| 摘要 | 第1-3页 |
| Summary | 第3-4页 |
| 主要英文缩略词表 | 第4-7页 |
| 第一章 文献综述 | 第7-16页 |
| 1. 甜瓜采后成熟机理 | 第7-8页 |
| 2. 乙烯对果实成熟的调控机理 | 第8页 |
| 3. ACC合成酶(ACC synthase ACS) | 第8-9页 |
| 4. ACC氧化酶(ACC oxidase ACO) | 第9-10页 |
| ·ACC氧化酶基因的克隆及其表达 | 第9-10页 |
| ·ACC氧化酶多基因家族 | 第10页 |
| 5. ACC合成酶和ACC氧化酶特异性表达 | 第10-11页 |
| 6. 反义RNA技术在果实成熟的调控 | 第11-12页 |
| ·反义RNA技术及其调控方式 | 第11页 |
| ·反义RNA技术对ACC氧化酶基因的调控 | 第11-12页 |
| 7. 组织特异性启动子 | 第12-14页 |
| ·植物特异性启动子的研究 | 第12-13页 |
| ·甜瓜(cucumisin)特异性启动子研究 | 第13-14页 |
| 8. 甜瓜遗传转化 | 第14-15页 |
| ·甜瓜基因工程国内外研究进展 | 第14-15页 |
| ·甜瓜再生体系研究进展 | 第15页 |
| 9. 本研究的目的意义 | 第15页 |
| 10. 技术路线 | 第15-16页 |
| 第二章 材料与方法 | 第16-25页 |
| 1. 材料 | 第16-17页 |
| ·植物材料 | 第16页 |
| ·菌种与质粒 | 第16页 |
| ·药品与试剂 | 第16页 |
| ·培养基 | 第16-17页 |
| ·质粒提取缓冲液 | 第17页 |
| 2. 方法 | 第17-25页 |
| ·质粒DNA的提取 | 第17-18页 |
| ·酶切体系 | 第18页 |
| ·回收目的基因片段 | 第18-19页 |
| ·大小片段末端补平反应体系(20ul) | 第19页 |
| ·回收片段的连接反应 | 第19页 |
| ·大肠杆菌感受态细胞的转化 | 第19-20页 |
| ·农杆菌感受态的制备 | 第20页 |
| ·PCR扩增 | 第20-21页 |
| ·根癌农杆菌介导转化烟草 | 第21-22页 |
| ·甜瓜再生体系的建立 | 第22-23页 |
| ·根癌农杆菌介导转化甜瓜 | 第23-24页 |
| ·CTAB法提取植物总DNA | 第24-25页 |
| 第三章 结果与分析 | 第25-32页 |
| 1. 甜瓜特异性启动子调控ACC氧化酶基因载体构建 | 第25-27页 |
| ·pCAM-ACO1-promoter和pCB-AaACO1酶切 | 第26页 |
| ·重组质粒的鉴定 | 第26-27页 |
| ·农杆菌转化鉴定 | 第27页 |
| 2. 烟草转化 | 第27-28页 |
| ·Kana抗性芽的筛选 | 第27页 |
| ·Kana抗性苗的筛选 | 第27-28页 |
| ·烟草抗性苗的PCR检测 | 第28页 |
| 3. 甜瓜再生体系的建立 | 第28-30页 |
| ·不同苗龄子叶对不定芽分化的影响 | 第28页 |
| ·不同激素组合对不定芽分化的影响 | 第28-29页 |
| ·不同6-BA浓度诱导不定芽 | 第29-30页 |
| ·不定根的诱导 | 第30页 |
| 4. 甜瓜转化 | 第30-32页 |
| ·甜瓜Kana抗性芽的获得 | 第30页 |
| ·甜瓜抗性苗获得 | 第30-31页 |
| ·甜瓜转化植株的PCR检测 | 第31-32页 |
| 第四章 讨论 | 第32-36页 |
| 1. 载体构建 | 第32页 |
| 2. CM-ACO基因 | 第32-33页 |
| 3. 影响甜瓜遗传转化的因素 | 第33-34页 |
| ·植物基因型 | 第33页 |
| ·菌液浓度及侵染时间 | 第33-34页 |
| 4. 影响甜瓜再生的因素 | 第34-36页 |
| ·转化受体 | 第34页 |
| ·激素配比 | 第34-35页 |
| ·转化体中褐化与玻璃化问题 | 第35-36页 |
| 结论 | 第36-37页 |
| 参考文献 | 第37-43页 |
| 图版 | 第43-45页 |
| 致谢 | 第45-46页 |
| 个人简历 | 第46-47页 |
| 导师简介 | 第47-49页 |
