摘要 | 第1-5页 |
Abstract | 第5-8页 |
1 绪论 | 第8-19页 |
·引言 | 第8页 |
·花青素生物合成与调控 | 第8-11页 |
·花青素的生物合成 | 第8-10页 |
·花青素合成的调控 | 第10-11页 |
·拟南芥花青素调控 | 第11-15页 |
·调控基因TTG1、EGL3、TT8 | 第11-13页 |
·调控基因PAP1 | 第13-15页 |
·菊花转基因研究 | 第15-16页 |
·糖筛选体系在植物转基因中的应用 | 第16-17页 |
·立题的目的和意义 | 第17-19页 |
2 津田芜菁花青素调控基因的克隆 | 第19-36页 |
·材料与试剂 | 第19-20页 |
·试验方法 | 第20-26页 |
·RT-PCR法克隆基因 | 第20-23页 |
·3'-RACE法克隆PAP1基因3’端序列 | 第23页 |
·5'-RACE法克隆PAP1基因5’端序列 | 第23-26页 |
·结果与分析 | 第26-34页 |
·基因的克隆 | 第26-27页 |
·基因PAP1的生物信息学分析 | 第27-30页 |
·基因EGL3、TT8、TTG1 | 第30-34页 |
·本章小结 | 第34-36页 |
3 津田芜菁花青素调控基因的表达分析 | 第36-41页 |
·材料与试剂 | 第36-37页 |
·试验方法 | 第37-38页 |
·材料的处理 | 第37页 |
·RNA的提取 | 第37页 |
·反转录 | 第37-38页 |
·定量PCR | 第38页 |
·结果与分析 | 第38-40页 |
·本章小节 | 第40-41页 |
4 津田芜菁PAP1基因目的载体的构建 | 第41-50页 |
·材料与试剂 | 第42页 |
·试验方法 | 第42-46页 |
·目的基因与attB序列的连接 | 第42-43页 |
·BP反应 | 第43-44页 |
·LR反应 | 第44-45页 |
·目的载体转化农杆菌LBA4404感受态细胞 | 第45-46页 |
·结果与分析 | 第46-49页 |
·目的基因与attB序列的连接 | 第46页 |
·通过BP反应获得Entry Clones | 第46-47页 |
·通过LR反应获得Destination Vector | 第47页 |
·Destination Vector转化农杆菌LBA4404 | 第47-49页 |
·本章小节 | 第49-50页 |
5 津田芜菁PAP1基因转化菊花的研究 | 第50-55页 |
·材料与试剂 | 第50-51页 |
·试验方法 | 第51-52页 |
·转基因用苗的培养 | 第51页 |
·农杆菌遗传转化体系 | 第51-52页 |
·转基因株系的PCR鉴定 | 第52页 |
·结果与分析 | 第52-54页 |
·本章小结 | 第54-55页 |
结论 | 第55-56页 |
参考文献 | 第56-59页 |
攻读学位期间发表的学术论文 | 第59-60页 |
致谢 | 第60-61页 |