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口蹄疫O型灭活疫苗新制苗毒株的筛选

摘要第1-6页
Summary第6-11页
第一章 引言第11-24页
   ·口蹄疫灭活疫苗研究进展第11-17页
     ·FMD 灭活疫苗的历史背景第11-12页
     ·疫苗毒株的筛选第12-13页
     ·病毒生产第13页
     ·灭活第13-14页
     ·抗原浓缩纯化第14页
     ·乳化、配苗第14-15页
     ·灭活疫苗的质量控制第15-16页
       ·生产控制第15页
       ·中间检验第15-16页
       ·终产品控制第16页
     ·FMD 疫苗/抗原库及病毒毒株库研究现状第16-17页
     ·FMD 灭活疫苗的作用第17页
   ·口蹄疫诊断技术第17-21页
     ·病原鉴定第17-19页
     ·血清学检测第19-20页
     ·FMD 新诊断技术第20页
     ·免疫动物和自然感染动物的区分第20-21页
   ·VP1 的研究进展第21-23页
     ·VP1 的特性第21-22页
     ·VP1 基因在基因分型中的作用第22-23页
   ·研究目的、内容与意义第23-24页
第二章 口蹄疫流行毒株的选择、鉴定及生物学特性第24-32页
   ·试验材料第24-25页
     ·病料第24-25页
     ·试验动物第25页
     ·主要试剂第25页
     ·主要器材第25页
   ·试验方法第25-28页
     ·病毒复壮第25-26页
     ·LD_(50)测定第26页
     ·病毒定型第26-27页
     ·适应BHK-21 细胞第27-28页
       ·乳鼠毒处理第27页
       ·细胞制备第27页
       ·细胞毒传代第27-28页
     ·TCID_(50)测定第28页
   ·结果与分析第28-30页
     ·各毒株致乳鼠发病情况比较第28-29页
     ·各毒株LD_(50)的测定第29页
     ·病毒定型第29-30页
     ·各病毒株对细胞的适应情况比较第30页
     ·各毒株细胞毒TCID_(50)测定结果第30页
   ·讨论第30-32页
第三章 VP1 基因序列的测定及比较第32-43页
   ·材料第32-33页
     ·病毒第32页
     ·主要试剂第32-33页
     ·实验所用溶液及其配制第33页
     ·主要仪器第33页
   ·试验方法第33-38页
     ·引物的设计与合成第33-34页
     ·病毒RNA 的提取第34页
     ·反转录合成cDNA第34-35页
     ·PCR 扩增目的基因第35页
     ·PCR 产物的回收与纯化第35-36页
     ·目的基因的克隆第36页
       ·目的DNA 片段与pMD20-T 载体连接第36页
       ·连接产物的转化第36页
     ·重组质粒的提取与鉴定第36-37页
       ·阳性菌落的挑选第36-37页
       ·阳性克隆菌落质粒提取第37页
       ·重组质粒鉴定第37页
     ·目的基因核苷酸序列的测定第37页
     ·核苷酸序列及其编码的氨基酸序列的比较和系统进化树的绘制第37-38页
   ·结果与分析第38-41页
     ·RT-PCR 结果第38页
     ·酶切质粒鉴定阳性菌落第38-39页
     ·VP1 基因序列的测定第39页
     ·VP1 基因核苷酸序列及其推导氨基酸序列比较第39-40页
     ·VP1 基因核苷酸序列及其推导氨基酸序列的系统进化关系分析第40-41页
   ·讨论第41-43页
第四章 免疫学特性的比较研究第43-48页
   ·试验材料第43页
     ·病毒第43页
     ·实验动物第43页
     ·试剂第43页
   ·试验方法第43-46页
     ·疫苗的制备第43-44页
     ·免疫豚鼠第44页
     ·抗体的监测第44-45页
       ·采血第44页
       ·血清的分离第44页
       ·血清中和效价的测定第44-45页
     ·抗原相关性的测定第45页
     ·攻毒试验第45-46页
   ·结果与分析第46-47页
     ·豚鼠对各毒株的免疫应答第46页
     ·各毒株与O/GSLT/06 之间的抗原相关性第46页
     ·攻毒试验保护结果第46-47页
   ·讨论第47-48页
第五章 研究结论第48-49页
参考文献第49-54页
附录第54-59页
 附录1 各种溶液的配制第54-56页
 附录2 五株毒株的核苷酸序列比对结果第56-58页
 附录3 五株毒株的氨基酸序列比对结果第58-59页
致谢第59-60页
作者简历第60页

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