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沙门氏菌、金黄色葡萄球菌及单增李斯特菌的同步快速检测方法的研究

摘要第1-7页
Abstract第7-12页
第一章 绪论第12-25页
   ·食品安全问题及食源性疾病的危害第12-13页
   ·三种食源性致病菌的病原学及流行病学研究进展第13-14页
     ·沙门氏菌的病原学及流行病学研究第13页
     ·金黄色葡萄球菌的病原学及流行病学研究第13-14页
     ·单增李斯特菌的病原学及流行病学研究第14页
   ·三种食源性致病菌的增菌技术研究进展第14-17页
     ·沙门氏菌增菌方法第15页
     ·金黄色葡萄球菌增菌方法第15-16页
     ·单增李斯特菌增菌方法第16-17页
   ·共增菌技术的研究现状第17-20页
     ·现有共增菌培养基第17-18页
     ·共增菌培养基的基础成分第18-19页
     ·共增菌培养基中抑制剂和促进剂的研究第19-20页
   ·三种食源性致病菌的分子生物学检测方法研究现状第20-23页
     ·多重PCR 检测方法第20-21页
     ·实时荧光定量PCR 检测方法第21页
     ·核酸探针技术第21页
     ·生物芯片技术第21-22页
     ·液相芯片技术第22-23页
   ·立题依据第23页
   ·研究内容和技术路线第23-25页
第二章 沙门氏菌、金黄色葡萄球菌及单增李斯特菌复合增菌培养基的研制第25-39页
   ·引言第25页
   ·实验材料与设备第25-26页
     ·菌株第25-26页
     ·主要试剂第26页
     ·实验仪器设备第26页
   ·实验及分析方法第26-28页
     ·菌种的保藏及菌悬液的制备第26-27页
     ·基础培养基的制备第27页
     ·抑制剂及促进剂的筛选第27-28页
     ·响应面分析法优化复合增菌培养基第28页
     ·培养温度的优化第28页
     ·复合增菌培养基pH 值的优化第28页
   ·结果与讨论第28-38页
     ·抑制剂及促进剂筛选第28-33页
     ·响应面实验优化配方成分第33-37页
     ·培养温度的选择第37页
     ·复合增菌培养基 pH 值的选择第37-38页
   ·本章小结第38-39页
第三章 沙门氏菌、金黄色葡萄球菌及单增李斯特菌复合增菌培养基的评价第39-54页
   ·引言第39页
   ·实验材料与设备第39页
     ·菌株第39页
     ·主要试剂第39页
     ·实验样品第39页
     ·主要仪器设备第39页
   ·实验及分析方法第39-42页
     ·增菌培养基的配制第39-40页
     ·SSL 的单菌增菌效果的验证第40页
     ·SSL 的复合增菌效果的验证第40页
     ·SSL 对非目标菌增菌效果的验证第40-41页
     ·SSL 对冷损伤菌及热损伤菌的复苏第41页
     ·人工接种样品的检测第41页
     ·实际污染样品的检测第41页
     ·三重荧光PCR 检测第41-42页
     ·统计方法第42页
   ·结果与讨论第42-53页
     ·SSL 肉汤单菌增菌效果第42-44页
     ·SSL 肉汤复合增菌效果第44-47页
     ·非目标菌的在SSL 肉汤中的复苏效果第47-48页
     ·SSL 对冷损伤菌及热损伤菌的复苏效果第48-50页
     ·人工接种样品的检验第50-52页
     ·实际样品的检验第52-53页
   ·本章小结第53-54页
第四章 沙门氏菌、金黄色葡萄球菌及单增李斯特菌液相芯片检测方法的建立第54-70页
   ·引言第54页
   ·实验材料与设备第54-55页
     ·菌株第54-55页
     ·主要试剂第55页
     ·实验仪器设第55页
   ·实验及分析方法第55-61页
     ·引物探针的设计第55-56页
     ·DNA 模板的制备第56-57页
     ·单重PCR 反应体系的建立第57页
     ·多重PCR 反应体系的建立第57-58页
     ·探针与微球的偶联及交联效率的验证第58-59页
     ·液相芯片仪的使用和结果判定第59页
     ·单菌的液相芯片检测体系的建立第59-60页
     ·杂交温度的优化第60页
     ·上游引物标记生物素对检测信号的影响第60页
     ·三种目标菌的液相芯片检测体系确立第60页
     ·液相芯片检测体系重复性验证第60页
     ·液相芯片检测体系特异性验证第60-61页
     ·液相芯片检测体系灵敏度验证第61页
   ·结果与讨论第61-69页
     ·引物与探针第61-62页
     ·单重PCR 扩增结果第62页
     ·多重PCR 扩增结果第62-64页
     ·探针及微球的偶联效果检测第64页
     ·单菌的液相芯片检测体系的建立第64-65页
     ·杂交温度的优化第65-66页
     ·上游引物标记生物素对检测信号的影响第66页
     ·三种目标菌液相芯片检测体系的确立第66-67页
     ·三种菌的液相芯片检测体系的重复性验证第67-68页
     ·三种菌的液相芯片检测体系的特异性验证第68页
     ·三种菌的液相芯片检测体系的灵敏性验证第68-69页
   ·本章小结第69-70页
第五章 沙门氏菌、金黄色葡萄球菌及单增李斯特菌液相芯片检测体系的应用第70-76页
   ·引言第70页
   ·实验材料与设备第70页
     ·菌株第70页
     ·主要试剂第70页
     ·主要仪器设备第70页
     ·样品第70页
   ·实验及分析方法第70-71页
     ·人工接种样品的检测第70-71页
     ·实际食品样品的检测第71页
   ·结果与讨论第71-75页
     ·人工接种样品的检验第71-74页
     ·实际食品样品的检验第74-75页
   ·本章小结第75-76页
结论与展望第76-78页
参考文献第78-85页
攻读硕士学位期间取得的研究成果第85-86页
致谢第86页

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