| 摘要 | 第8-11页 |
| Abstract | 第11-13页 |
| 第一章 绪论 | 第14-17页 |
| 1.1 课题来源、研究的目的和意义 | 第14页 |
| 1.2 国内外研究概况 | 第14-15页 |
| 1.3 论文的主要研究内容 | 第15-17页 |
| 第一部分 血清lncRNA FEZF1-AS1作为胃癌诊断标志物的研究 | 第17-29页 |
| 第一章 材料与方法 | 第17-20页 |
| 1.1 研究资料及仪器设备 | 第17页 |
| 1.1.1 研究对象 | 第17页 |
| 1.1.2 主要仪器与试剂 | 第17页 |
| 1.2 实验流程与方法 | 第17-20页 |
| 1.2.1 血清标本的处理 | 第17页 |
| 1.2.2 血清总RNA提取 | 第17-18页 |
| 1.2.3 逆转录反应 | 第18-19页 |
| 1.2.4 实时荧光定量PCR（qRT-PCR） | 第19页 |
| 1.2.5 临床标本血清FEZF1-AS1的检测 | 第19页 |
| 1.2.6 统计学分析 | 第19-20页 |
| 第二章 结果 | 第20-26页 |
| 2.1 荧光定量PCR检测血清FEZF1-AS1表达水平方法学评价 | 第20-21页 |
| 2.1.1 线性 | 第20页 |
| 2.1.2 重复性 | 第20-21页 |
| 2.1.3 特异性 | 第21页 |
| 2.2 血清FEZF1-AS1相对表达量检测 | 第21-24页 |
| 2.2.1 检测GC初诊、胃良性病变患者及健康体检者血清FEZF1-AS1的相对表达量 | 第21-22页 |
| 2.2.2 血清FEZF1-AS1与临床病理参数之间的相关性 | 第22-23页 |
| 2.2.3 GC血清FEZF1-AS1、CEA及CA199的诊断效能评价 | 第23-24页 |
| 2.2.4 血清FEZF1-AS1及CEA、CA199的联合检测 | 第24页 |
| 2.3 血清FEZF1-AS1对胃癌预后判断价值 | 第24-26页 |
| 第三章 讨论 | 第26-28页 |
| 第四章 结论 | 第28-29页 |
| 第二部分 lncRNA FEZF1-AS1在胃癌组织及细胞株中的表达及功能研究 | 第29-64页 |
| 第一章 材料与方法 | 第29-41页 |
| 1.1 研究资料及仪器设备 | 第29-30页 |
| 1.1.1 研究对象 | 第29页 |
| 1.1.2 主要仪器与试剂 | 第29-30页 |
| 1.2 实验流程与方法 | 第30-41页 |
| 1.2.1 组织及细胞RNA的提取 | 第30页 |
| 1.2.2 逆转录反应 | 第30页 |
| 1.2.3 实时荧光定量PCR | 第30页 |
| 1.2.4 细胞培养 | 第30页 |
| 1.2.5 细胞冻存 | 第30-31页 |
| 1.2.6 RNA干扰载体构建 | 第31-32页 |
| 1.2.7 RNA过表达载体构建 | 第32页 |
| 1.2.8 细胞转染技术 | 第32-33页 |
| 1.2.9 细胞增殖实验（CCK-8 法） | 第33页 |
| 1.2.10 克隆形成实验 | 第33页 |
| 1.2.11 细胞侵袭与迁移实验（Transwell小室法） | 第33-34页 |
| 1.2.12 流式细胞术检测细胞周期分布 | 第34页 |
| 1.2.13 流式细胞术检测细胞凋亡 | 第34页 |
| 1.2.14 细胞总蛋白提取 | 第34页 |
| 1.2.15 蛋白免疫印迹（Western blot） | 第34-36页 |
| 1.2.16 RNA免疫共沉淀（RIP） | 第36-38页 |
| 1.2.17 荧光原位杂交（FISH） | 第38-39页 |
| 1.2.18 细胞核浆分离实验 | 第39-41页 |
| 第二章 结果 | 第41-60页 |
| 2.1 胃癌组织芯片及TCGA数据库筛选差异表达的lnc RNA | 第41-42页 |
| 2.2 胃癌组织FEZF1-AS1相对表达量检测 | 第42-43页 |
| 2.3 胃癌组织FEZF1-AS1与临床病理参数的相关性 | 第43-44页 |
| 2.4 胃癌细胞株中FEZF1-AS1表达水平 | 第44-45页 |
| 2.4.1 GC细胞株中FEZF1-AS1的相对表达量 | 第44页 |
| 2.4.2 GC细胞株中FEZF1-AS1的转染效率 | 第44-45页 |
| 2.5 FEZF1-AS1对GC细胞增殖影响 | 第45-47页 |
| 2.5.1 CCK-8 法检测细胞增殖 | 第45-47页 |
| 2.5.2 克隆形成实验检测细胞增殖 | 第47页 |
| 2.6 FEZF1-AS1对GC细胞周期分布影响 | 第47-49页 |
| 2.7 FEZF1-AS1对GC细胞凋亡影响 | 第49-50页 |
| 2.8 划痕法检测FEZF1-AS1对GC细胞迁移能力影响 | 第50-52页 |
| 2.9 Transwell法检测FEZF1-AS1对GC细胞侵袭、迁移影响 | 第52-53页 |
| 2.10 FEZF1-AS1在GC细胞株中定位 | 第53页 |
| 2.11 软件预测FEZF1-AS1 RNA结合蛋白及RIP实验验证 | 第53-54页 |
| 2.12 qRT-PCR检测胃癌组织中sirt1的表达量及分析FEZF1-AS1与sirt1的相关性 | 第54-55页 |
| 2.13 qRT-PCR及Western blot检测FEZF1-AS1对sirt1的影响 | 第55页 |
| 2.14 荧光显微镜下观察自噬小体 | 第55-56页 |
| 2.15 qRT-PCR检测FEZF1-AS1对自噬相关基因影响 | 第56页 |
| 2.16 Western blot检测FEZF1-AS1对自噬相关蛋白的影响 | 第56-57页 |
| 2.17 CCK-8 法检测FEZF1-AS1干扰载体和 3-MA共转对细胞增殖的影响 | 第57-58页 |
| 2.18 流式细胞术检测FEZF1-AS1干扰载体和 3-MA共转对细胞周期的影响 | 第58-59页 |
| 2.19 流式细胞术检测FEZF1-AS1干扰载体和 3-MA共转对细胞凋亡的影响 | 第59-60页 |
| 第三章 讨论 | 第60-63页 |
| 第四章 结论 | 第63-64页 |
| 参考文献 | 第64-67页 |
| 英文缩写词表 | 第67-68页 |
| 综述 | 第68-82页 |
| 综述参考文献 | 第77-82页 |
| 在攻读硕士学位期间公开发表的论文与参加的项目 | 第82-83页 |
| A：在国内外刊物上发表的论文 | 第82页 |
| B：所参加的项目 | 第82-83页 |
| 致谢 | 第83页 |
