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禽波氏杆菌OMP单克隆抗体的制备及其生物学特性研究

中文摘要第1-12页
Abstract第12-15页
引言第15-38页
 1 禽波氏杆菌病的研究现状第15-24页
   ·病原学第15-16页
   ·流行病学第16-17页
   ·临诊症状和病理变化第17-18页
   ·感染过程地发病机理第18-19页
   ·致病性第19-21页
   ·与禽波氏杆菌致病性相关的基因第21-22页
   ·诊断第22-23页
   ·防制第23-24页
   ·经济意义及公共卫生意义第24页
 2 细菌外膜蛋白的研究现状第24-32页
   ·OMP 的生理功能第25-27页
   ·OMP 的免疫原性第27-29页
   ·OMP 的致病作用第29-31页
   ·OMP 与血清型第31-32页
 3 单克隆抗体技术第32-36页
   ·单克隆抗体的原理第32-34页
   ·单克隆抗体的制备流程第34页
   ·单克隆抗体的应用第34-36页
 4 本研究的内容、目的及意义第36-38页
试验一 禽波氏杆菌 OMP 间接 ELISA 检测方法的建立第38-51页
 1 材料与方法第39-44页
   ·材料第39-40页
     ·试验菌株第39页
     ·实验动物第39页
     ·试验仪器第39页
     ·主要试剂及配制第39-40页
   ·方法第40-44页
     ·禽波氏杆菌OMP 的提取和纯化第40-41页
     ·动物免疫第41-42页
     ·免疫 Balb/c 小鼠血清的采集和制备第42页
     ·间接ELISA 方法操作步骤第42-43页
     ·间接ELISA 最佳反应条件的选择第43-44页
 2 结果第44-48页
   ·禽波氏杆菌OMP SDS-PAGE 电泳及含量第44-45页
   ·禽波氏杆菌OMP 主蛋白带的分离纯化第45页
   ·间接ELISA 方法最佳反应条件的建立第45-48页
 3 小结与讨论第48-51页
试验二 禽波氏杆菌 OMP 杂交瘤细胞株的建立及单克隆抗体的制备第51-65页
 1 材料与方法第51-58页
   ·材料第51-53页
     ·试验动物和细胞第51-52页
     ·试验仪器第52页
     ·主要试剂第52页
     ·试剂配制第52-53页
   ·方法第53-58页
     ·Balb/c 小鼠的免疫第53页
     ·骨髓瘤细胞的复苏、培养和处理第53-54页
     ·饲养层细胞的准备第54页
     ·脾细胞的准备第54-55页
     ·细胞融合第55-56页
     ·观察细胞的生长情况第56页
     ·杂交瘤细胞的筛选第56页
     ·阳性杂交瘤细胞的克隆化第56-57页
     ·杂交瘤细胞的冻存与复苏第57页
     ·单克隆抗体的制备第57-58页
     ·单抗腹水的纯化第58页
 2 结果第58-61页
   ·免疫小鼠血清效价的测定第58-59页
   ·骨髓瘤细胞的制备第59页
   ·饲养层细胞的制备第59-60页
   ·细胞融合第60页
   ·杂交瘤细胞的筛选第60-61页
 3 小结与讨论第61-65页
试验三 禽波氏杆菌 OMP 单克隆抗体生物学特性研究第65-70页
 1 材料与方法第65-67页
   ·材料第65-66页
     ·主要仪器设备第65-66页
     ·主要试剂第66页
   ·方法第66-67页
     ·单克隆抗体杂交瘤上清和腹水单抗效价的测定第66页
     ·单克隆抗体Ig 亚类鉴定第66页
     ·Western-blot 检测单克隆抗体的特异性第66-67页
     ·杂交瘤细胞分泌抗体的稳定性研究第67页
 2 结果第67-69页
   ·单克隆抗体杂交瘤上清和腹水单抗效价的测定第67页
   ·单克隆抗体 Ig 亚类鉴定第67-68页
   ·Western-blot 检测结果第68页
   ·杂交瘤细胞株的稳定性分析结果第68-69页
 3 小结与讨论第69-70页
结论第70-71页
参考文献第71-82页
致谢第82-83页
攻读硕士学位期间发表的论文第83-84页
个人简介第84页

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