| 摘要 | 第6-7页 |
| ABSTRACT | 第7页 |
| 缩略语 | 第8-9页 |
| 第一部分 文献综述 | 第9-23页 |
| 第一章 小麦白粉病概况及VIGS技术在小麦中的应用 | 第9-13页 |
| 1 小麦白粉病研究进展 | 第9-11页 |
| 1.1 小麦抗白粉病基因及其来源 | 第9-10页 |
| 1.2 小麦抗白粉病基因克隆研究进展 | 第10-11页 |
| 2 VIGS技术在小麦中的应用 | 第11-13页 |
| 第二章 植物抗病防卫系统概述 | 第13-19页 |
| 1 PAMPs触发的免疫反应及其信号转导 | 第13-14页 |
| 2 效应因子触发的免疫反应及其信号转导 | 第14-16页 |
| 3 PTI和ETI免疫防卫反应的分子机制 | 第16-19页 |
| 第三章 copine基因在植物抗病中的作用 | 第19-23页 |
| 1 copine基因在抗病中的研究进展 | 第19-21页 |
| 1.1 copine蛋白的特征 | 第19页 |
| 1.2 植物中copine在抗病中的研究进展 | 第19-21页 |
| 2 温度对植物抗病性的研究进展 | 第21-23页 |
| 第二部分 研究报告 | 第23-47页 |
| 第一章 小麦copine基因抗病功能的研究 | 第23-47页 |
| 1 引言 | 第23-25页 |
| 2 材料与方法 | 第25-28页 |
| 2.1 植物材料与处理 | 第25页 |
| 2.2 病原菌的培养 | 第25页 |
| 2.3 多重序列比对,结构域分析以及进化树的构建 | 第25-26页 |
| 2.4 TaBON1:eGFP融合蛋白的亚细胞定位 | 第26页 |
| 2.5 总RNA的提取以及实时荧光定量PCR(qRT-PCR) | 第26页 |
| 2.6 VIGS系统对TaBON1和TaBON3基因进行功能验证 | 第26-27页 |
| 2.6.1 沉默重组载体的构建 | 第26-27页 |
| 2.6.2 病毒及重组载体的线性化 | 第27页 |
| 2.6.3 体外转录反应 | 第27页 |
| 2.6.4 转录产物的混合及转染 | 第27页 |
| 2.6.5 沉默植株的沉默效率检测及离体鉴定 | 第27页 |
| 2.7 DAB染色 | 第27-28页 |
| 2.8 台盼蓝染色 | 第28页 |
| 3 实验结果分析 | 第28-44页 |
| 3.1 小麦中copine基因的鉴定 | 第28-29页 |
| 3.2 TaBON1和TaBON3蛋白的结构域和序列分析 | 第29-31页 |
| 3.3 TaBON1和TaBON3基因结构分析 | 第31页 |
| 3.4 TaBON1和TaBON3的表达模式分析 | 第31-34页 |
| 3.4.1 TaBON1和TaBON3在小麦中的组织特异性表达分析 | 第31-32页 |
| 3.4.2 接种白粉菌Bgt诱导TaBON1和TaBON3上调表达 | 第32-33页 |
| 3.4.3 高温抑制TaBON1和TaBON3的表达 | 第33-34页 |
| 3.5 小麦中copine蛋白的亚细胞定位 | 第34-35页 |
| 3.6 VIGS结果及其分析 | 第35-42页 |
| 3.6.1 TaBON1和TaBON3的VIGS重组载体的构建 | 第35-36页 |
| 3.6.2 载体的线性化 | 第36-37页 |
| 3.6.3 体外转录反应 | 第37页 |
| 3.6.4 目标基因的沉默效率检测 | 第37-39页 |
| 3.6.5 TaBON1和TaBON3的沉默会诱导PR基因的上调表达 | 第39页 |
| 3.6.6 TaBON1和TaBON3的沉默会诱导ROS标志基因的上调表达 | 第39-40页 |
| 3.6.7 TaBON1和TaBON3基因沉默后的组织学表型分析 | 第40-41页 |
| 3.6.8 接种Bgt后沉默植株的表型观察及组织学表型观察 | 第41-42页 |
| 3.7 高温下VIGS植株产生及表型分析 | 第42-44页 |
| 3.7.1 目标基因的沉默效率检测 | 第42-43页 |
| 3.7.2 高温下TaBON1和TaBON3的沉默的PR基因表达及组织学表型观察 | 第43-44页 |
| 4 讨论 | 第44-47页 |
| 全文结论 | 第47-49页 |
| 参考文献 | 第49-63页 |
| 附录 | 第63-65页 |
| 攻读硕士期间发表的论文 | 第65-67页 |
| 致谢 | 第67页 |
