| 摘要 | 第4-6页 |
| Abstract | 第6-7页 |
| 英文缩略词 | 第13-15页 |
| 第1章 绪论 | 第15-25页 |
| 1.1 泡沫病毒概述 | 第15-20页 |
| 1.1.1 泡沫病毒的分类及形态特征 | 第15-16页 |
| 1.1.2 泡沫病毒的基因组结构 | 第16-17页 |
| 1.1.3 泡沫病毒基因表达调控 | 第17-18页 |
| 1.1.4 泡沫病毒的复制 | 第18-19页 |
| 1.1.5 泡沫病毒载体 | 第19-20页 |
| 1.2 内质网应激及其信号调控的概述 | 第20-22页 |
| 1.3 本研究的意义及技术路线 | 第22-25页 |
| 1.3.1 本研究的意义 | 第22-23页 |
| 1.3.2 本研究的技术路线 | 第23-25页 |
| 第2章 PFV样品的制备及定量 | 第25-35页 |
| 2.1 实验材料与仪器设备 | 第25-29页 |
| 2.1.1 实验材料 | 第25-28页 |
| 2.1.2 仪器设备 | 第28-29页 |
| 2.2 方法 | 第29-32页 |
| 2.2.1 细胞复苏 | 第29页 |
| 2.2.2 细胞传代 | 第29页 |
| 2.2.3 PFV感染BHK-21细胞 | 第29-30页 |
| 2.2.4 PFV样品浓缩 | 第30页 |
| 2.2.5 PFV粒子的检测 | 第30-31页 |
| 2.2.6 BHK21-5LTR-EGFP指示细胞系测定病毒滴度 | 第31-32页 |
| 2.3 实验结果 | 第32-34页 |
| 2.3.1 质粒DNA的制备 | 第32-33页 |
| 2.3.2 病毒粒子核酸水平的检测 | 第33页 |
| 2.3.3 病毒定量结果 | 第33-34页 |
| 2.4 讨论 | 第34-35页 |
| 第3章 PFV感染HT1080细胞引发ERS | 第35-53页 |
| 3.1 实验材料与仪器设备 | 第35-39页 |
| 3.1.1 实验材料 | 第35-38页 |
| 3.1.2 仪器设备 | 第38-39页 |
| 3.2 方法 | 第39-46页 |
| 3.2.1 细胞复苏传代及冻存 | 第39页 |
| 3.2.2 PFV感染HT080细胞 | 第39-40页 |
| 3.2.3 RNA的提取及定量 | 第40页 |
| 3.2.4 逆转录PCR | 第40-41页 |
| 3.2.5 剪切型XBP1在核酸水平的鉴定 | 第41-42页 |
| 3.2.6 实时定量PCR | 第42-43页 |
| 3.2.7 Western blot | 第43-46页 |
| 3.3 结果 | 第46-50页 |
| 3.3.1 XBP1-s目的片段检测结果 | 第46-47页 |
| 3.3.2 ERS相关基因的实时定量PCR检测结果 | 第47页 |
| 3.3.3 ERS相关蛋白检测结果 | 第47-50页 |
| 3.4 小结与讨论 | 第50-53页 |
| 第4章 ERS对PFV复制的影响 | 第53-63页 |
| 4.1 实验材料及仪器设备 | 第53页 |
| 4.1.1 实验材料 | 第53页 |
| 4.1.2 仪器设备 | 第53页 |
| 4.2 实验方法与步骤 | 第53-57页 |
| 4.2.1 细胞复苏、传代及冻存 | 第53-54页 |
| 4.2.2 MTT细胞活性检测 | 第54页 |
| 4.2.3 RNA的提取及定量 | 第54页 |
| 4.2.4 实时定量PCR | 第54-57页 |
| 4.2.5 Western blot | 第57页 |
| 4.3 实验结果 | 第57-61页 |
| 4.3.1 TUDCA对细胞活性影响结果 | 第57-58页 |
| 4.3.2 TUDCA工作浓度的确定 | 第58-59页 |
| 4.3.3 PFV基因gag及bet实时定量检测结果 | 第59页 |
| 4.3.4 PFV各蛋白的表达结果 | 第59-61页 |
| 4.4 小结与讨论 | 第61-63页 |
| 第5章 讨论与展望 | 第63-65页 |
| 5.1 结论 | 第63-64页 |
| 5.2 展望 | 第64-65页 |
| 参考文献 | 第65-73页 |
| 致谢 | 第73页 |
