内容提要 | 第1-7页 |
第一章 前言 | 第7-21页 |
·古细菌简介 | 第7-9页 |
·嗜热古细菌及嗜热酶 | 第9-12页 |
·热酶耐热机制 | 第10-11页 |
·嗜热酶应用 | 第11-12页 |
·脯氨酰寡肽酶家族(Prolyl Oligopeptidase family) | 第12-16页 |
·脯氨酰寡肽酶家族简介 | 第12-13页 |
·脯氨酰寡肽酶家族的结构特征 | 第13-15页 |
·酰基肽释放酶简介 | 第15-16页 |
·酯酶简介 | 第16-17页 |
·嗜热菌Sulfolobus Tokodaii | 第17-19页 |
·本论文研究背景与设计思想 | 第19-21页 |
第二章 序列比对和预测 | 第21-26页 |
·引言 | 第21页 |
·结果和讨论 | 第21-25页 |
·蛋白分子量和等电点 | 第21-22页 |
·表面区域及亲水性分析 | 第22页 |
·同源性比较 | 第22-24页 |
·同源模建(Homologous Modelling) | 第24-25页 |
·小结 | 第25-26页 |
第三章 基因克隆 | 第26-35页 |
·引言 | 第26页 |
·实验材料与方法 | 第26-31页 |
·实验材料 | 第26-28页 |
·实验方法 | 第28-31页 |
·结果与讨论 | 第31-34页 |
·古细菌的培养 | 第31页 |
·ST0779 基因的PCR 扩增 | 第31-32页 |
·重组质粒的构建 | 第32-33页 |
·重组质粒的转化及鉴定 | 第33-34页 |
·小结 | 第34-35页 |
第四章 酶的优化表达与纯化 | 第35-46页 |
·引言 | 第35-36页 |
·实验材料与方法 | 第36-40页 |
·实验材料 | 第36-37页 |
·实验方法 | 第37-40页 |
·结果与讨论 | 第40-45页 |
·目的蛋白的优化表达 | 第40页 |
·宿主菌株的优化表达 | 第40-42页 |
·IPTG 诱导浓度的优化表达 | 第42页 |
·诱导时间的优化表达 | 第42-43页 |
·酶的纯化及收率 | 第43-45页 |
·小结 | 第45-46页 |
第五章 ST0779 的基本酶学性质 | 第46-56页 |
·引言 | 第46页 |
·实验材料与方法 | 第46-49页 |
·实验材料 | 第46-47页 |
·实验方法 | 第47-49页 |
·实验结果与讨论 | 第49-54页 |
·温度对酶活的影响 | 第49页 |
·pH 对酶活的影响 | 第49-50页 |
·底物特异性 | 第50-52页 |
·金属离子及表面活性剂对酶活力的影响 | 第52页 |
·酶的热稳定性研究 | 第52-53页 |
·酶的pH 稳定性研究 | 第53-54页 |
·酶反应动力学常数的测定 | 第54页 |
·小结 | 第54-56页 |
参考文献 | 第56-65页 |
致谢 | 第65-66页 |
中文摘要 | 第66-69页 |
Abstract | 第69-71页 |