摘要 | 第5-9页 |
Abstract | 第9-13页 |
第一章 序言 | 第17-22页 |
1.1 研究目的 | 第17页 |
1.2 研究背景 | 第17-21页 |
1.3 研究方法 | 第21页 |
1.4 研究路线 | 第21-22页 |
第二章 MCF-7/ADR细胞耐药性的鉴定 | 第22-40页 |
2.1 前言 | 第22页 |
2.2 实验材料 | 第22-23页 |
2.2.1 主要实验细胞 | 第22-23页 |
2.2.2 主要仪器设备 | 第23页 |
2.2.3 主要试剂 | 第23页 |
2.3 实验方法 | 第23-31页 |
2.3.1 细胞培养 | 第23-25页 |
2.3.2 阿霉素处理24h后MCF-7与MCF-7/ADR细胞形态的变化 | 第25页 |
2.3.3 WST-1法检测MCF-7/ADR细胞的耐药性 | 第25-26页 |
2.3.4 流式细胞术检测细胞凋亡 | 第26-27页 |
2.3.5 耐药基因MDR1、MRP1与BCRP的鉴定 | 第27-30页 |
2.3.6 流式细胞仪检测细胞内阿霉素蓄积量 | 第30-31页 |
2.3.7 数据统计学分析 | 第31页 |
2.4 结果 | 第31-38页 |
2.4.1 MCF-7/ADR细胞具有耐阿霉素特性 | 第31-33页 |
2.4.2 MCF-7/ADR细胞具有稳定的耐药性 | 第33-34页 |
2.4.3 MCF-7/ADR细胞不容易发生细胞凋亡 | 第34-36页 |
2.4.4 MCF-7/ADR细胞内耐药基因MRP1与MDR1处于高表达水平 | 第36页 |
2.4.5 MCF-7/ADR细胞对阿霉素具有外排性 | 第36-38页 |
2.5 讨论 | 第38-39页 |
2.6 本章小结 | 第39-40页 |
第三章 miR-200a、miR-877逆转MCF-7/ADR细胞耐药性的功能研究 | 第40-67页 |
3.1 前言 | 第40页 |
3.2 实验材料 | 第40-42页 |
3.2.1 主要实验细胞 | 第40页 |
3.2.2 主要仪器设备 | 第40-41页 |
3.2.3 主要试剂 | 第41-42页 |
3.3 实验方法 | 第42-51页 |
3.3.1 细胞转染 | 第42-43页 |
3.3.2 转染miR-200a与miR-877后MCF-7/ADR细胞中MDR1、MRP1与BCRP的变化情况 | 第43-45页 |
3.3.3 流式细胞仪检测细胞内阿霉素蓄积量 | 第45页 |
3.3.4 miR-200a与miR-877的增殖实验 | 第45-46页 |
3.3.5 流式细胞术检测细胞凋亡 | 第46-47页 |
3.3.6 流式细胞仪检测细胞周期 | 第47-48页 |
3.3.7 transwell小室检测细胞迁移 | 第48-50页 |
3.3.8 transwell小室检测细胞侵袭 | 第50-51页 |
3.3.9 统计学数据分析 | 第51页 |
3.4 结果 | 第51-64页 |
3.4.1 高表达miR-200a、低表达miR-877可使MCF-7/ADR细胞内MDR1、MRP1与BCRPmRNA表达水平下降 | 第51-52页 |
3.4.2 高表达miR-200a、低表达miR-877可促进MCF-7/ADR细胞对阿霉素的摄取 | 第52-55页 |
3.4.3 高表达miR-200a、低表达miR-877可增加MCF-7/ADR细胞对阿霉素的敏感性 | 第55-56页 |
3.4.4 高表达miR-200a、低表达miR-877可诱导MCF-7/ADR细胞发生凋亡 | 第56-58页 |
3.4.5 高表达miR-200a、低表达miR-877可使MCF-7/ADR细胞的细胞周期阻滞于G0/G1期 | 第58-60页 |
3.4.6 高表达miR-200a、低表达miR-877可抑制MCF-7/ADR细胞发生迁移 | 第60-62页 |
3.4.7 高表达miR-200a、低表达miR-877可抑制MCF-7/ADR细胞发生侵袭 | 第62-64页 |
3.5 讨论 | 第64-66页 |
3.6 小结 | 第66-67页 |
第四章 结论与展望 | 第67-69页 |
4.1 结论 | 第67-68页 |
4.2 展望 | 第68-69页 |
参考文献 | 第69-74页 |
附录 | 第74-75页 |
致谢 | 第75-76页 |