摘要 | 第1-6页 |
Summary | 第6-11页 |
第一章 引言 | 第11-24页 |
·口蹄疫灭活疫苗研究进展 | 第11-17页 |
·FMD 灭活疫苗的历史背景 | 第11-12页 |
·疫苗毒株的筛选 | 第12-13页 |
·病毒生产 | 第13页 |
·灭活 | 第13-14页 |
·抗原浓缩纯化 | 第14页 |
·乳化、配苗 | 第14-15页 |
·灭活疫苗的质量控制 | 第15-16页 |
·生产控制 | 第15页 |
·中间检验 | 第15-16页 |
·终产品控制 | 第16页 |
·FMD 疫苗/抗原库及病毒毒株库研究现状 | 第16-17页 |
·FMD 灭活疫苗的作用 | 第17页 |
·口蹄疫诊断技术 | 第17-21页 |
·病原鉴定 | 第17-19页 |
·血清学检测 | 第19-20页 |
·FMD 新诊断技术 | 第20页 |
·免疫动物和自然感染动物的区分 | 第20-21页 |
·VP1 的研究进展 | 第21-23页 |
·VP1 的特性 | 第21-22页 |
·VP1 基因在基因分型中的作用 | 第22-23页 |
·研究目的、内容与意义 | 第23-24页 |
第二章 口蹄疫流行毒株的选择、鉴定及生物学特性 | 第24-32页 |
·试验材料 | 第24-25页 |
·病料 | 第24-25页 |
·试验动物 | 第25页 |
·主要试剂 | 第25页 |
·主要器材 | 第25页 |
·试验方法 | 第25-28页 |
·病毒复壮 | 第25-26页 |
·LD_(50)测定 | 第26页 |
·病毒定型 | 第26-27页 |
·适应BHK-21 细胞 | 第27-28页 |
·乳鼠毒处理 | 第27页 |
·细胞制备 | 第27页 |
·细胞毒传代 | 第27-28页 |
·TCID_(50)测定 | 第28页 |
·结果与分析 | 第28-30页 |
·各毒株致乳鼠发病情况比较 | 第28-29页 |
·各毒株LD_(50)的测定 | 第29页 |
·病毒定型 | 第29-30页 |
·各病毒株对细胞的适应情况比较 | 第30页 |
·各毒株细胞毒TCID_(50)测定结果 | 第30页 |
·讨论 | 第30-32页 |
第三章 VP1 基因序列的测定及比较 | 第32-43页 |
·材料 | 第32-33页 |
·病毒 | 第32页 |
·主要试剂 | 第32-33页 |
·实验所用溶液及其配制 | 第33页 |
·主要仪器 | 第33页 |
·试验方法 | 第33-38页 |
·引物的设计与合成 | 第33-34页 |
·病毒RNA 的提取 | 第34页 |
·反转录合成cDNA | 第34-35页 |
·PCR 扩增目的基因 | 第35页 |
·PCR 产物的回收与纯化 | 第35-36页 |
·目的基因的克隆 | 第36页 |
·目的DNA 片段与pMD20-T 载体连接 | 第36页 |
·连接产物的转化 | 第36页 |
·重组质粒的提取与鉴定 | 第36-37页 |
·阳性菌落的挑选 | 第36-37页 |
·阳性克隆菌落质粒提取 | 第37页 |
·重组质粒鉴定 | 第37页 |
·目的基因核苷酸序列的测定 | 第37页 |
·核苷酸序列及其编码的氨基酸序列的比较和系统进化树的绘制 | 第37-38页 |
·结果与分析 | 第38-41页 |
·RT-PCR 结果 | 第38页 |
·酶切质粒鉴定阳性菌落 | 第38-39页 |
·VP1 基因序列的测定 | 第39页 |
·VP1 基因核苷酸序列及其推导氨基酸序列比较 | 第39-40页 |
·VP1 基因核苷酸序列及其推导氨基酸序列的系统进化关系分析 | 第40-41页 |
·讨论 | 第41-43页 |
第四章 免疫学特性的比较研究 | 第43-48页 |
·试验材料 | 第43页 |
·病毒 | 第43页 |
·实验动物 | 第43页 |
·试剂 | 第43页 |
·试验方法 | 第43-46页 |
·疫苗的制备 | 第43-44页 |
·免疫豚鼠 | 第44页 |
·抗体的监测 | 第44-45页 |
·采血 | 第44页 |
·血清的分离 | 第44页 |
·血清中和效价的测定 | 第44-45页 |
·抗原相关性的测定 | 第45页 |
·攻毒试验 | 第45-46页 |
·结果与分析 | 第46-47页 |
·豚鼠对各毒株的免疫应答 | 第46页 |
·各毒株与O/GSLT/06 之间的抗原相关性 | 第46页 |
·攻毒试验保护结果 | 第46-47页 |
·讨论 | 第47-48页 |
第五章 研究结论 | 第48-49页 |
参考文献 | 第49-54页 |
附录 | 第54-59页 |
附录1 各种溶液的配制 | 第54-56页 |
附录2 五株毒株的核苷酸序列比对结果 | 第56-58页 |
附录3 五株毒株的氨基酸序列比对结果 | 第58-59页 |
致谢 | 第59-60页 |
作者简历 | 第60页 |