中文摘要 | 第1-12页 |
Abstract | 第12-15页 |
引言 | 第15-38页 |
1 禽波氏杆菌病的研究现状 | 第15-24页 |
·病原学 | 第15-16页 |
·流行病学 | 第16-17页 |
·临诊症状和病理变化 | 第17-18页 |
·感染过程地发病机理 | 第18-19页 |
·致病性 | 第19-21页 |
·与禽波氏杆菌致病性相关的基因 | 第21-22页 |
·诊断 | 第22-23页 |
·防制 | 第23-24页 |
·经济意义及公共卫生意义 | 第24页 |
2 细菌外膜蛋白的研究现状 | 第24-32页 |
·OMP 的生理功能 | 第25-27页 |
·OMP 的免疫原性 | 第27-29页 |
·OMP 的致病作用 | 第29-31页 |
·OMP 与血清型 | 第31-32页 |
3 单克隆抗体技术 | 第32-36页 |
·单克隆抗体的原理 | 第32-34页 |
·单克隆抗体的制备流程 | 第34页 |
·单克隆抗体的应用 | 第34-36页 |
4 本研究的内容、目的及意义 | 第36-38页 |
试验一 禽波氏杆菌 OMP 间接 ELISA 检测方法的建立 | 第38-51页 |
1 材料与方法 | 第39-44页 |
·材料 | 第39-40页 |
·试验菌株 | 第39页 |
·实验动物 | 第39页 |
·试验仪器 | 第39页 |
·主要试剂及配制 | 第39-40页 |
·方法 | 第40-44页 |
·禽波氏杆菌OMP 的提取和纯化 | 第40-41页 |
·动物免疫 | 第41-42页 |
·免疫 Balb/c 小鼠血清的采集和制备 | 第42页 |
·间接ELISA 方法操作步骤 | 第42-43页 |
·间接ELISA 最佳反应条件的选择 | 第43-44页 |
2 结果 | 第44-48页 |
·禽波氏杆菌OMP SDS-PAGE 电泳及含量 | 第44-45页 |
·禽波氏杆菌OMP 主蛋白带的分离纯化 | 第45页 |
·间接ELISA 方法最佳反应条件的建立 | 第45-48页 |
3 小结与讨论 | 第48-51页 |
试验二 禽波氏杆菌 OMP 杂交瘤细胞株的建立及单克隆抗体的制备 | 第51-65页 |
1 材料与方法 | 第51-58页 |
·材料 | 第51-53页 |
·试验动物和细胞 | 第51-52页 |
·试验仪器 | 第52页 |
·主要试剂 | 第52页 |
·试剂配制 | 第52-53页 |
·方法 | 第53-58页 |
·Balb/c 小鼠的免疫 | 第53页 |
·骨髓瘤细胞的复苏、培养和处理 | 第53-54页 |
·饲养层细胞的准备 | 第54页 |
·脾细胞的准备 | 第54-55页 |
·细胞融合 | 第55-56页 |
·观察细胞的生长情况 | 第56页 |
·杂交瘤细胞的筛选 | 第56页 |
·阳性杂交瘤细胞的克隆化 | 第56-57页 |
·杂交瘤细胞的冻存与复苏 | 第57页 |
·单克隆抗体的制备 | 第57-58页 |
·单抗腹水的纯化 | 第58页 |
2 结果 | 第58-61页 |
·免疫小鼠血清效价的测定 | 第58-59页 |
·骨髓瘤细胞的制备 | 第59页 |
·饲养层细胞的制备 | 第59-60页 |
·细胞融合 | 第60页 |
·杂交瘤细胞的筛选 | 第60-61页 |
3 小结与讨论 | 第61-65页 |
试验三 禽波氏杆菌 OMP 单克隆抗体生物学特性研究 | 第65-70页 |
1 材料与方法 | 第65-67页 |
·材料 | 第65-66页 |
·主要仪器设备 | 第65-66页 |
·主要试剂 | 第66页 |
·方法 | 第66-67页 |
·单克隆抗体杂交瘤上清和腹水单抗效价的测定 | 第66页 |
·单克隆抗体Ig 亚类鉴定 | 第66页 |
·Western-blot 检测单克隆抗体的特异性 | 第66-67页 |
·杂交瘤细胞分泌抗体的稳定性研究 | 第67页 |
2 结果 | 第67-69页 |
·单克隆抗体杂交瘤上清和腹水单抗效价的测定 | 第67页 |
·单克隆抗体 Ig 亚类鉴定 | 第67-68页 |
·Western-blot 检测结果 | 第68页 |
·杂交瘤细胞株的稳定性分析结果 | 第68-69页 |
3 小结与讨论 | 第69-70页 |
结论 | 第70-71页 |
参考文献 | 第71-82页 |
致谢 | 第82-83页 |
攻读硕士学位期间发表的论文 | 第83-84页 |
个人简介 | 第84页 |