摘要 | 第1-6页 |
Abstract | 第6-11页 |
第一章 绪论 | 第11-22页 |
·Fc 受体的分类和命名 | 第11-12页 |
·IgG Fc 受体的生物学特性 | 第12-14页 |
·FcγR 的信号转导 | 第14页 |
·FcγR 的免疫学功能研究进展 | 第14-19页 |
·FcγR 的立体结构 | 第19-20页 |
·Fc 受体与自身免疫病 | 第20-21页 |
·FcγR 药物靶标研究 | 第21页 |
·本研究的目的和意义 | 第21-22页 |
第二章 小鼠 FcγRIII 胞外区重组蛋白的表达与鉴定 | 第22-33页 |
·材料 | 第22-24页 |
·菌株、质粒、酶 | 第22页 |
·试剂配制 | 第22-24页 |
·主要试剂盒与仪器 | 第24页 |
·方法 | 第24-29页 |
·小鼠外周血白细胞分离 | 第24页 |
·小鼠外周血白细胞总RNA 提取 | 第24页 |
·moFcγRIII 基因的克隆 | 第24-25页 |
·HRP 标记小鼠IgG | 第25-26页 |
·大肠杆菌JM109 感受态的制备 | 第26页 |
·重组质粒的转化 | 第26页 |
·原核表达质粒 pET mRIII 的构建 | 第26-27页 |
·蛋白表达 | 第27-28页 |
·包涵体纯化与复性 | 第28-29页 |
·结果 | 第29-31页 |
·moFcγRIII 基因的扩增 | 第29页 |
·moFcγRIII 原核表达质粒的构建 | 第29页 |
·重组 moFcγRIII 蛋白的诱导表达 | 第29-30页 |
·重组 moFcγRIII 蛋白可溶性分析、复性及纯化 | 第30-31页 |
·ELISA 检测复性蛋白的活性 | 第31页 |
·讨论 | 第31-33页 |
·moFcγRIII 重组蛋白的表达与复性 | 第31-32页 |
·moFcγRIII 同源建模 | 第32-33页 |
第三章 稳定表达小鼠 FcγRIII 共转染细胞株的建立 | 第33-47页 |
·材料 | 第33-35页 |
·菌株、质粒及主要试剂 | 第33页 |
·细胞 | 第33页 |
·试剂制备 | 第33-35页 |
·方法 | 第35-41页 |
·真核表达质粒pc3mRIII 的构建 | 第35-36页 |
·真核表达质粒pc3mγ的构建 | 第36-37页 |
·FITC 标记小鼠IgG | 第37页 |
·饲养细胞的制备 | 第37页 |
·抗鸡红细胞(RBC)IgG 的制备 | 第37-38页 |
·细胞转染 | 第38-39页 |
·共转染稳定表达细胞系的建立 | 第39-40页 |
·小鼠FcγRIII 在COS-7 细胞表面的表达及其与配体的结合 | 第40-41页 |
·共转染稳定表达细胞株的鉴定 | 第41页 |
·结果 | 第41-45页 |
·真核表达质粒pc3mRIII 的构建 | 第41-42页 |
·真核表达质粒pc3mγ的构建 | 第42页 |
·抗鸡RBC 小鼠IgG 的制备 | 第42-43页 |
·小鼠FcγRIII 在COS-7 细胞表面的表达及其与配体的结合 | 第43-44页 |
·共转染稳定表达细胞株的鉴定 | 第44-45页 |
·讨论 | 第45-47页 |
第四章 小鼠 FcγRIII 线性配体结合表位鉴定 | 第47-55页 |
·小鼠 FcγRIII 多肽的合成与偶联 | 第47-48页 |
·moFcγRIII 多肽设计 | 第47-48页 |
·moFcγRIII 多肽的偶联 | 第48页 |
·moFcγRIII 阳性肽的筛选 | 第48-49页 |
·Dot-blot | 第48-49页 |
·竞争ELISA | 第49页 |
·玫瑰花环抑制试验 | 第49页 |
·结果 | 第49-52页 |
·小鼠FcγRIII EC2 区多肽的合成与偶联 | 第49-50页 |
·Dot-blot 检测多肽与小鼠IgG 特异结合 | 第50页 |
·线性配体结合表位多肽对IgG-可溶性受体结合的抑制 | 第50页 |
·线性配体结合表位多肽对IgG-细胞表面受体结合的抑制 | 第50-52页 |
·讨论 | 第52-55页 |
·多肽的设计合成与检测 | 第52-53页 |
·moFcγRIII 线性配体结合表位的鉴定 | 第53页 |
·配体结合表位多肽的抑制功效 | 第53-55页 |
第五章 全文结论 | 第55-56页 |
参考文献 | 第56-61页 |
致谢 | 第61-62页 |
作者简历 | 第62-63页 |