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小鼠FcγRIII线性配体结合表位的鉴定

摘要第1-6页
Abstract第6-11页
第一章 绪论第11-22页
   ·Fc 受体的分类和命名第11-12页
   ·IgG Fc 受体的生物学特性第12-14页
   ·FcγR 的信号转导第14页
   ·FcγR 的免疫学功能研究进展第14-19页
   ·FcγR 的立体结构第19-20页
   ·Fc 受体与自身免疫病第20-21页
   ·FcγR 药物靶标研究第21页
   ·本研究的目的和意义第21-22页
第二章 小鼠 FcγRIII 胞外区重组蛋白的表达与鉴定第22-33页
   ·材料第22-24页
     ·菌株、质粒、酶第22页
     ·试剂配制第22-24页
     ·主要试剂盒与仪器第24页
   ·方法第24-29页
     ·小鼠外周血白细胞分离第24页
     ·小鼠外周血白细胞总RNA 提取第24页
     ·moFcγRIII 基因的克隆第24-25页
     ·HRP 标记小鼠IgG第25-26页
     ·大肠杆菌JM109 感受态的制备第26页
     ·重组质粒的转化第26页
     ·原核表达质粒 pET mRIII 的构建第26-27页
     ·蛋白表达第27-28页
     ·包涵体纯化与复性第28-29页
   ·结果第29-31页
     ·moFcγRIII 基因的扩增第29页
     ·moFcγRIII 原核表达质粒的构建第29页
     ·重组 moFcγRIII 蛋白的诱导表达第29-30页
     ·重组 moFcγRIII 蛋白可溶性分析、复性及纯化第30-31页
     ·ELISA 检测复性蛋白的活性第31页
   ·讨论第31-33页
     ·moFcγRIII 重组蛋白的表达与复性第31-32页
     ·moFcγRIII 同源建模第32-33页
第三章 稳定表达小鼠 FcγRIII 共转染细胞株的建立第33-47页
   ·材料第33-35页
     ·菌株、质粒及主要试剂第33页
     ·细胞第33页
     ·试剂制备第33-35页
   ·方法第35-41页
     ·真核表达质粒pc3mRIII 的构建第35-36页
     ·真核表达质粒pc3mγ的构建第36-37页
     ·FITC 标记小鼠IgG第37页
     ·饲养细胞的制备第37页
     ·抗鸡红细胞(RBC)IgG 的制备第37-38页
     ·细胞转染第38-39页
     ·共转染稳定表达细胞系的建立第39-40页
     ·小鼠FcγRIII 在COS-7 细胞表面的表达及其与配体的结合第40-41页
     ·共转染稳定表达细胞株的鉴定第41页
   ·结果第41-45页
     ·真核表达质粒pc3mRIII 的构建第41-42页
     ·真核表达质粒pc3mγ的构建第42页
     ·抗鸡RBC 小鼠IgG 的制备第42-43页
     ·小鼠FcγRIII 在COS-7 细胞表面的表达及其与配体的结合第43-44页
     ·共转染稳定表达细胞株的鉴定第44-45页
   ·讨论第45-47页
第四章 小鼠 FcγRIII 线性配体结合表位鉴定第47-55页
   ·小鼠 FcγRIII 多肽的合成与偶联第47-48页
     ·moFcγRIII 多肽设计第47-48页
     ·moFcγRIII 多肽的偶联第48页
   ·moFcγRIII 阳性肽的筛选第48-49页
     ·Dot-blot第48-49页
     ·竞争ELISA第49页
     ·玫瑰花环抑制试验第49页
   ·结果第49-52页
     ·小鼠FcγRIII EC2 区多肽的合成与偶联第49-50页
     ·Dot-blot 检测多肽与小鼠IgG 特异结合第50页
     ·线性配体结合表位多肽对IgG-可溶性受体结合的抑制第50页
     ·线性配体结合表位多肽对IgG-细胞表面受体结合的抑制第50-52页
   ·讨论第52-55页
     ·多肽的设计合成与检测第52-53页
     ·moFcγRIII 线性配体结合表位的鉴定第53页
     ·配体结合表位多肽的抑制功效第53-55页
第五章 全文结论第55-56页
参考文献第56-61页
致谢第61-62页
作者简历第62-63页

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