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稻瘟病菌假定Rpn2蛋白的生物信息学分析及基因敲除研究

摘要第1-6页
Abstract第6-11页
1 引言第11-19页
   ·稻瘟病与稻瘟病菌第11-12页
     ·稻瘟病的流行和危害第11页
     ·稻瘟病菌及其侵染循环第11-12页
   ·蛋白糖基化第12-16页
     ·蛋白糖基化的类型第12-14页
     ·糖基磷脂酰肌醇锚区(Glycosylphosphatidyl inositol-achored)第14页
     ·N-连接糖基化过程第14-15页
     ·糖基化的生物学作用第15-16页
   ·寡糖转移酶及核糖体结合蛋白Ⅱ第16-17页
     ·寡糖转移酶的定义第16页
     ·寡糖转移酶的组成第16-17页
     ·核糖体结合蛋白Ⅱ第17页
   ·本研究的主要意义第17-19页
2 材料与方法第19-31页
   ·材料第19-20页
     ·供试菌株第19页
     ·供试质粒第19页
     ·供试植物第19页
     ·培养基第19-20页
     ·生化试剂第20页
   ·方法第20-31页
     ·生物信息学分析第20-21页
     ·稻瘟病菌基因组DNA 的提取第21-22页
     ·DNA 琼脂糖凝胶电泳第22页
     ·常规PCR 扩增目的片段第22-23页
     ·E.coli DH5α感受态细胞的制备第23-24页
     ·感受态细胞的转化第24页
     ·质粒DNA 的提取第24-25页
     ·质粒酶切与连接第25页
     ·稻瘟病菌原生质体的制备第25-26页
     ·稻瘟病菌原生质体转化和转化子的验证第26-27页
     ·稻瘟病菌菌丝体、孢子、芽管以及附着胞获得第27页
     ·总RNA 的提取与分析第27-28页
     ·稻瘟病菌突变体的表型观察第28-31页
3 结果与分析第31-45页
   ·稻瘟病菌中寡糖转移酶基因第31页
   ·核糖体结合蛋白Ⅱ的生物信息学分析第31-38页
     ·MgRpn2 的功能域分析第31-33页
     ·MgRpn2 蛋白质理化特性第33页
     ·MgRpn2 分泌特性及细胞定位预测第33-36页
     ·MgRpn2 基序分析第36页
     ·MgRpn2 的系统进化关系分析第36-38页
   ·同源重组获得 MgRpn2 敲除突变体第38-40页
     ·MgRpn2 基因敲除载体的构建第38-39页
     ·MgRpn2 基因敲除突变体的筛选与PCR 验证第39-40页
   ·MgRpn2 基因敲除突变体表型分析第40-45页
     ·孢子萌发率及附着胞形成率分析第40-42页
     ·洋葱表皮侵入分析第42-43页
     ·接种大麦和水稻叶片致病性分析第43-45页
4 讨论与结论第45-47页
   ·生物信息分析MGG_03687.6 编码的蛋白为稻瘟病菌假定核糖体结合蛋白Ⅱ第45页
   ·MgRpn2 基因敲除对稻瘟病菌致病性的作用第45-47页
5 进一步研究目标第47-48页
参考文献第48-53页
致谢第53页

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