| 摘要 | 第1-8页 |
| ABSTRACT | 第8-14页 |
| 第一章 前言 | 第14-61页 |
| ·口蹄疫病毒简介 | 第14-29页 |
| ·FMDV基因组RNA 5’-UTR | 第15-19页 |
| ·FMDV基因组的蛋白帽结构 | 第15-16页 |
| ·S片段、Poly(C)区段、假结(PKs)和复制顺式作用元件结构 | 第16-17页 |
| ·内部核糖体进入位点(IRES) | 第17-19页 |
| ·L蛋白(Leader protein) | 第19页 |
| ·结构蛋白区 | 第19-20页 |
| ·非结构蛋白 | 第20-22页 |
| ·2A/B/C蛋白 | 第20-21页 |
| ·3A/B蛋白 | 第21页 |
| ·3C~(pro)蛋白 | 第21页 |
| ·3D~(pro)蛋白 | 第21-22页 |
| ·FMDV基因组RNA 3’-UTR | 第22页 |
| ·FMDV逃避宿主免疫系统的研究 | 第22-29页 |
| ·L~(pro)病毒相关因子,能够阻断宿主免疫反应 | 第22-24页 |
| ·3C~(pro)对转录机制的影响 | 第24页 |
| ·FMDV能够逃逸树突状细胞的保护反应 | 第24-25页 |
| ·FMDV影响蛋白分泌途径和MHC class Ⅰ的递呈 | 第25-26页 |
| ·FMDV感染导致淋巴细胞减少症 | 第26-27页 |
| ·FMDV感染期间的细胞死亡 | 第27-29页 |
| ·α-干扰素的简介和研究进展 | 第29-44页 |
| ·干扰素的发现及分类 | 第29页 |
| ·干扰素的基因 | 第29-30页 |
| ·干扰素的产生 | 第30-31页 |
| ·干扰素的生物学活性及作用 | 第31-36页 |
| ·干扰素的抗病毒活性 | 第32-33页 |
| ·抗细胞增殖活性 | 第33-34页 |
| ·干扰素的免疫调节活性 | 第34-35页 |
| ·干扰素的抗肿瘤作用 | 第35-36页 |
| ·干扰素的其他作用 | 第36页 |
| ·干扰素的作用特点 | 第36页 |
| ·干扰素的作用机理 | 第36-42页 |
| ·干扰素的信号传递途径 | 第36-38页 |
| ·干扰素信号的调节 | 第38-40页 |
| ·干扰素的抗病毒机理 | 第40-42页 |
| ·PKR系统的抗病毒原理 | 第41页 |
| ·OAS系统的抗病毒原理 | 第41-42页 |
| ·Mx系统的抗病毒原理 | 第42页 |
| ·干扰素的临床应用 | 第42-44页 |
| ·RNAi及其在抗病毒中的应用 | 第44-60页 |
| ·RNAi的发现 | 第44-46页 |
| ·RNAi的作用机理 | 第46-48页 |
| ·dsRNA的产生 | 第46页 |
| ·dsRNA的切割 | 第46-47页 |
| ·RISC的形成 | 第47-48页 |
| ·mRNA的降解 | 第48页 |
| ·RNAi的作用特点 | 第48-49页 |
| ·RNAi的生理意义 | 第49-50页 |
| ·调控细胞的分化与发育 | 第49页 |
| ·RNA水平上的反馈调节 | 第49-50页 |
| ·抗病毒作用 | 第50页 |
| ·RNAi的设计和应用 | 第50-56页 |
| ·RNAi的设计 | 第50-52页 |
| ·RNAi目标序列的选择 | 第50-51页 |
| ·siRNA的获得 | 第51-52页 |
| ·体外制备 | 第51-52页 |
| ·体内表达 | 第52页 |
| ·RNAi的应用 | 第52-56页 |
| ·RNAi在基因功能探索中的应用 | 第52-53页 |
| ·RNAi在基因治疗方面的应用 | 第53-55页 |
| ·RANi在抗病毒方面的的应用 | 第55-56页 |
| ·microRNA (miRNA) | 第56-58页 |
| ·RNAi研究进展 | 第58-60页 |
| ·本研究的目的和意义 | 第60-61页 |
| 第二章 猪α-干扰素基因的克隆及抗病毒活性的初步研究 | 第61-81页 |
| ·引言 | 第61页 |
| ·材料和方法 | 第61-73页 |
| ·材料 | 第61-62页 |
| ·方法 | 第62-73页 |
| ·病毒的扩增、保存及滴度的测定 | 第62-63页 |
| ·α-干扰素基因的克隆 | 第63-69页 |
| ·α-干扰素在PK细胞中的表达 | 第69-72页 |
| ·α-干扰素抗病毒活性的初步鉴定 | 第72-73页 |
| ·结果 | 第73-79页 |
| ·FMDV的扩增及滴度的测定 | 第73-74页 |
| ·α-干扰素基因的PCR扩增 | 第74-75页 |
| ·重组质粒的鉴定 | 第75-76页 |
| ·α-干扰素在PK细胞中表达 | 第76-78页 |
| ·α-干扰素基因在PK细胞中表达产生的抗病毒活性 | 第78-79页 |
| ·讨论 | 第79-81页 |
| 第三章 在IRES调控下猪α-干扰素表达及其抗病毒作用的研究 | 第81-102页 |
| ·引言 | 第81页 |
| ·材料和方法 | 第81-90页 |
| ·材料 | 第81-83页 |
| ·方法 | 第83-90页 |
| ·α-干扰素基因序列连接到pcDNA3.1(+) | 第83页 |
| ·IRES的克隆和突变体获得 | 第83-86页 |
| ·重组质粒在PK细胞中的表达及鉴定 | 第86-87页 |
| ·α-干扰素在IRES的作用下抗病毒效果的测定 | 第87-88页 |
| ·ELISA检测 | 第88-90页 |
| ·结果 | 第90-100页 |
| ·α-干扰素基因连接到载体pcDNA3.1(+) | 第90页 |
| ·FMDV IRES基因的RT-PCR扩增 | 第90-91页 |
| ·FMDV IRES及突变产物连入pc-IFN | 第91-92页 |
| ·重组质粒转染细胞及在细胞中的表达 | 第92-94页 |
| ·外源α-干扰素抗病毒活性的鉴定 | 第94-100页 |
| ·讨论 | 第100-102页 |
| 第四章 miRNA抑制FMDV基因组RNA的复制 | 第102-111页 |
| ·引言 | 第102页 |
| ·材料和方法 | 第102-106页 |
| ·材料 | 第102-103页 |
| ·方法 | 第103-106页 |
| ·miRNA表达质粒的构建 | 第103-105页 |
| ·稳定表达miRNA细胞系的筛选 | 第105-106页 |
| ·结果 | 第106-109页 |
| ·miRNA表达质粒p3D-1250的构建 | 第106-107页 |
| ·p3D-1250转染BHK-21细胞后稳定表达细胞系的初步筛选 | 第107-108页 |
| ·p3D-1250转染BHK-21细胞后抗病毒效果的鉴定 | 第108-109页 |
| ·讨论 | 第109-111页 |
| 研究总结 | 第111-112页 |
| 参考文献 | 第112-132页 |
| 在读期间发表的论文 | 第132-133页 |
| 致谢 | 第133页 |
