| 摘要 | 第4-6页 |
| Abstract | 第6-7页 |
| 缩略词 | 第8-18页 |
| 前言 | 第18-59页 |
| 1. HPV的生物学 | 第19-40页 |
| 1.1 病毒基因组的结构 | 第19-21页 |
| 1.2 HPV早期蛋白与病毒的转录,复制及转化 | 第21-25页 |
| 1.3 HPV晚期蛋白与病毒的组装和入胞 | 第25-31页 |
| 1.4 HPV的生活史 | 第31-32页 |
| 1.5 HPV的致病机制 | 第32-33页 |
| 1.6 HPV的分型 | 第33-35页 |
| 1.7 HPV的免疫 | 第35-40页 |
| 2. HPV感染的流行病学 | 第40-47页 |
| 2.1 HPV的流行现状 | 第40-44页 |
| 2.2 HPV引起的疾病 | 第44-47页 |
| 3. HPV感染的诊断、预防和治疗 | 第47-57页 |
| 3.1 HPV的检测 | 第47-49页 |
| 3.2 HPV感染的预防与预防性疫苗 | 第49-55页 |
| 3.3 HPV感染的治疗与治疗性疫苗 | 第55-57页 |
| 4. 本文研究的思路,目的和意义 | 第57-59页 |
| 材料与方法 | 第59-87页 |
| 一、材料 | 第59-63页 |
| 1.1 主要设备 | 第59-60页 |
| 1.2 菌株、质粒、实验动物 | 第60-62页 |
| 1.3 软件 | 第62页 |
| 1.4 酶和单抗 | 第62页 |
| 1.5 其他试剂 | 第62-63页 |
| 二、方法 | 第63-87页 |
| 2.1 常用溶液及培养基配制 | 第63-65页 |
| 2.2 常规分子生物学实验方法 | 第65-71页 |
| 2.3 HPV突变蛋白及杂合VLP相关的克隆构建,表达纯化和检测方法 | 第71-79页 |
| 2.4 使用低温电镜重构VLP的三维结构 | 第79-80页 |
| 2.5 酶联免疫吸附分析检测HPV L1蛋白的抗原性 | 第80-81页 |
| 2.6 HPV L1蛋白免疫动物实验 | 第81页 |
| 2.7 抗HPV单克隆抗体的筛选和制备 | 第81-84页 |
| 2.8 HPV假病毒的制备与血清中和抗体滴度的测定 | 第84-87页 |
| 结果与分析 | 第87-147页 |
| 第一部分 HPV杂合组装方式的发现 | 第87-118页 |
| 1. HPV突变L1蛋白的制备和性质鉴定 | 第88-99页 |
| 1.1 大肠杆菌重组表达质粒PT0-T7-HPV C175A，C175S和AC428的构建 | 第88-90页 |
| 1.2 HPV突变L1蛋白在大肠杆菌中的表达 | 第90-92页 |
| 1.3 HPV突变L1蛋白的层析纯化 | 第92-93页 |
| 1.4 HPV突变L1蛋白的颗粒性分析 | 第93-98页 |
| 1.5 HPV突变L1蛋白混合的检测 | 第98-99页 |
| 2. 杂合HPV颗粒的组装研究 | 第99-111页 |
| 2.1 C175A与C175S用于杂合VLP组装的比较 | 第99-101页 |
| 2.2 HPV16C175A和HPV52△C428组装杂合VLP条件的研究 | 第101-104页 |
| 2.3 HPV16C175A和HPV52△C428组装杂合VLP比例的研究 | 第104-106页 |
| 2.4 更多杂合VLP组装的尝试 | 第106-111页 |
| 3. 在真核表达系统中组装杂合VLP的尝试 | 第111-116页 |
| 4. 杂合VLP作为展示载体的尝试 | 第116-118页 |
| 5. 第一部分小结 | 第118页 |
| 第二部分 HPV杂合VLP的性质研究 | 第118-147页 |
| 1. HPV杂合VLP的颗粒性分析 | 第118-123页 |
| 1.1 杂合VLP的DLS检测 | 第118-119页 |
| 1.2 杂合VLP的HPSEC检测 | 第119-120页 |
| 1.3 杂合VLP的AUC检测 | 第120-121页 |
| 1.4 杂合VLP的Cyro-EM三维结构重建 | 第121-123页 |
| 2. HPV杂合VLP中C175A蛋白与△C428蛋白的化学计量比 | 第123-127页 |
| 2.1 杂合VLP的SDS-PAGE与Western Blot分析 | 第123-124页 |
| 2.2 杂合VLP的双抗夹心ELISA检测 | 第124-127页 |
| 3. HPV杂合VLP的DSC检测 | 第127-129页 |
| 4. 杂合组装的VLP与野生型混合组装VLP的比较 | 第129-132页 |
| 4.1 混合组装VLP的TEM检测 | 第129-130页 |
| 4.2 混合组装VLP的HPSEC检测 | 第130-131页 |
| 4.3 混合组装VLP的双抗夹心ELISA检测 | 第131-132页 |
| 5. HPV杂合VLP抗原性的考察 | 第132-139页 |
| 5.1 双型别杂合VLP的抗原性检测 | 第132-137页 |
| 5.2 多型别杂合VLP的抗原性检测 | 第137-139页 |
| 6. HPV杂合VLP免疫原性的考察 | 第139-146页 |
| 6.1 双型别杂合VLP的免疫原性检测 | 第139-143页 |
| 6.2 多型别杂合VLP的免疫原性检测 | 第143-146页 |
| 7. 第二部分小结 | 第146-147页 |
| 讨论 | 第147-162页 |
| 1. HPV杂合VLP的组装与结构 | 第147-155页 |
| 1.1 二硫键对杂合VLP组装的影响 | 第147-150页 |
| 1.2 pH对杂合VLP组装的影响 | 第150-151页 |
| 1.3 L2蛋白对于L1 VLP组装影响 | 第151-152页 |
| 1.4 杂合VLP两种突变蛋白的分布与排列 | 第152-153页 |
| 1.5 杂合VLP与组成型别的关系 | 第153-154页 |
| 1.6 杂合组装方式与混合组装方式的区别 | 第154-155页 |
| 2. 杂合VLP的抗原性与免疫原性 | 第155-158页 |
| 2.1 杂合VLP的抗原性 | 第155-157页 |
| 2.2 杂合VLP的免疫原性 | 第157-158页 |
| 3. HPV杂合VLP在HPV疫苗中的应用前景 | 第158-162页 |
| 3.1 HPV杂合VLP在HPV预防性疫苗中的应用前景 | 第158-160页 |
| 3.2 HPV杂合VLP在HPV治疗性疫苗中的应用前景 | 第160-162页 |
| 小结与展望 | 第162-164页 |
| 参考文献 | 第164-177页 |
| 致谢 | 第177-178页 |
| 在校期间发表论文及申请专利 | 第178-179页 |
