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嗜热酰基肽释放酶ST0779的克隆、表达及性质测定

内容提要第1-7页
第一章 前言第7-21页
   ·古细菌简介第7-9页
   ·嗜热古细菌及嗜热酶第9-12页
     ·热酶耐热机制第10-11页
     ·嗜热酶应用第11-12页
   ·脯氨酰寡肽酶家族(Prolyl Oligopeptidase family)第12-16页
     ·脯氨酰寡肽酶家族简介第12-13页
     ·脯氨酰寡肽酶家族的结构特征第13-15页
     ·酰基肽释放酶简介第15-16页
   ·酯酶简介第16-17页
   ·嗜热菌Sulfolobus Tokodaii第17-19页
   ·本论文研究背景与设计思想第19-21页
第二章 序列比对和预测第21-26页
   ·引言第21页
   ·结果和讨论第21-25页
     ·蛋白分子量和等电点第21-22页
     ·表面区域及亲水性分析第22页
     ·同源性比较第22-24页
     ·同源模建(Homologous Modelling)第24-25页
   ·小结第25-26页
第三章 基因克隆第26-35页
   ·引言第26页
   ·实验材料与方法第26-31页
     ·实验材料第26-28页
     ·实验方法第28-31页
   ·结果与讨论第31-34页
     ·古细菌的培养第31页
     ·ST0779 基因的PCR 扩增第31-32页
     ·重组质粒的构建第32-33页
     ·重组质粒的转化及鉴定第33-34页
   ·小结第34-35页
第四章 酶的优化表达与纯化第35-46页
   ·引言第35-36页
   ·实验材料与方法第36-40页
     ·实验材料第36-37页
     ·实验方法第37-40页
   ·结果与讨论第40-45页
     ·目的蛋白的优化表达第40页
     ·宿主菌株的优化表达第40-42页
     ·IPTG 诱导浓度的优化表达第42页
     ·诱导时间的优化表达第42-43页
     ·酶的纯化及收率第43-45页
   ·小结第45-46页
第五章 ST0779 的基本酶学性质第46-56页
   ·引言第46页
   ·实验材料与方法第46-49页
     ·实验材料第46-47页
     ·实验方法第47-49页
   ·实验结果与讨论第49-54页
     ·温度对酶活的影响第49页
     ·pH 对酶活的影响第49-50页
     ·底物特异性第50-52页
     ·金属离子及表面活性剂对酶活力的影响第52页
     ·酶的热稳定性研究第52-53页
     ·酶的pH 稳定性研究第53-54页
     ·酶反应动力学常数的测定第54页
   ·小结第54-56页
参考文献第56-65页
致谢第65-66页
中文摘要第66-69页
Abstract第69-71页

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