| 摘要 | 第1-6页 |
| ABSTRACT | 第6-13页 |
| 第一章 绪论 | 第13-28页 |
| ·杆状病毒研究进展 | 第13-20页 |
| ·杆状病毒及其分类 | 第13-14页 |
| ·杆状病毒发育循环和感染周期 | 第14-16页 |
| ·杆状病毒分子生物学研究 | 第16-17页 |
| ·杆状病毒多角体蛋白 | 第17页 |
| ·杆状病毒的用途 | 第17-18页 |
| ·杆状病毒与抗体 | 第18-20页 |
| ·主要相关技术介绍 | 第20-26页 |
| ·单克隆抗体技术 | 第20-22页 |
| ·抗原表位鉴定技术 | 第22-23页 |
| ·Bac-to-Bac杆状病毒表达技术 | 第23-26页 |
| ·本研究的目的意义和主要内容 | 第26-28页 |
| ·本研究的目的意义 | 第26-27页 |
| ·本研究的主要内容 | 第27-28页 |
| 第二章 Bm NPV多角体蛋白单克隆抗体的制备 | 第28-37页 |
| ·材料 | 第28-30页 |
| ·实验动物、细胞和毒株 | 第28页 |
| ·主要试剂、溶液和培养基配制 | 第28-29页 |
| ·主要实验用品和仪器设备 | 第29-30页 |
| ·方法 | 第30-35页 |
| ·BaLb/c小鼠免疫 | 第30页 |
| ·BmNPV多角体间接ELISA和鼠抗血清的抗体效价检测 | 第30-31页 |
| ·细胞融合和HAT培养基选择培养 | 第31-33页 |
| ·有限稀释法亚克隆培养与阳性杂交瘤细胞系筛选 | 第33-34页 |
| ·杂交瘤细胞的扩大培养与冻存 | 第34页 |
| ·单克隆抗体的大量制备、纯化及保存 | 第34-35页 |
| ·结果 | 第35-36页 |
| ·BaLb/c小鼠免疫和间接ELISA检测鼠抗血清抗体效价 | 第35页 |
| ·杂交瘤细胞融合筛选结果和阳性杂交瘤细胞系的建立 | 第35-36页 |
| ·讨论 | 第36-37页 |
| 第三章 Bm NPV多角体蛋白单克隆抗体的鉴定 | 第37-48页 |
| ·材料 | 第37-39页 |
| ·细胞和毒株 | 第37页 |
| ·主要试剂和溶液配制 | 第37-38页 |
| ·主要实验仪器设备 | 第38-39页 |
| ·方法 | 第39-43页 |
| ·阳性杂交瘤细胞染色体分析 | 第39-40页 |
| ·腹水单抗效价测定 | 第40页 |
| ·单克隆抗体Ig类、亚类和轻链的鉴定 | 第40页 |
| ·单克隆抗体的Western blot鉴定 | 第40-42页 |
| ·BmNPV多角体单抗交叉反应实验 | 第42页 |
| ·多种多角体抗原决定簇表位比较 | 第42-43页 |
| ·结果 | 第43-47页 |
| ·阳性杂交瘤细胞染色体特征 | 第43页 |
| ·腹水单抗效价 | 第43-44页 |
| ·单克隆抗体Ig类、亚类和轻链特征 | 第44页 |
| ·单克隆抗体的Western blot结果 | 第44-45页 |
| ·BmNPV多角体单抗交叉反应结果 | 第45-46页 |
| ·多种多角体抗原决定簇表位比较结果 | 第46-47页 |
| ·讨论 | 第47-48页 |
| 第四章 Bm NPV多角体单克隆抗体抗原表位的初步鉴定 | 第48-64页 |
| ·材料 | 第48-52页 |
| ·质粒、菌株 | 第48页 |
| ·主要试剂 | 第48页 |
| ·主要缓冲液配置 | 第48-50页 |
| ·主要培养基和平板配制 | 第50-51页 |
| ·主要仪器设备 | 第51-52页 |
| ·方法 | 第52-58页 |
| ·引物设计与合成 | 第52页 |
| ·F1-F6 片段的PCR | 第52-53页 |
| ·连接反应 | 第53页 |
| ·感受态细胞制备 | 第53-54页 |
| ·质粒DNA转化 | 第54页 |
| ·SDS-碱裂解法小量抽提质粒DNA | 第54-55页 |
| ·质粒 DNA 酶切鉴定 | 第55页 |
| ·重组转座载体的构建 | 第55页 |
| ·重组Bacmid穿梭载体的构建 | 第55-56页 |
| ·重组Bacmid的提取 | 第56-57页 |
| ·重组Bacmid的PCR鉴定 | 第57页 |
| ·Tn细胞的培养 | 第57页 |
| ·重组Bacmid转染Tn细胞 | 第57页 |
| ·重组F1-6-EGFP杆状病毒的蛋白表达 | 第57页 |
| ·Western blot分析 | 第57-58页 |
| ·结果 | 第58-62页 |
| ·重组转座载体pFastBac- F1-6-EGFP的酶切鉴定 | 第58页 |
| ·重组穿梭载体bacmid的PCR鉴定 | 第58-60页 |
| ·重组F1-6-EGFP杆状病毒感染Tn细胞的观察 | 第60-62页 |
| ·BmNPV多角体片段F1-6-EGFP的Western blot结果 | 第62页 |
| ·讨论 | 第62-64页 |
| 第五章 总结和展望 | 第64-65页 |
| ·总结 | 第64页 |
| ·展望 | 第64-65页 |
| 参考文献 | 第65-68页 |
| 致谢 | 第68-69页 |
| 攻读硕士期间主要科研工作和相关论文 | 第69页 |
