| 摘要 | 第4-7页 |
| Abstract | 第7-10页 |
| 缩略词 | 第17-18页 |
| 前言 | 第18-21页 |
| 第一部分 NEDD4L基因在肾透明细胞癌组织中的表达及临床意义 | 第21-33页 |
| 1.1 材料方法 | 第21-23页 |
| 1.1.1 临床资料 | 第21-22页 |
| 1.1.2 主要实验试剂 | 第22页 |
| 1.1.3 主要仪器及实验耗材 | 第22-23页 |
| 1.1.4 主要配制的溶液 | 第23页 |
| 1.2 实验方法 | 第23-27页 |
| 1.2.1 TCGA数据挖掘分析 | 第23页 |
| 1.2.2 实时定量PCR | 第23-25页 |
| 1.2.3 免疫组织化学染色 | 第25-27页 |
| 1.3 统计学分析 | 第27页 |
| 1.4 实验结果 | 第27-31页 |
| 1.4.1 NEDD4L在各种肿瘤组织与其对应的癌旁组织中的表达情况 | 第27-28页 |
| 1.4.2 对TCGA数据库数据挖掘研究NEDD4L对肾透明细胞癌患者生存期的影响 | 第28页 |
| 1.4.3 免疫组化检测25对临床样本中NEDD4L蛋白的表达情况 | 第28-29页 |
| 1.4.4 qRT-PCR分析NEDD4L mRNA在50对样本中表达情况 | 第29页 |
| 1.4.5 NEDD4L在肾癌组织中表达量与临床资料之间关系 | 第29-31页 |
| 1.5 讨论 | 第31-32页 |
| 1.6 小结 | 第32-33页 |
| 第二部分 NEDD4L对肾透明细胞癌细胞生物学功能的影响 | 第33-52页 |
| 2.1 材料方法 | 第33-36页 |
| 2.1.1 材料 | 第33-34页 |
| 2.1.2 主要实验试剂 | 第34页 |
| 2.1.3 主要仪器及实验耗材 | 第34-35页 |
| 2.1.4 主要溶液的配置 | 第35-36页 |
| 2.2 实验方法 | 第36-43页 |
| 2.2.1 细胞培养 | 第36-37页 |
| 2.2.2 NEDD4L过表达载体和空载慢病毒感染ACHN和786-0细胞 | 第37页 |
| 2.2.3 qRT-PCR和Western Blot检测基因过表达后NEDD4L的表达情况 | 第37-39页 |
| 2.2.4 平板克隆实验 | 第39-40页 |
| 2.2.5 细胞增殖实验(WST-1法) | 第40-41页 |
| 2.2.6 Transwell迁移实验 | 第41页 |
| 2.2.7 细胞划痕实验 | 第41-42页 |
| 2.2.8 裸鼠成瘤实验 | 第42-43页 |
| 2.3 统计学方法 | 第43页 |
| 2.4 实验结果 | 第43-49页 |
| 2.4.1 人正常肾细胞293T和肾透明细胞癌细胞ACHN、A498、Caki-1、786-O中NEDD4L的表达情况 | 第43页 |
| 2.4.2 NEDD4L过表达载体和空载慢病毒感染肾透明细胞癌后各组细胞中NEDD4L mRNA及蛋白的表达情况 | 第43-44页 |
| 2.4.3 WST-1法检测过表达NEDD4L对肾透明细胞癌细胞增殖活性的影响 | 第44-45页 |
| 2.4.4 过表达NEDD4L对肾透明细胞癌细胞平板克隆形成的影响 | 第45-46页 |
| 2.4.5 过表达NEDD4L对肾透明细胞癌细胞迁移的影响 | 第46-49页 |
| 2.4.6 NEDD4L在体内抑制肾透明细胞癌肿瘤的生长 | 第49页 |
| 2.5 讨论 | 第49-51页 |
| 2.6 小结 | 第51-52页 |
| 全文结论 | 第52-53页 |
| 参考文献 | 第53-58页 |
| 附录 | 第58-59页 |
| 致谢 | 第59-60页 |
| 综述 | 第60-72页 |
| 参考文献 | 第65-72页 |
