| 中文摘要 | 第7-12页 |
| ABSTRACT | 第12-18页 |
| 英文缩略词对照表 | 第19-20页 |
| 前言 | 第20-24页 |
| 实验一 大鼠肝纤维化进程中KCS亚群及其PD-1 蛋白表达的变化 | 第24-37页 |
| 1 材料及方法 | 第24-29页 |
| 1.1 实验动物 | 第24-25页 |
| 1.2 试剂和仪器 | 第25-26页 |
| 1.3 肝组织切片制作、HE病理、Masson染色和免疫组化 | 第26-27页 |
| 1.4 原代KCs的分离、培养 | 第27页 |
| 1.5 KCs墨汁吞噬实验 | 第27-28页 |
| 1.6 KCs的表型研究 | 第28页 |
| 1.7 KCs细胞因子的测定 | 第28页 |
| 1.8 细胞爬片免疫荧光检测不同时期KCs PD-1 蛋白的表达 | 第28页 |
| 1.9 Western blot检测 | 第28-29页 |
| 1.10 统计分析 | 第29页 |
| 2 结果与分析 | 第29-35页 |
| 2.1 造模不同时间点的大鼠肝脏病理特征 | 第29-30页 |
| 2.2 肝脏组织M1和M2特异抗体免疫组化检测 | 第30-31页 |
| 2.3 造模不同时间点的大鼠原代KCs的吞噬能力 | 第31-32页 |
| 2.4 造模不同时间点的大鼠KCs的表型变化 | 第32-33页 |
| 2.5 造模不同时间点的大鼠KCs中细胞因子的含量变化 | 第33-34页 |
| 2.6 免疫荧光法检测KCs中PD-1 蛋白的表达 | 第34页 |
| 2.7 Western blot法检测KCs PD-1 蛋白的表达 | 第34-35页 |
| 3 结论 | 第35-37页 |
| 实验二 PD-1蛋白介导的PI3K-AKT信号通路对KCS亚群分化的调控 | 第37-46页 |
| 1 材料与方法 | 第38-42页 |
| 1.1 材料 | 第38页 |
| 1.2 实验动物分组及造模 | 第38页 |
| 1.3 肝组织HE病理和Masson染色 | 第38页 |
| 1.4 KCs分离培养步骤 | 第38-39页 |
| 1.5 流式细胞仪检测KCs亚群 | 第39页 |
| 1.6 细胞爬片免疫荧光检测两组KCs PD-1 蛋白的表达 | 第39-40页 |
| 1.7 PD-1 si RNA质粒的构建 | 第40页 |
| 1.8 质粒转染 | 第40-41页 |
| 1.9 Western blot检测 | 第41-42页 |
| 2 结果与分析 | 第42-44页 |
| 2.1 肝脏组织HE病理染色 | 第42页 |
| 2.2 肝组织Masson染色 | 第42页 |
| 2.3 流式细胞仪检测KCs亚群比例 | 第42-43页 |
| 2.4 免疫荧光法检测KCs PD-1 蛋白的表达 | 第43页 |
| 2.5 Western blot法检测PD-1 及PI3k-Akt信号通路相关蛋白的表达 | 第43-44页 |
| 3 结论 | 第44-46页 |
| 实验三 参杖颗粒对KCS分化调控及细胞因子分泌谱的影响的体内研究 | 第46-55页 |
| 1 材料及方法 | 第46-48页 |
| 1.1 实验动物 | 第46页 |
| 1.2 药物血清的制备 | 第46-47页 |
| 1.3 试剂和仪器 | 第47页 |
| 1.4 原代KCs的分离、培养 | 第47-48页 |
| 1.5 KCs的表型研究 | 第48页 |
| 1.6 KCs细胞因子的测定 | 第48页 |
| 1.7 统计分析 | 第48页 |
| 2 结果与分析 | 第48-53页 |
| 2.1 造模不同时间点的大鼠KCs的表型变化 | 第48-52页 |
| 2.2 造模不同时间点的大鼠KCs中细胞因子的含量变化 | 第52-53页 |
| 3 结论 | 第53-55页 |
| 实验四 参杖颗粒对KCS表面PD-1 表达的影响及其对PI3K-AKT信号通路的调控的体外研究 | 第55-68页 |
| 1 材料及方法 | 第55-61页 |
| 1.1 实验动物 | 第55页 |
| 1.2 试剂和仪器 | 第55-56页 |
| 1.3 药物血清的制备 | 第56-57页 |
| 1.4 原代KCs的分离、培养 | 第57页 |
| 1.5 KCs细胞分组及处理 | 第57页 |
| 1.6 流式细胞仪检测KCs亚群 | 第57-58页 |
| 1.7 荧光定量PCR检测PI3K-Akt信号通路相关蛋白m RNA的变化 | 第58-60页 |
| 1.8 WB检测PI3K-Akt信号通路相关蛋白及磷酸化的变化 | 第60-61页 |
| 1.9 ELISA检测KCs细胞因子谱 | 第61页 |
| 2 结果与分析 | 第61-67页 |
| 2.1 大鼠KCs的表型变化 | 第61-62页 |
| 2.2 荧光定量PCR检测PI3K-Akt信号通路相关蛋白m RNA的变化 | 第62-64页 |
| 2.3 WB检测PI3K-Akt信号通路相关蛋白及磷酸化的变化 | 第64-65页 |
| 2.4 ELISA检测KCs细胞因子谱 | 第65-67页 |
| 3 结论 | 第67-68页 |
| 讨论与总结 | 第68-72页 |
| 创新点 | 第71-72页 |
| 结语 | 第72-73页 |
| 参考文献 | 第73-85页 |
| 附录 | 第85-86页 |
| 综述 | 第86-102页 |
| 参考文献 | 第95-102页 |
| 攻读博士学位期间取得的成果 | 第102-103页 |
| 致谢 | 第103页 |
