| 摘要 | 第1-7页 |
| ABSTRACT | 第7-8页 |
| 缩写表 | 第8-10页 |
| 第一部分 文献综述赤霉素与脱落酸信号转导及其互作 | 第10-42页 |
| 第一章 植物激素ABA 的信号转导 | 第10-20页 |
| ·ABA 受体 | 第10-13页 |
| ·ABA 信号转导机制 | 第13-20页 |
| ·ABA 与Ca~2+、IP_3、cADPR 信使―依赖钙离子的信号转导途径 | 第13-14页 |
| ·ABA 与胞质pH | 第14页 |
| ·ABA 与PP2C | 第14-15页 |
| ·ABA 与蛋白磷酸化 | 第15-16页 |
| ·ABA 与活性氧 | 第16-17页 |
| ·ABA 与RNA 的代谢 | 第17-20页 |
| 第二章 植物激素GA 的合成及其调控 | 第20-30页 |
| ·具有生物活性的GA 种类 | 第20页 |
| ·G A 生物合成途径的基本过程 | 第20-22页 |
| ·G A 生物合成以及代谢途径相关酶 | 第22-23页 |
| ·G A 信号调节 | 第23-30页 |
| ·G A 受体 | 第24-25页 |
| ·G A 与DELLA 蛋白 | 第25-26页 |
| ·G A 与盐胁迫 | 第26页 |
| ·G A 与生长素 | 第26-27页 |
| ·G A 与细胞分裂素 | 第27-28页 |
| ·G A 与乙烯 | 第28页 |
| ·G A 与光周期和温度 | 第28-30页 |
| 第三章 ABA 与GA 信号互作对种子休眠的调控 | 第30-40页 |
| ·种子休眠 | 第30-31页 |
| ·A BA 对种子休眠的影响 | 第31-33页 |
| ·G A 对种子休眠的影响 | 第33-34页 |
| ·A BA 与GA 信号互作对种子休眠的影响 | 第34页 |
| ·种子休眠过程中其他信号因子对ABA 与GA 信号互作的调控 | 第34-40页 |
| ·转录因子对ABA 和GA 信号互作的调控 | 第34-35页 |
| ·D ELLA 蛋白对ABA 和GA 信号互作的调控 | 第35-36页 |
| ·光信号对ABA 和GA 信号互作的调控 | 第36页 |
| ·温度对ABA 和GA 信号互作的调控 | 第36-37页 |
| ·活性氧对ABA 和GA 信号互作的调控 | 第37页 |
| ·乙烯对ABA 和GA 信号互作的调控 | 第37页 |
| ·油菜素内酯对ABA 和GA 信号互作的调控 | 第37-40页 |
| 第四章 实验目的和意义 | 第40-42页 |
| 第二部分 研究报告拟南芥一个20G-Fe(Ⅱ)氧化还原酶在GA 合成及其与ABA 互作的功能分析 | 第42-92页 |
| 第五章 拟南芥功能获得型ABA 不敏感突变体gai4 的筛选和基因克隆 | 第42-60页 |
| 1. 引言 | 第42-43页 |
| 2. 材料与方法 | 第43-50页 |
| ·实验材料 | 第43-44页 |
| ·植物材料 | 第43页 |
| ·质粒载体与菌株 | 第43页 |
| ·实验试剂 | 第43-44页 |
| ·培养基的配制方法 | 第44页 |
| ·常用溶液 | 第44页 |
| ·实验方法 | 第44-50页 |
| ·植物材料的种植方法 | 第44-45页 |
| ·A BA 母液以及雌二醇母液的配制 | 第45页 |
| ·含有ABA 以及雌二醇ER 的培养基配制 | 第45页 |
| ·拟南芥小量基因组DNA 提取方法 | 第45页 |
| ·TAIL-PCR 引物以及反应程序 | 第45-46页 |
| ·DNA 的琼脂糖凝胶电泳 | 第46-47页 |
| ·PCR 产物的回收和纯化 | 第47页 |
| ·RNA 的提取以及cDNA 的合成 | 第47页 |
| ·半定量RT-PCR | 第47-48页 |
| ·实时定量RT-PCR | 第48页 |
| ·GAI4::supe11300+重组质粒构建 | 第48-49页 |
| ·重组质粒对E.coli 感受态细胞的转化 | 第49页 |
| ·重组质粒的鉴定 | 第49页 |
| ·农杆菌(GV 3101)感受态细胞的制备及转化 | 第49-50页 |
| 3. 结果与分析 | 第50-57页 |
| ·功能获得型ABA 不敏感突变体筛选浓度的确立 | 第50-51页 |
| ·功能获得型ABA 不敏感突变体gai4 的分离获得 | 第51-52页 |
| ·利用TAIL-PCR 方法克隆拟南芥GAI4 基因 | 第52-53页 |
| ·GAI4 基因的插入验证 | 第53-54页 |
| ·GAI4 基因的超表达植株表型的验证 | 第54-57页 |
| ·半定量RT-PCR 及实时定量PCR对GAI4 基因表达量分析 | 第54-55页 |
| ·GAI4::supe11300+永久超表达植株的筛选与表型分析 | 第55-57页 |
| 4. 讨论 | 第57-60页 |
| 第六章 拟南芥GAI4 在GA 合成及其与ABA 信号互作的初步功能分析 | 第60-92页 |
| 1. 引言 | 第60-61页 |
| 2. 材料与方法 | 第61-67页 |
| ·实验材料 | 第61-62页 |
| ·植物材料 | 第61页 |
| ·质粒载体与菌株 | 第61页 |
| ·实验药品 | 第61页 |
| ·P CR 引物 | 第61-62页 |
| ·实验方法 | 第62-67页 |
| ·植物材料的种植方法 | 第62页 |
| ·A BA、NaCl、H_20_2 对拟南芥种子萌发及早期发育的影响 | 第62-63页 |
| ·A BA、NaCl、H_20_2、Glucose、Mannitol、PAC 对拟南芥种子萌发及早期发育的影响 | 第63页 |
| ·远红光和红光对拟南芥种子萌发及下胚轴伸长的影响 | 第63页 |
| ·同源性分析 | 第63页 |
| ·内源GA_(12)、GA_4 和ABA 含量的测定 | 第63页 |
| ·P EG 介导拟南芥原生质体瞬时表达方法 | 第63-64页 |
| ·GAI4 蛋白原核表达以及活性测定 | 第64-65页 |
| ·质粒小量提取方法 | 第65页 |
| ·质粒大量提取以及纯化方法 | 第65-66页 |
| ·目的蛋白的体外转录以及翻译 | 第66页 |
| ·DS-PAGE 凝胶电泳 | 第66页 |
| ·GAI4 酶活性分析 | 第66-67页 |
| 3. 结果与分析 | 第67-87页 |
| ·GAI4 同源性分析 | 第67-68页 |
| ·G A 逆转ABA 对种子萌发的抑制作用 | 第68-69页 |
| ·GAI4 对叶片生长的影响 | 第69-70页 |
| ·A BA、NaCl、H_20_2、Glucose、Mannitol、PAC 对根伸长的影响 | 第70-71页 |
| ·在远红光以及红光照射下GAI4 对种子萌发和下胚轴伸长的影响 | 第71-74页 |
| ·冷信号对种子萌发的影响 | 第74-76页 |
| ·盐胁迫对种子萌发的影响 | 第76-77页 |
| ·H_20_2 对种子萌发的影响 | 第77-78页 |
| ·内源GA_(12)、GA_4、ABA 含量的测定 | 第78-80页 |
| ·GAI4 酶活性分析 | 第80-82页 |
| ·GAI4 催化产生一种新的GA 分子 | 第82-84页 |
| ·GAI4 表达部位分析 | 第84-85页 |
| ·GAI4 蛋白的亚细胞定位 | 第85-86页 |
| ·GAI4 对GA 和ABA 信号互作中相关基因转录的影响 | 第86-87页 |
| ·GAI4 响应多种非生物胁迫表达分析 | 第87页 |
| 4. 讨论 | 第87-92页 |
| 第三部分 结论 | 第92-94页 |
| 第四部分 参考文献 | 第94-111页 |
| 致谢 | 第111页 |
