摘要 | 第1-5页 |
ABSTRACT | 第5-15页 |
第一章 绪论 | 第15-39页 |
·脊髓的损伤与修复 | 第15-21页 |
·脊髓损伤的生理及病理特征 | 第15-16页 |
·脊髓损伤后再生的困难 | 第16-17页 |
·脊髓损伤治疗的基本策略 | 第17-21页 |
·星形胶质细胞的去分化研究 | 第21-29页 |
·星形胶质细胞的反应性 | 第21-25页 |
·星形胶质细胞的去分化 | 第25-26页 |
·星形胶质细胞去分化的机理 | 第26-29页 |
·运动神经元的定向分化 | 第29-39页 |
·转录因子调控 | 第29-32页 |
·诱导信号分子 | 第32-36页 |
·运动神经元体外定向诱导分化 | 第36-39页 |
第二章 实验材料及方法 | 第39-54页 |
·实验材料和仪器 | 第39-42页 |
·主要的试剂,溶液成分及配制 | 第39-40页 |
·实验动物和抗体 | 第40-41页 |
·实验仪器 | 第41-42页 |
·质粒和引物序列 | 第42页 |
·实验方法 | 第42-54页 |
·原代星形胶质细胞的选择培养 | 第42-44页 |
·神经球的培养和传代 | 第44-45页 |
·神经球的分化和性质鉴定 | 第45页 |
·运动神经元的定向诱导 | 第45-46页 |
·流式细胞分析(Flow Cytometry) | 第46页 |
·免疫细胞和组织染色分析 | 第46-47页 |
·蛋白免疫印迹实验(Western blot) | 第47-48页 |
·RT-PCR 分析诱导分化的神经祖细胞转录因子的表达 | 第48-51页 |
·Nestin-eGFP 质粒提取和星形胶质细胞转染 | 第51-52页 |
·Time-lapse 追踪星形胶质细胞去分化的转变 | 第52-53页 |
·运动神经元电生理检测 | 第53页 |
·数据统计与分析 | 第53-54页 |
第三章 实验结果 | 第54-77页 |
·在体外培养条件下星形胶质细胞可以去分化成神经干细胞 | 第54-68页 |
·原代培养的星形胶质细胞的形态观察 | 第54-55页 |
·在体外培养条件下星形胶质细胞去分化表达Nestin | 第55-57页 |
·Nestin 表达细胞的性质鉴定 | 第57-59页 |
·EGF 对原代培养的星形胶质细胞的作用 | 第59-61页 |
·原代培养细胞是否存在干细胞的鉴定 | 第61-63页 |
·荧光追踪细胞的形态学和Nestin 表达的变化 | 第63-65页 |
·神经球的形成 | 第65-66页 |
·神经干细胞的性质鉴定 | 第66-68页 |
·起源于星形胶质细胞的神经干细胞可以高效的分化出运动神经元的祖细胞运动神经元 | 第68-77页 |
·高效诱导神经干细胞成运动神经元祖细胞 | 第68-69页 |
·参与运动神经元定向分化的转录因子的表达 | 第69-71页 |
·运动神经元定向诱导及鉴定 | 第71-74页 |
·运动神经元电生理功能的鉴定 | 第74-77页 |
第四章 讨论 | 第77-83页 |
·星形胶质细胞去分化 | 第77-79页 |
·星形胶质细胞去分化来源的神经干细胞的特征 | 第79-80页 |
·星形胶质细胞去分化来源的神经干细胞分化成运动神经元 | 第80-83页 |
第五章 总结与展望 | 第83-84页 |
参考文献 | 第84-98页 |
致谢 | 第98-100页 |
攻读博士期间发表的学术论文 | 第100-101页 |
附录 | 第101-104页 |