| 摘要 | 第1-9页 |
| ABSTRACT | 第9-11页 |
| 第一章 文献综述 | 第11-24页 |
| 1 稻瘟菌中分泌蛋白的研究 | 第11-13页 |
| ·稻瘟菌的生活史 | 第11-12页 |
| ·信号肽与分泌蛋白 | 第12-13页 |
| ·稻瘟病菌数据库与分泌蛋白预测 | 第13页 |
| 2. 丝氨酸蛋白酶研究进展 | 第13-18页 |
| ·丝氨酸蛋白酶的命名和分布 | 第14-15页 |
| ·丝氨酸蛋白酶的鉴定及结构 | 第15页 |
| ·丝氨酸蛋白酶的水解反应 | 第15-16页 |
| ·病原真菌中丝氨酸蛋白酶研究进展 | 第16-18页 |
| ·丝氨酸蛋白酶在烟曲霉致病过程中的作用 | 第16-17页 |
| ·丝氨酸蛋白酶在球孢白僵菌中的分布与作用 | 第17页 |
| ·丝氨酸蛋白酶在稻瘟菌中作用 | 第17-18页 |
| 3 RNAi 的原理及其在基因功能研究中应用 | 第18-24页 |
| ·RNAi 的发现与研究历史 | 第19-20页 |
| ·RNAi 的分子机制 | 第20-22页 |
| ·参与RNAi 的酶 | 第20页 |
| ·RNAi 的作用机制 | 第20-22页 |
| ·RNAi 的特点及技术应用 | 第22-24页 |
| ·RNAi 的特点 | 第22页 |
| ·RNAi 在不同生物中的研究应用情况 | 第22-24页 |
| 第二章 稻瘟病菌丝氨酸蛋白酶 MGSP2 (MGG_02863.6) 的功能分析 | 第24-54页 |
| 1 材料与方法 | 第24-37页 |
| ·实验材料 | 第24-25页 |
| ·供试菌株 | 第24页 |
| ·供试载体 | 第24页 |
| ·植物材料 | 第24页 |
| ·培养基 | 第24-25页 |
| ·生化试剂 | 第25页 |
| ·试验方法 | 第25-37页 |
| ·稻瘟病菌基因组DNA 的提取 | 第25-26页 |
| ·DNA 琼脂糖电泳 | 第26-27页 |
| ·片段的PCR 扩增 | 第27-29页 |
| ·克隆载体转化 | 第29-31页 |
| ·MGG_02863.5 基因敲除载体的构建 | 第31-32页 |
| ·MGG_02863.5 基因过表达载体的构建 | 第32-33页 |
| ·稻瘟病菌原生质体的制备 | 第33页 |
| ·稻瘟病菌原生质体转化和转化子的验证 | 第33-34页 |
| ·稻瘟病菌的表型观察 | 第34-37页 |
| 2 结果与分析 | 第37-52页 |
| ·MGG_02863.6 生物信息学分析 | 第37-39页 |
| ·MGG_02863.6(sp2)突变体的功能研究 | 第39-45页 |
| ·MGG_02863.6 敲除载体的构建 | 第39-41页 |
| ·MGG_02863.6 敲除转化子的筛选与鉴定 | 第41-42页 |
| ·MGG_02863.6 敲除突变体的表型分析 | 第42-45页 |
| ·MGSP2 过量表达突变体的功能研究 | 第45-48页 |
| ·MGSP2 过量表达突变体的获得 | 第45-46页 |
| ·MGSP2 过表达突变体表型分析 | 第46-48页 |
| ·MGSP2 对细胞完整性影响 | 第48-50页 |
| ·MGSP2 基因突变后对渗透压敏感性影响 | 第50-52页 |
| 3 讨论 | 第52-54页 |
| ·Sp2 基因的功能存在冗余性 | 第52页 |
| ·Sp2 基因可能是细胞完整性正调控因子 | 第52-54页 |
| 第三章 用RNAi 技术研究稻瘟病菌丝氨酸蛋白酶基因的功能 | 第54-66页 |
| 1 材料与方法 | 第54-57页 |
| ·实验材料 | 第54页 |
| ·菌株与质粒 | 第54页 |
| ·试剂与仪器 | 第54页 |
| ·实验方法 | 第54-57页 |
| ·稻瘟病菌总RNA 的提取 | 第54-55页 |
| ·RT-PCR | 第55-56页 |
| ·RNAi 载体构建 | 第56-57页 |
| ·稻瘟菌转化及表型分析 | 第57页 |
| 2 结果与分析 | 第57-64页 |
| ·RNA 浓度与纯度检测 | 第57-58页 |
| ·RNAi 目的片段的分析 | 第58-59页 |
| ·RNAi 载体的构建与检验 | 第59-60页 |
| ·RNAi 转化子的获得 | 第60-61页 |
| ·RNAi 转化子的表型分析 | 第61-64页 |
| ·RNAi 转化子营养生长分析 | 第61-62页 |
| ·转化子产孢量测定 | 第62页 |
| ·孢子萌发率、附着胞形成率 | 第62-63页 |
| ·致病性分析 | 第63-64页 |
| 3 讨论 | 第64-66页 |
| ·RNAi 技术稻瘟菌基因功能组学中应用 | 第64-65页 |
| ·部分丝氨酸蛋白酶在稻瘟菌中的功能 | 第65-66页 |
| 参考文献 | 第66-69页 |
| 致谢 | 第69页 |
