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光皮桦KNOX基因的克隆及其功能研究

摘要第4-6页
ABSTRACT第6-7页
引言第11-12页
第一章 文献综述第12-20页
    1.1 植物KNOX基因研究进展第12-16页
        1.1.1 KNOX的序列特征及分类第12-13页
        1.1.2 KNOX基因的功能第13-14页
            1.1.2.1 KNOX基因在叶片发育过程中的作用第13页
            1.1.2.2 KNOX基因在花发育过程中的作用第13-14页
            1.1.2.3 KNOX基因在植物次生生长过程中的作用第14页
        1.1.3 KNOX基因作用调控机制研究第14-16页
            1.1.3.1 KNOX蛋白与其它蛋白的互作第14-15页
            1.1.3.2 KNOX基因参与上下游转录因子的表达调控第15-16页
        1.1.4 KNOX基因与激素的相互作用第16页
    1.2 光皮桦研究进展第16-18页
        1.2.1 光皮桦常规育种第17页
        1.2.2 光皮桦分子生物学研究第17-18页
    1.3 研究目的与意义第18-20页
第二章 光皮桦KNOX基因的克隆及序列分析第20-37页
    2.1 材料与方法第20-27页
        2.1.1 材料第20页
        2.1.2 总RNA的提取与检测第20-21页
        2.1.3 cDNA的合成第21-22页
        2.1.4 目的基因的分离与验证第22-25页
            2.1.4.1 目的基因RACE第22-23页
            2.1.4.2 目的片段的回收第23页
            2.1.4.3 目的片段的连接转化第23-24页
            2.1.4.4 全长cDNA的PCR验证第24-25页
        2.1.5 BlKNOXs生物信息学分析第25-27页
    2.2 结果分析第27-35页
        2.2.1 光皮桦BlKNOXs基因序列分析第27-29页
        2.2.2 BlKNOXs基因氨基酸序列分析第29页
        2.2.3 BlKNOXs基因家族进化树分析第29-33页
        2.2.4 BlKNOXs基因结构分析第33页
        2.2.5 BlKNOXs基因家族上游调控序列分析第33-35页
    2.3 讨论第35-37页
第三章 光皮桦KNOX基因的表达分析第37-47页
    3.1 材料与方法第37-40页
        3.1.1 材料第37页
        3.1.2 激素处理第37-38页
            3.1.2.1 离体木质化茎段的激素处理第37-38页
            3.1.2.2 组培苗茎段的激素处理第38页
        3.1.3 应拉木诱导处理第38页
        3.1.4 总RNA的提取检测第38页
        3.1.5 cDNA的合成第38-39页
        3.1.6 定量PCR表达分析第39-40页
    3.2 结果分析第40-45页
        3.2.1 不同器官中表达差异分析第40-42页
        3.2.2 激素处理对BlKNOXs基因表达的影响第42-44页
        3.2.3 机械处理对BlKNOXs基因表达的影响第44-45页
    3.3 讨论第45-47页
第四章 光皮桦KNOX基因的遗传转化第47-57页
    4.1 材料与方法第47-51页
        4.1.1 材料第47页
        4.1.2 农杆菌介导的叶圆盘转化法第47-49页
            4.1.2.1 光皮桦遗传转化实验步骤第47-49页
            4.1.2.2 烟草遗传转化实验步骤第49页
        4.1.3 转基因阳性植株的鉴定分析第49-51页
            4.1.3.1 改良CTAB法提取植物DNA第49-50页
            4.1.3.2 烟草转基因植株GUS活性检测第50页
            4.1.3.3 烟草转基因阳性植株的表型观察和Maule染色第50-51页
    4.2 结果与分析第51-55页
        4.2.1 光皮桦转基因植株获得及鉴定第51-52页
            4.2.1.1 光皮桦转基因植株获得第51页
            4.2.1.2 光皮桦转基因植株DNA检测第51-52页
        4.2.2 烟草转基因植株获得及鉴定第52-55页
            4.2.2.1 烟草转基因植株筛选第52-53页
            4.2.2.2 烟草转基因植株GUS活性检测第53页
            4.2.2.3 烟草转基因植株PCR检测第53-54页
            4.2.2.4 烟草转基因植株表型观察和Maule染色法切片观察第54-55页
    4.3 讨论第55-57页
第五章 结论与展望第57-59页
    5.1 主要研究结果第57-58页
    5.2 研究展望第58-59页
参考文献第59-66页
附录第66-67页
个人简介第67-68页
致谢第68页

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