备 | 第37-38页 |
·连接 | 第38页 |
·转化及克隆筛选 | 第38-39页 |
·碱法小量提取质粒DNA | 第39-40页 |
·质粒DNA 的酶切鉴定 | 第40页 |
·序列测定 | 第40页 |
·表达载体的构建 | 第40-42页 |
·碱法大量提取质粒DNA | 第40-42页 |
·载体构建 | 第42页 |
·根癌农杆菌LBA4404 感受态细胞的制备及转化 | 第42-44页 |
·农杆菌感受态细胞的制备 | 第42-43页 |
·冻融法转化农杆菌 | 第43-44页 |
·农杆菌介导转化烟草 | 第44-45页 |
·转基因烟草的PCR 检测 | 第45-46页 |
·CTAB 法提取基因组DNA | 第45页 |
·转基因植株的PCR 筛选 | 第45-46页 |
·Northern 杂交 | 第46-48页 |
·RNA 提取及电泳 | 第46页 |
·转膜及烘膜 | 第46-47页 |
·探针合成 | 第47页 |
·预杂交、杂交及放射自显影 | 第47-48页 |
·生理指标的测定 | 第48-52页 |
·光合参数的测定 | 第48页 |
·荧光参数的测定 | 第48-49页 |
·过氧化氢(H_2O_2)含量的测定 | 第49页 |
·放氧活性的测定 | 第49页 |
·叶片膜脂成分测定 | 第49-52页 |
3 结果与分析 | 第52-74页 |
·小麦VDE 与ZE 基因的克隆 | 第52-53页 |
·小麦VDE 和ZE 基因的表达特性分析 | 第53-55页 |
·强光和低温弱光处理不同时间下WVDE 的表达特性 | 第53-54页 |
·强光和低温弱光处理不同时间下WZE 的表达特性 | 第54-55页 |
·WVDE 和WZE 转化烟草 | 第55-60页 |
·反义表达载体的构建 | 第55-56页 |
·表达载体的检测 | 第56-58页 |
·表达载体的PCR 检测 | 第56-57页 |
·表达载体的酶切检测 | 第57-58页 |
·烟草的组培体系 | 第58页 |
·转基因植株的鉴定 | 第58-60页 |
·强光和低温弱光胁迫下转反义 WVDE 基因烟草光合和叶绿素荧光参数的变化 | 第60-64页 |
·转反义WVDE 基因烟草叶片净光合速率的变化 | 第60-61页 |
·转反义WVDE 基因烟草Fv/Fm 的变化 | 第61-62页 |
·转反义WVDE 基因烟草 NPQ 的变化 | 第62页 |
·转反义WVDE 基因烟草叶片过氧化氢含量的变化 | 第62-63页 |
·转反义WVDE 基因烟草放氧速率的变化 | 第63-64页 |
·强光和低温弱光胁迫下转反义 WZE 基因烟草光合和叶绿素荧光参数的变化 | 第64-68页 |
·转反义WZE 基因烟草叶片净光合速率的变化 | 第64-65页 |
·转反义WZE 基因烟草Fv/Fm 的变化 | 第65-66页 |
·转反义WZE 基因烟草 NPQ 的变化 | 第66页 |
·转反义WZE 基因烟草叶片过氧化氢含量的变化 | 第66-67页 |
·转反义WZE 基因烟草放氧速率的变化 | 第67-68页 |
·叶黄素循环在烟草叶片中的表达与叶龄的关系 | 第68-74页 |
·强光胁迫下转WVDE 基因烟草和野生型植株不同叶龄叶片VDE 的表达水平 | 第68-69页 |
·强光胁迫下转基因烟草和野生型烟草幼叶与功能叶光合速率(Pn) 的变化 | 第69-70页 |
·强光胁迫下转基因烟草和野生型烟草YL 与ML Fv | 第70-71页 |
·强光胁迫下野生型和转基因烟草YL 与ML φPSⅡ的变化 | 第71页 |
·强光胁迫下转基因烟草和野生型烟草YL 与ML NPQ 的变化 | 第71-72页 |
·WT 烟草叶片类囊体膜脂肪酸组成情况 | 第72-74页 |
4 讨论 | 第74-79页 |
·小麦叶黄素循环关键酶基因的表达特性 | 第74页 |
·转WVDE 反义基因加重烟草的光抑制 | 第74-76页 |
·光保护作用对玉米黄质(Z)的消耗存在速率问题 | 第76-77页 |
·叶黄素循环在烟草叶片当中的表达状况与叶龄有关 | 第77-79页 |
5 主要结论 | 第79-80页 |
参考文献 | 第80-88页 |
致谢 | 第88页 |